猪流行性腹泻病毒特异性SIgA胶体金试纸条的研制
发布时间：2022-01-20 18:17
猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是引起仔猪腹泻的主要病原之一,主要通过吸附于肠道上皮细胞进行感染。各年龄阶段的猪均可感染,对幼龄仔猪危害最为严重,随着日龄的增长致死率降低。仔猪感染PEDV后,出现以水样腹泻、呕吐和脱水为主要特征的临床症状。PEDV感染可刺激机体免疫系统引起免疫应答,其中分泌型Ig A（secretory Ig A,SIg A）是肠道粘膜中主要的效应分子之一,在粘膜免疫中发挥重要作用。SIg A分子由分泌成分（secretory component,SC）、两分子Ig A和连接链（Joining Chain,J）构成。与血清Ig A和二聚体Ig A（dimer Ig A,d Ig A）相比,SC是SIg A的特有组成成分,因此检测SC可以较好反映体内SIg A的水平。目前PEDV的检测方法主要有病毒分离、酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）、间接免疫荧光（indirect immuninofluorescence,IFA）、病毒中和试验以及PCR等,...
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PEDV基因组结构（Song，2012）
因此局部粘膜免疫是机体防御病原体线[60]，具有十分重要的作用。在粘膜免疫反omasi 等人首先在人体的外分泌液中发现将其命名为 SIgA[61]。SIgA 主要存在于乳汁生的外分泌液中。固有层浆细胞产生和释放的抗体，它调控一条 J 链和一个分泌成分 SC 组成的，其结连接在一起，形成 dIgA，SC 缠绕在 dIgA粘膜上发挥作用。
分别为 1.5 mg/mL，1 mg/mL，0.75 mg/mL，0.5 mg/mL。确定 T 线和 C 线最佳喷浓度。2.2.13 胶体金试纸条的组装胶体金试纸条主要由 PVC 底板、硝酸纤维素膜（NC 膜）、样品垫、金标垫和吸水五部分组成，组装图如 4-1 所示。暴露 PVC 底板的粘面后先将 NC 膜粘在 PVC 底板上金标垫和吸水垫分别置于 NC 膜的两端，且与 NC 膜两端各有 1 mm 的重叠，样品垫置金标垫的另一侧，与金标垫有 1 mm 的重叠。其中 NC 膜上划有 T 线（喷涂 PEDV）和线（喷涂 SPA）。滴加阳性样品后，样品中的 SIgA 经层析作用向吸水垫方向流动，在标垫处与金标抗体结合物结合，形成 SIgA-金标抗体三者结合的复合物，该复合物经层作用到达检测线，与 PEDV 作用后形成肉眼可见的红条带。未结合 SIgA 的金标抗体结物在质控线处与 SPA 结合，出现肉眼可见的红条带。胶体金的 T 线、C 线的喷涂以及胶体金试纸条的组装由公司完成。
【参考文献】：
期刊论文
[1]胶体金免疫层析技术在兽医领域的应用[J]. 吕春华,舒展,漆月,黄杨波. 中国畜禽种业. 2015(11)
[2]我国猪病毒性腹泻的诊断与流行病学调查研究概况[J]. 杨丽梅,马力,徐倩倩,王艳,张颖,郭时金,沈志强,王艳萍,张志美. 动物医学进展. 2014(02)
[3]胶体金免疫层析技术在临床疾病诊断中的研究进展[J]. 林一民,王云龙,胡永芳,吴立翔. 重庆医学. 2013(01)
[4]猪初乳中SIgA纯化及其单抗制备[J]. 冯志新,王海燕,刘茂军,甘源,吴叙苏,邵国青. 江苏农业学报. 2011(05)
[5]猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用[J]. 廖文军,吴健敏,谭攀,覃绍敏,陈凤莲,马玲,张伟. 动物医学进展. 2010(09)
[6]检测猪瘟病毒野毒株胶体金免疫层析方法的建立[J]. 王向鹏,孙元,杨增岐,仇华吉. 中国预防兽医学报. 2010(06)
[7]检测猪圆环病毒2型抗体SPA胶体金免疫层析方法的建立[J]. 范晓娟,李刚,史利军,张锦秀,李伟. 中国畜牧兽医. 2009(07)
[8]胶体金免疫层析法检测猪链球菌2型的研究[J]. 鞠莹,熊国华,曹远银. 现代生物医学进展. 2009(10)
[9]胶体金免疫层析法检测猪PRVgE抗体方法的建立及应用[J]. 白静,于新和,边传周. 河南科技学院学报. 2009(01)
[10]口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型诊断胶体金免疫层析方法的建立[J]. 蒋韬,梁仲,陈涓,何继军,吕律,马维民,刘在新,刘湘涛. 中国农业科学. 2008(11)
博士论文
[1]芘和萘单克隆抗体的制备及免疫检测技术的研究[D]. 孟星宇.吉林大学 2015
硕士论文
[1]猪瘟病毒抗体胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制及初步应用[D]. 尹梅.南京农业大学 2013
[2]猪瘟C株单克隆抗体制备和猪瘟胶体金快速诊断试纸条的研制[D]. 杨明.甘肃农业大学 2009
[3]A群轮状病毒单克隆抗体及免疫胶体金试纸条制备[D]. 崔晓辰.东北农业大学 2008
本文编号：3599295
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PEDV基因组结构（Song，2012）
因此局部粘膜免疫是机体防御病原体线[60]，具有十分重要的作用。在粘膜免疫反omasi 等人首先在人体的外分泌液中发现将其命名为 SIgA[61]。SIgA 主要存在于乳汁生的外分泌液中。固有层浆细胞产生和释放的抗体，它调控一条 J 链和一个分泌成分 SC 组成的，其结连接在一起，形成 dIgA，SC 缠绕在 dIgA粘膜上发挥作用。
分别为 1.5 mg/mL，1 mg/mL，0.75 mg/mL，0.5 mg/mL。确定 T 线和 C 线最佳喷浓度。2.2.13 胶体金试纸条的组装胶体金试纸条主要由 PVC 底板、硝酸纤维素膜（NC 膜）、样品垫、金标垫和吸水五部分组成，组装图如 4-1 所示。暴露 PVC 底板的粘面后先将 NC 膜粘在 PVC 底板上金标垫和吸水垫分别置于 NC 膜的两端，且与 NC 膜两端各有 1 mm 的重叠，样品垫置金标垫的另一侧，与金标垫有 1 mm 的重叠。其中 NC 膜上划有 T 线（喷涂 PEDV）和线（喷涂 SPA）。滴加阳性样品后，样品中的 SIgA 经层析作用向吸水垫方向流动，在标垫处与金标抗体结合物结合，形成 SIgA-金标抗体三者结合的复合物，该复合物经层作用到达检测线，与 PEDV 作用后形成肉眼可见的红条带。未结合 SIgA 的金标抗体结物在质控线处与 SPA 结合，出现肉眼可见的红条带。胶体金的 T 线、C 线的喷涂以及胶体金试纸条的组装由公司完成。
【参考文献】：
期刊论文
[1]胶体金免疫层析技术在兽医领域的应用[J]. 吕春华,舒展,漆月,黄杨波. 中国畜禽种业. 2015(11)
[2]我国猪病毒性腹泻的诊断与流行病学调查研究概况[J]. 杨丽梅,马力,徐倩倩,王艳,张颖,郭时金,沈志强,王艳萍,张志美. 动物医学进展. 2014(02)
[3]胶体金免疫层析技术在临床疾病诊断中的研究进展[J]. 林一民,王云龙,胡永芳,吴立翔. 重庆医学. 2013(01)
[4]猪初乳中SIgA纯化及其单抗制备[J]. 冯志新,王海燕,刘茂军,甘源,吴叙苏,邵国青. 江苏农业学报. 2011(05)
[5]猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用[J]. 廖文军,吴健敏,谭攀,覃绍敏,陈凤莲,马玲,张伟. 动物医学进展. 2010(09)
[6]检测猪瘟病毒野毒株胶体金免疫层析方法的建立[J]. 王向鹏,孙元,杨增岐,仇华吉. 中国预防兽医学报. 2010(06)
[7]检测猪圆环病毒2型抗体SPA胶体金免疫层析方法的建立[J]. 范晓娟,李刚,史利军,张锦秀,李伟. 中国畜牧兽医. 2009(07)
[8]胶体金免疫层析法检测猪链球菌2型的研究[J]. 鞠莹,熊国华,曹远银. 现代生物医学进展. 2009(10)
[9]胶体金免疫层析法检测猪PRVgE抗体方法的建立及应用[J]. 白静,于新和,边传周. 河南科技学院学报. 2009(01)
[10]口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型诊断胶体金免疫层析方法的建立[J]. 蒋韬,梁仲,陈涓,何继军,吕律,马维民,刘在新,刘湘涛. 中国农业科学. 2008(11)
博士论文
[1]芘和萘单克隆抗体的制备及免疫检测技术的研究[D]. 孟星宇.吉林大学 2015
硕士论文
[1]猪瘟病毒抗体胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制及初步应用[D]. 尹梅.南京农业大学 2013
[2]猪瘟C株单克隆抗体制备和猪瘟胶体金快速诊断试纸条的研制[D]. 杨明.甘肃农业大学 2009
[3]A群轮状病毒单克隆抗体及免疫胶体金试纸条制备[D]. 崔晓辰.东北农业大学 2008
本文编号：3599295
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