鸡传染性贫血病毒的分离鉴定及其VP3蛋白单克隆抗体的研制
发布时间：2022-01-20 08:16
鸡传染性贫血病毒（chicken infectious anemia virus，CIAV）是引起家禽免疫抑制病的一种重要病原体。该病在世界主要养禽国家都有报道,已在世界范围内广泛分布,给养禽业带来巨大经济损失。本论文就鸡传染性贫血病毒的分离鉴定及CIAV-CZC1602的全基因测序、鸡传染性贫血病毒VP3蛋白原核表达载体的构建以及抗CIAV-VP3蛋白单克隆抗体的研制三个方面展开研究,对CIAV流行规律、遗传变异以及检测方法建立具有重要意义。1、鸡传染性贫血病毒的分离鉴定以及CIAV-CZC1602株的遗传演化分析本研究对江苏地区养殖场内发生的疑似鸡传染性贫血病毒（CIAV）感染病例以及疑似污染有CIAV的疫苗进行检测与诊断。首先对送检病例及疫苗进行了 CIAV病毒特异性DNA片段的PCR扩增。然后将PCR阳性组织样品及疫苗样品处理后接种CIAV易感细胞MDCC-MSB1细胞进行了病毒分离。成功分离到了四株CIAV病毒,分别命名为CIAV-CZC1602,CIAV-LHC1710,CIAV-HJC1709 和 CIAV-YC1711。同时为了解 CIAV 分离株的全基因变异情况,对C...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１鸡传染性贫血病毒电镜照片??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ?ｏｆ?ｃｈｉｃｋｅｎ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ?ａｎｅｍｉａ?ｖｉｒｕｓ??
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３．３细胞病变结果??通过显微镜对接毒后的细胞进行观察发现，刚开始的细胞病变并不是十分明显，只有??部分细胞现肿大变圆的形态特征（如图１－７红色箭头所示），而未感染的正常细胞呈的为圆??润形态（如图１－７黑色箭头所示）。??３．４全基因扩增结果??将提取的ＣＩＡＶ－ＣＺＣ１６０２基因组，分别用合成的三段引物进行扩增，片段１扩增片??段大小约为１００４ｂｐ，片段２扩增片段大小约为１０３９ｂｐ，片段３扩增片段大小为６０２ｂｐ，??扩增产物与预期大小一致（如图１－８所示）。??■邏??图１－７细胞病变结果?图１－８三个片段ＰＣＲ扩增结果??Ｆｉｇｕｒｅ?１－７?ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?Ｃｅｌｌｕｌａｒ?ｌｅｓｉｏｎ?Ｆｉｇｕｒｅ?１－８?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ??Ｍ：?ｌｋｂＤＮＡＬａｄｄｅｒ；?１：片段?１?（１００４ｂｐ）；??２：片段?２?（１０３９ｂｐ）；?３：片段?３?（６０２ｂｐ）??
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白的截短表达及其兔抗血清制备[J]. 孙芬芬,高玉龙,潘伟,王笑梅. 江苏农业科学. 2018(17)
[2]不同分子生物学方法检测鸡传染性贫血病病毒的比较分析[J]. 张玉标,李晓晗,孟凡峰,董桂伟,任衍倍,崔治中,常爽,赵鹏. 中国家禽. 2018(07)
[3]鸡传染性贫血病病毒在MDCC-MSB1细胞的传代致弱研究[J]. 李鸿鑫,吴波良,张新珩,杨瑞杰,蔺文成,陈伟国,谢青梅. 中国家禽. 2017(15)
[4]鸡传染性贫血病病毒与三种致家禽肿瘤病毒混合感染的流行病学研究[J]. 王仙,闫彩虹,羊扬,金文杰. 中国家禽. 2017(13)
[5]家禽活疫苗中鸡传染性贫血病毒PCR检测方法的建立[J]. 邵红霞,王平平,武敏,金文杰,钱琨,秦爱建. 中国家禽. 2012(21)
[6]一种载体构建的新方法:一步克隆法[J]. 欧阳平,李玉,严红,马立新. 湖北大学学报(自然科学版). 2007(02)
[7]鸡传染性贫血病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备[J]. 陆桂丽,高玉龙,高宏雷,冉多良,王笑梅. 中国生物工程杂志. 2006(09)
[8]免疫抑制鸡群鸡传染性贫血病毒和网状内皮增生症病毒共感染检测[J]. 吉荣,刘岳龙,秦爱建,丁家波,金文杰,赵文明,崔治中,段素华,高海萍,韩方伟. 中国兽药杂志. 2001(04)
[9]PCR和斑点杂交检测鸡传染性贫血病毒[J]. 刘岳龙,崔治中,段玉友. 中国兽医学报. 1996(01)
[10]鸡传染性贫血病病毒的鉴定[J]. 崔现兰,幸桂香,吴东来,冯菊艳,李锋,曲立新. 中国畜禽传染病. 1992(06)
硕士论文
[1]一株鸡传染性贫血病毒野毒株致病性及其全基因组序列比较[D]. 李延鹏.山东农业大学 2007
本文编号：3598483
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１鸡传染性贫血病毒电镜照片??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ?ｏｆ?ｃｈｉｃｋｅｎ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ?ａｎｅｍｉａ?ｖｉｒｕｓ??
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３．３细胞病变结果??通过显微镜对接毒后的细胞进行观察发现，刚开始的细胞病变并不是十分明显，只有??部分细胞现肿大变圆的形态特征（如图１－７红色箭头所示），而未感染的正常细胞呈的为圆??润形态（如图１－７黑色箭头所示）。??３．４全基因扩增结果??将提取的ＣＩＡＶ－ＣＺＣ１６０２基因组，分别用合成的三段引物进行扩增，片段１扩增片??段大小约为１００４ｂｐ，片段２扩增片段大小约为１０３９ｂｐ，片段３扩增片段大小为６０２ｂｐ，??扩增产物与预期大小一致（如图１－８所示）。??■邏??图１－７细胞病变结果?图１－８三个片段ＰＣＲ扩增结果??Ｆｉｇｕｒｅ?１－７?ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?Ｃｅｌｌｕｌａｒ?ｌｅｓｉｏｎ?Ｆｉｇｕｒｅ?１－８?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ??Ｍ：?ｌｋｂＤＮＡＬａｄｄｅｒ；?１：片段?１?（１００４ｂｐ）；??２：片段?２?（１０３９ｂｐ）；?３：片段?３?（６０２ｂｐ）??
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白的截短表达及其兔抗血清制备[J]. 孙芬芬,高玉龙,潘伟,王笑梅. 江苏农业科学. 2018(17)
[2]不同分子生物学方法检测鸡传染性贫血病病毒的比较分析[J]. 张玉标,李晓晗,孟凡峰,董桂伟,任衍倍,崔治中,常爽,赵鹏. 中国家禽. 2018(07)
[3]鸡传染性贫血病病毒在MDCC-MSB1细胞的传代致弱研究[J]. 李鸿鑫,吴波良,张新珩,杨瑞杰,蔺文成,陈伟国,谢青梅. 中国家禽. 2017(15)
[4]鸡传染性贫血病病毒与三种致家禽肿瘤病毒混合感染的流行病学研究[J]. 王仙,闫彩虹,羊扬,金文杰. 中国家禽. 2017(13)
[5]家禽活疫苗中鸡传染性贫血病毒PCR检测方法的建立[J]. 邵红霞,王平平,武敏,金文杰,钱琨,秦爱建. 中国家禽. 2012(21)
[6]一种载体构建的新方法:一步克隆法[J]. 欧阳平,李玉,严红,马立新. 湖北大学学报(自然科学版). 2007(02)
[7]鸡传染性贫血病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备[J]. 陆桂丽,高玉龙,高宏雷,冉多良,王笑梅. 中国生物工程杂志. 2006(09)
[8]免疫抑制鸡群鸡传染性贫血病毒和网状内皮增生症病毒共感染检测[J]. 吉荣,刘岳龙,秦爱建,丁家波,金文杰,赵文明,崔治中,段素华,高海萍,韩方伟. 中国兽药杂志. 2001(04)
[9]PCR和斑点杂交检测鸡传染性贫血病毒[J]. 刘岳龙,崔治中,段玉友. 中国兽医学报. 1996(01)
[10]鸡传染性贫血病病毒的鉴定[J]. 崔现兰,幸桂香,吴东来,冯菊艳,李锋,曲立新. 中国畜禽传染病. 1992(06)
硕士论文
[1]一株鸡传染性贫血病毒野毒株致病性及其全基因组序列比较[D]. 李延鹏.山东农业大学 2007
本文编号：3598483
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