饲粮中不同水平单宁对绵羊瘤胃细菌菌群数量及产甲烷菌多样性的影响
发布时间：2022-01-09 06:09
本论文选取45 kg左右,1-1.5岁,体况良好的杜蒙杂交羯羊15只,随机分为3组,每组5个重复,分别为试验I组（对照组,不含单宁）、试验Ⅱ组（含2%单宁）和试验Ⅲ组（含4%单宁）。本试验以柠条作为饲粮中单宁来源,三组饲粮精粗比均为4:6,按照等能等氮原则进行配置。试验预饲期为14 d,正式试验期为20d.于正试期的18d和19d晨饲前0h和晨饲后6h使用瘤胃液口腔采样器采集瘤胃液,提取微生物DNA,运用实时荧光定量PCR技术检测总细菌、白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌、溶纤维丁酸弧菌、普雷沃氏菌、牛链球菌、厌氧真菌、产甲烷菌、甲烷短杆菌数量以及mcrA基因表达量;采用16S rRNA高通量测序技术测定晨饲后6 h瘤胃液产甲烷菌和古菌多样性,旨在从瘤胃菌群数量和产甲烷菌多样性的角度探究柠条中单宁影响绵羊瘤胃甲烷生成的作用机理,为柠条等富含单宁饲料资源的开发利用和调控反刍动物生产中温室气体的排放提供科学依据。试验结果表明:（1）晨饲前0h,饲粮中含2%单宁显著降低了黄色瘤胃球菌的数量（P＜0.05）,显著增加了普雷沃氏菌的数量（P＜0.05）,也降低了总细菌、牛链球菌、溶纤维...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１柠条??Ｆｉｇ．?１?Ｃａｒａｇａｎａ?ｋｏｒｓｈｉｎｓｋｉｉ??１．２
?内蒙古农业大学硕士学位论文?ｎ??１．７论文技术路线??柠条来源单宁对绵羊瘤胃细菌菌群数量及产甲烷菌多样性的影响???＾???试验包含三个处理组，试验１组（对照组，＞１、含单宁）、??试验丨丨组（含２％单宁?＞、试验⑴组（含４％单宁）???＾???在晨饲前（Ｏｈ）和晨饲后６ｈ采集绵羊瘤胃液???＾±???提取瘤胃液微生物基因组?｜将６ｈ瘤胃液微生物基因组??ＤＮＡ，采用ＲＴ－ｑＰＣＲ技术检?粗提ＤＮＡ进行高通量测序，??测细菌、产甲烷菌数量和?分析瘤胃产甲烷菌和古菌多??ｍｃｒＡ基因表达量。同时计数?样性。??瘤胃原虫数量。??????从瘤胃微生态的角度探究单宁影晌绵羊甲烷排放的机理，旨在为柠条这一??非常规饲料资源开发利用和减少反刍动物生产中温室气体的排放提供科学??依据。??图２本论文技术路线图??Ｆｉｇ．２?Ｇｅｎｅｒａｌ?Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?ｒｏｕｔｅ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｓｔｕｄｙ??
?（２％和４％）后的产甲烷菌基因表达量的变化情况。??２．１．１．７数据统计分析??数据经Ｅｘｃｅｌ?２０１３整理，采用ＳＡＳ９．２软件包中的ｍｉｘｅｄ程序进行方差分析，??多重比较采用Ｄｕｎｃａｎ氏法，结果用平均数和标准误表示，以尸＜０．０５作为差异??显著性判断标准。??２．１．２结果??２．１．２．１绵羊瘤胃液基因组粗ＤＮＡ提取的结果??本试验最终提取的样本基因组粗ＤＮＡ的ＯＤ值（Ａ２６０／Ａ２８０）在１．８？２．０??之间，浓度在１０９．１？２２３６．９ｎｇ／ｐＬ之间。图３为样本基因组ＤＮＡ的琼脂糖凝胶??电泳检测条带，条带清晰并且结构完整，目的条带位于１５００？２０００ｂｐ之间，检??测结果符合后续试验要求。??２?ＯＯＯ——＾??；＝！??５〇〇—Ｈ??２５０——■??１〇〇?？ｉ??图３绵羊瘤胃基因组ＤＮＡ凝胶图??Ｆｉｇ．３?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｒｕｍｅｎ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ?ｉｎ?ｓｈｅｅｐ??２．１．２．２目的基因ＰＣＲ扩增结果??图４为１０种菌经过ＰＣＲ扩増后的琼脂糖凝胶电泳检测结果，由图４可知各??目的基因的扩増片段长度与预期相符，且引物特异性高，满足试验要求。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]单宁对反刍动物生产性能、瘤胃发酵及微生物区系影响的研究进展[J]. 董春晓,张金龙,郭晓飞,李义海,杨晶,张效生. 畜牧兽医学报. 2020(02)
[2]醋酸棉酚对绵羊瘤胃液中原虫数量和种群多样性的影响[J]. 王彩蝶,李钰琪,屯妮萨·麦提赛伊迪,杨红建,杨开伦. 动物营养学报. 2019(10)
[3]人工湿地植物种类及多样性对甲烷释放及功能基因丰度的影响[J]. 孙红英,辛全伟,林兴生,罗海凌,林辉,严少娟,刘文莉,兰思仁. 生态学报. 2019(22)
[4]单宁酸对生长獭兔毛皮品质、免疫器官发育及抗氧化能力的影响[J]. 陈赛娟,刘亚娟,郅永伟,赵玉星,张斌,谷新晰,谷子林. 动物营养学报. 2019(11)
[5]反刍动物瘤胃优势产甲烷菌菌群结构及多样性研究进展[J]. 董利锋,付敏,陈天宝,刁其玉. 动物营养学报. 2019(09)
[6]栗子刺皮、橡子中单宁抗氧化性的研究[J]. 刘婷婷,杨新宇,夏雪茹,陈宝江. 饲料研究. 2019(06)
[7]内蒙古阿拉善左旗六种常见沙生植物的营养成分与氨基酸组成分析[J]. 王兴蕾,梁飘飘,赵敏杰,冯金朝,刘颖. 光谱学与光谱分析. 2019(01)
[8]采用Illumina MiSeq测序技术分析葡萄籽原花青素对奶牛体外瘤胃发酵产甲烷菌区系的影响[J]. 童津津,张华,孙铭维,杨德莲,张婕,熊本海,蒋林树. 动物营养学报. 2019(01)
[9]饲粮非纤维性碳水化合物（NFC）与中性洗涤纤维（NDF）比例对育成期杜寒杂交母羊生长性能、营养物质消化率和甲烷产量的影响[J]. 周艳,刁其玉,董利锋,邓凯东,许贵善,马涛. 畜牧兽医学报. 2018(07)
[10]单宁对反刍动物的营养作用[J]. 赵娅,张佩华. 湖南饲料. 2018(03)
博士论文
[1]单宁酸对肉牛瘤胃发酵、微生物区系、甲烷排放及氮排泄的调控规律[D]. 杨凯.中国农业大学 2017
[2]没食子酸和缩合单宁对体外瘤胃发酵及肉牛营养物质消化、甲烷产量和氮代谢影响的研究[D]. 魏晨.中国农业大学 2017
[3]茶皂素调控肉牛瘤胃微生物菌群结构及甲烷生成的研究[D]. 谭翠.四川农业大学 2016
[4]不同季节日粮组成对狍瘤胃微生物区系、瘤胃内环境及血清生化指标的影响[D]. 常维毅.吉林大学 2012
[5]灌木类植物单宁对绵羊瘤胃发酵影响及其对瘤胃微生物区系、免疫和生产指标影响的研究[D]. 薛树媛.内蒙古农业大学 2011
硕士论文
[1]单宁对绵羊瘤胃发酵参数、营养物质消化率和甲烷排放量的影响[D]. 王敬尧.内蒙古农业大学 2019
[2]硝酸钾和延胡索酸二钠联合使用对绵羊瘤胃发酵、甲烷生成和免疫功能的影响[D]. 姜宇晨.内蒙古农业大学 2019
[3]不同植物提取物对肉羊甲烷排放及瘤胃发酵的影响[D]. 宋坤烊.延边大学 2019
[4]胡枝子缩合单宁含量与结构的季节动态变化及其对体外瘤胃发酵的影响[D]. 何永生.兰州大学 2019
[5]苦豆子对蒙古羔羊体外发酵参数、微生物种群及血液中生理生化指标的影响[D]. 谢明欣.内蒙古农业大学 2018
[6]不同生理阶段奶牛瘤胃细菌菌群数量与多样性的比较研究[D]. 李子健.内蒙古农业大学 2018
[7]饲用纤维素酶与单宁对肉用湖羊生产性能的影响[D]. 邸凌峰.延边大学 2018
[8]不同水平的单宁对瘤胃主要纤维降解细菌纤维降解特性和细胞形态结构的影响[D]. 王卫云.内蒙古农业大学 2017
[9]板栗总苞多酚对肉牛瘤胃发酵、甲烷产量及微生物的影响[D]. 熊颖.北京农学院 2016
[10]日粮中添加单宁对绵羊和绒山羊瘤胃发酵参数及营养物质消化率的影响[D]. 于永强.内蒙古农业大学 2016
本文编号：3578118
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【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１柠条??Ｆｉｇ．?１?Ｃａｒａｇａｎａ?ｋｏｒｓｈｉｎｓｋｉｉ??１．２
?内蒙古农业大学硕士学位论文?ｎ??１．７论文技术路线??柠条来源单宁对绵羊瘤胃细菌菌群数量及产甲烷菌多样性的影响???＾???试验包含三个处理组，试验１组（对照组，＞１、含单宁）、??试验丨丨组（含２％单宁?＞、试验⑴组（含４％单宁）???＾???在晨饲前（Ｏｈ）和晨饲后６ｈ采集绵羊瘤胃液???＾±???提取瘤胃液微生物基因组?｜将６ｈ瘤胃液微生物基因组??ＤＮＡ，采用ＲＴ－ｑＰＣＲ技术检?粗提ＤＮＡ进行高通量测序，??测细菌、产甲烷菌数量和?分析瘤胃产甲烷菌和古菌多??ｍｃｒＡ基因表达量。同时计数?样性。??瘤胃原虫数量。??????从瘤胃微生态的角度探究单宁影晌绵羊甲烷排放的机理，旨在为柠条这一??非常规饲料资源开发利用和减少反刍动物生产中温室气体的排放提供科学??依据。??图２本论文技术路线图??Ｆｉｇ．２?Ｇｅｎｅｒａｌ?Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?ｒｏｕｔｅ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｓｔｕｄｙ??
?（２％和４％）后的产甲烷菌基因表达量的变化情况。??２．１．１．７数据统计分析??数据经Ｅｘｃｅｌ?２０１３整理，采用ＳＡＳ９．２软件包中的ｍｉｘｅｄ程序进行方差分析，??多重比较采用Ｄｕｎｃａｎ氏法，结果用平均数和标准误表示，以尸＜０．０５作为差异??显著性判断标准。??２．１．２结果??２．１．２．１绵羊瘤胃液基因组粗ＤＮＡ提取的结果??本试验最终提取的样本基因组粗ＤＮＡ的ＯＤ值（Ａ２６０／Ａ２８０）在１．８？２．０??之间，浓度在１０９．１？２２３６．９ｎｇ／ｐＬ之间。图３为样本基因组ＤＮＡ的琼脂糖凝胶??电泳检测条带，条带清晰并且结构完整，目的条带位于１５００？２０００ｂｐ之间，检??测结果符合后续试验要求。??２?ＯＯＯ——＾??；＝！??５〇〇—Ｈ??２５０——■??１〇〇?？ｉ??图３绵羊瘤胃基因组ＤＮＡ凝胶图??Ｆｉｇ．３?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｒｕｍｅｎ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ?ｉｎ?ｓｈｅｅｐ??２．１．２．２目的基因ＰＣＲ扩增结果??图４为１０种菌经过ＰＣＲ扩増后的琼脂糖凝胶电泳检测结果，由图４可知各??目的基因的扩増片段长度与预期相符，且引物特异性高，满足试验要求。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]单宁对反刍动物生产性能、瘤胃发酵及微生物区系影响的研究进展[J]. 董春晓,张金龙,郭晓飞,李义海,杨晶,张效生. 畜牧兽医学报. 2020(02)
[2]醋酸棉酚对绵羊瘤胃液中原虫数量和种群多样性的影响[J]. 王彩蝶,李钰琪,屯妮萨·麦提赛伊迪,杨红建,杨开伦. 动物营养学报. 2019(10)
[3]人工湿地植物种类及多样性对甲烷释放及功能基因丰度的影响[J]. 孙红英,辛全伟,林兴生,罗海凌,林辉,严少娟,刘文莉,兰思仁. 生态学报. 2019(22)
[4]单宁酸对生长獭兔毛皮品质、免疫器官发育及抗氧化能力的影响[J]. 陈赛娟,刘亚娟,郅永伟,赵玉星,张斌,谷新晰,谷子林. 动物营养学报. 2019(11)
[5]反刍动物瘤胃优势产甲烷菌菌群结构及多样性研究进展[J]. 董利锋,付敏,陈天宝,刁其玉. 动物营养学报. 2019(09)
[6]栗子刺皮、橡子中单宁抗氧化性的研究[J]. 刘婷婷,杨新宇,夏雪茹,陈宝江. 饲料研究. 2019(06)
[7]内蒙古阿拉善左旗六种常见沙生植物的营养成分与氨基酸组成分析[J]. 王兴蕾,梁飘飘,赵敏杰,冯金朝,刘颖. 光谱学与光谱分析. 2019(01)
[8]采用Illumina MiSeq测序技术分析葡萄籽原花青素对奶牛体外瘤胃发酵产甲烷菌区系的影响[J]. 童津津,张华,孙铭维,杨德莲,张婕,熊本海,蒋林树. 动物营养学报. 2019(01)
[9]饲粮非纤维性碳水化合物（NFC）与中性洗涤纤维（NDF）比例对育成期杜寒杂交母羊生长性能、营养物质消化率和甲烷产量的影响[J]. 周艳,刁其玉,董利锋,邓凯东,许贵善,马涛. 畜牧兽医学报. 2018(07)
[10]单宁对反刍动物的营养作用[J]. 赵娅,张佩华. 湖南饲料. 2018(03)
博士论文
[1]单宁酸对肉牛瘤胃发酵、微生物区系、甲烷排放及氮排泄的调控规律[D]. 杨凯.中国农业大学 2017
[2]没食子酸和缩合单宁对体外瘤胃发酵及肉牛营养物质消化、甲烷产量和氮代谢影响的研究[D]. 魏晨.中国农业大学 2017
[3]茶皂素调控肉牛瘤胃微生物菌群结构及甲烷生成的研究[D]. 谭翠.四川农业大学 2016
[4]不同季节日粮组成对狍瘤胃微生物区系、瘤胃内环境及血清生化指标的影响[D]. 常维毅.吉林大学 2012
[5]灌木类植物单宁对绵羊瘤胃发酵影响及其对瘤胃微生物区系、免疫和生产指标影响的研究[D]. 薛树媛.内蒙古农业大学 2011
硕士论文
[1]单宁对绵羊瘤胃发酵参数、营养物质消化率和甲烷排放量的影响[D]. 王敬尧.内蒙古农业大学 2019
[2]硝酸钾和延胡索酸二钠联合使用对绵羊瘤胃发酵、甲烷生成和免疫功能的影响[D]. 姜宇晨.内蒙古农业大学 2019
[3]不同植物提取物对肉羊甲烷排放及瘤胃发酵的影响[D]. 宋坤烊.延边大学 2019
[4]胡枝子缩合单宁含量与结构的季节动态变化及其对体外瘤胃发酵的影响[D]. 何永生.兰州大学 2019
[5]苦豆子对蒙古羔羊体外发酵参数、微生物种群及血液中生理生化指标的影响[D]. 谢明欣.内蒙古农业大学 2018
[6]不同生理阶段奶牛瘤胃细菌菌群数量与多样性的比较研究[D]. 李子健.内蒙古农业大学 2018
[7]饲用纤维素酶与单宁对肉用湖羊生产性能的影响[D]. 邸凌峰.延边大学 2018
[8]不同水平的单宁对瘤胃主要纤维降解细菌纤维降解特性和细胞形态结构的影响[D]. 王卫云.内蒙古农业大学 2017
[9]板栗总苞多酚对肉牛瘤胃发酵、甲烷产量及微生物的影响[D]. 熊颖.北京农学院 2016
[10]日粮中添加单宁对绵羊和绒山羊瘤胃发酵参数及营养物质消化率的影响[D]. 于永强.内蒙古农业大学 2016
本文编号：3578118
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