检测禽网状内皮组织增生症病毒抗体的ELISA方法的建立及其初步应用
发布时间:2022-01-14 10:41
禽网状内皮组织增生症是禽类的一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病,由反转录病毒科的禽网状内皮增生症病毒(Reticuloendotheliosisvirus,REV)引起的鸡、鸭、鹅及其他禽类发生的病理综合征,感染禽可引发肿瘤、生长矮小综合征、腺胃炎、急性网状细胞肿瘤、淋巴组织与其他组织慢性肿瘤形成等,特别要注意的是其感染胸腺和腔上囊等主要免疫器官,引起免疫组织器官萎缩,降低家禽的免疫能力,导致免疫抑制,从而为病毒和细菌的继发感染提供了便利,是继马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)、禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)之后的第三种禽病毒性肿瘤病,是近几年危害严重的鸡病之一。随着养禽业的迅速发展,免疫抑制病越来越受到人们的重视,尤其是REV已经给我国养禽业带来重大经济损失,迫切需要REV感染的快速诊断方法。目前虽然国外有检测REV抗体的试剂盒,但国内相关产品缺乏,且国外进口试剂盒价格昂贵,在鸡场进行大批量检测成本很高,不能满足实际需求,亟需研发一种简便快速,特异性强,物美价廉,适合我国养禽生产实际的方法和试剂盒。1.以合成肽为抗原检...
【文章来源】:扬州大学江苏省
【文章页数】:55 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-2封闭条件的优化??Fig.?1-2?Optimization?of?blocking?Condition??
?3h??孵育时间??图1-2封闭条件的优化??Fig.?1-2?Optimization?of?blocking?Condition??3.4.3?—抗最佳稀释倍数的确定??将上述试验确定的多肽REV-gp90-p5,以0.469ng/mL的浓度包被酶标板,用己知REV??阳性血清及?SPF?鸡血清分别按?1?:?300、1?:?400、1?:?500、1?:?600、1?:?700、1?:?800、1?:??900、1:1000进行稀释,每孔设2个重复,测定各孔的OD450nm,并计算P/N值,由表??1-5和图1-3可以看出1?:?400稀释时
2〇?扬州大学硕士学位论文???表1-6待检血清最佳孵育时间的优化???Table.?1-6?Optimization?of?the?optimal?incubation?time?for?serum?to?be?tested???一抗孵育时间?45min?60min?90min?120min?150min??Positive?0.8985?1.3095?1.521?1.501?1.581??Negative?0.0645?0.07?0.0765?0.081?0.0885??P/N?13.93?18.71?19.88?18.53?17.86??
【参考文献】:
期刊论文
[1]鸡传染性支气管炎疫苗株与广西流行野毒株鉴别方法的建立[J]. 范文胜,王海勇,唐宁,董志华,韦天超,磨美兰,韦平. 动物医学进展. 2018(05)
[2]禽网状内皮组织增生症病毒CA蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备[J]. 姜莉莉,王立成,陈强,樊兆斌. 畜牧与兽医. 2017(09)
[3]齐多夫定和单克隆抗体联合应用去除疫苗毒种中REV的污染[J]. 任志浩,李阳,苏红芹,李思菲,崔治中,常爽,赵鹏. 病毒学报. 2017(04)
[4]禽网状内皮组织增生病最新研究进展[J]. 张宁,韩昱,胡晓悦,郭莉,吴春英. 上海畜牧兽医通讯. 2017(03)
[5]鸡网状内皮组织增生症的诊治[J]. 农业灾害研究. 2016(Z1)
[6]REV感染对鸡NLRC5及其信号通路相关基因转录的影响[J]. 刘向萍,仇玲玲,郭晓敏,王克华,陈国宏. 中国家禽. 2016(16)
[7]病毒抗原表位研究方法进展及其多表位疫苗的应用[J]. 达尔肯·托肯,张渝疆,孙素荣. 疾病预防控制通报. 2016(04)
[8]小反刍兽疫病毒N蛋白B细胞表位预测、合成及间接ELISA方法的建立[J]. 曾少灵,阮周曦,唐金明,廖立珊,孙洁,林庆燕,吕建强,叶奕优,祝贺,李希强,王红英,杨俊兴,花群义. 动物医学进展. 2015(08)
[9]四川部分鸡场禽网状内皮组织增生症病毒感染情况调查[J]. 任玉鹏,张焕容,王小楠,索化夷,汤承,岳华. 动物医学进展. 2015(06)
[10]多肽合成研究进展[J]. 曲朋,宋利,赵好冬,胡学生,孙佳明,张辉. 中国现代中药. 2015(03)
博士论文
[1]我国部分种鸡群REV感染血清学调查与亚单位疫苗探索[D]. 李卫华.山东农业大学 2015
硕士论文
[1]不同宿主感染REV情况调查及分离株gp90基因序列分析[D]. 杨波.东北林业大学 2013
[2]禽网状内皮组织增生病病毒囊膜基因gp90的克隆表达及间接ELISA方法的初步建立[D]. 余冲.四川农业大学 2011
[3]禽网状内皮组织增生症病毒env基因蛋白抗原的表达及其检测应用[D]. 牛星.广西大学 2008
[4]禽网状内皮组织增生症病毒分子生物学特性的研究[D]. 吉荣.扬州大学 2002
本文编号:3588358
【文章来源】:扬州大学江苏省
【文章页数】:55 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-2封闭条件的优化??Fig.?1-2?Optimization?of?blocking?Condition??
?3h??孵育时间??图1-2封闭条件的优化??Fig.?1-2?Optimization?of?blocking?Condition??3.4.3?—抗最佳稀释倍数的确定??将上述试验确定的多肽REV-gp90-p5,以0.469ng/mL的浓度包被酶标板,用己知REV??阳性血清及?SPF?鸡血清分别按?1?:?300、1?:?400、1?:?500、1?:?600、1?:?700、1?:?800、1?:??900、1:1000进行稀释,每孔设2个重复,测定各孔的OD450nm,并计算P/N值,由表??1-5和图1-3可以看出1?:?400稀释时
2〇?扬州大学硕士学位论文???表1-6待检血清最佳孵育时间的优化???Table.?1-6?Optimization?of?the?optimal?incubation?time?for?serum?to?be?tested???一抗孵育时间?45min?60min?90min?120min?150min??Positive?0.8985?1.3095?1.521?1.501?1.581??Negative?0.0645?0.07?0.0765?0.081?0.0885??P/N?13.93?18.71?19.88?18.53?17.86??
【参考文献】:
期刊论文
[1]鸡传染性支气管炎疫苗株与广西流行野毒株鉴别方法的建立[J]. 范文胜,王海勇,唐宁,董志华,韦天超,磨美兰,韦平. 动物医学进展. 2018(05)
[2]禽网状内皮组织增生症病毒CA蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备[J]. 姜莉莉,王立成,陈强,樊兆斌. 畜牧与兽医. 2017(09)
[3]齐多夫定和单克隆抗体联合应用去除疫苗毒种中REV的污染[J]. 任志浩,李阳,苏红芹,李思菲,崔治中,常爽,赵鹏. 病毒学报. 2017(04)
[4]禽网状内皮组织增生病最新研究进展[J]. 张宁,韩昱,胡晓悦,郭莉,吴春英. 上海畜牧兽医通讯. 2017(03)
[5]鸡网状内皮组织增生症的诊治[J]. 农业灾害研究. 2016(Z1)
[6]REV感染对鸡NLRC5及其信号通路相关基因转录的影响[J]. 刘向萍,仇玲玲,郭晓敏,王克华,陈国宏. 中国家禽. 2016(16)
[7]病毒抗原表位研究方法进展及其多表位疫苗的应用[J]. 达尔肯·托肯,张渝疆,孙素荣. 疾病预防控制通报. 2016(04)
[8]小反刍兽疫病毒N蛋白B细胞表位预测、合成及间接ELISA方法的建立[J]. 曾少灵,阮周曦,唐金明,廖立珊,孙洁,林庆燕,吕建强,叶奕优,祝贺,李希强,王红英,杨俊兴,花群义. 动物医学进展. 2015(08)
[9]四川部分鸡场禽网状内皮组织增生症病毒感染情况调查[J]. 任玉鹏,张焕容,王小楠,索化夷,汤承,岳华. 动物医学进展. 2015(06)
[10]多肽合成研究进展[J]. 曲朋,宋利,赵好冬,胡学生,孙佳明,张辉. 中国现代中药. 2015(03)
博士论文
[1]我国部分种鸡群REV感染血清学调查与亚单位疫苗探索[D]. 李卫华.山东农业大学 2015
硕士论文
[1]不同宿主感染REV情况调查及分离株gp90基因序列分析[D]. 杨波.东北林业大学 2013
[2]禽网状内皮组织增生病病毒囊膜基因gp90的克隆表达及间接ELISA方法的初步建立[D]. 余冲.四川农业大学 2011
[3]禽网状内皮组织增生症病毒env基因蛋白抗原的表达及其检测应用[D]. 牛星.广西大学 2008
[4]禽网状内皮组织增生症病毒分子生物学特性的研究[D]. 吉荣.扬州大学 2002
本文编号:3588358
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