当前位置:主页 > 医学论文 > 畜牧兽医论文 >

新城疫病毒融合蛋白胞内尾部关键氨基酸定位及其对细胞自噬的影响

发布时间:2022-01-22 12:10
  背景:新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副粘病毒科,副粘病毒属,是一种有包膜的单股负链RNA病毒,其包膜上镶嵌着两种糖蛋白:血凝素-神经氨酸酶(hemagglutinin-neuraminidase,HN)和融合蛋白(fusion protein,F)。F在同源性HN的协助下对膜融合过程和致病作用起到着至关重要的作用。NDV F蛋白由553个氨基酸组成,呈三聚体结构,分为头部、茎部、跨膜区和胞内尾部(cytoplasmic tail,CT)。F蛋白为Ⅰ型糖蛋白,起初为无活性的前体F0,在宿主细胞蛋白酶的作用下被裂解活化为F1和F2两个亚单位,其中F1具有膜融合活性。当前国内外有关NDV F的研究大多集中在胞外区。关于其他副粘病毒的研究显示F的CT对调节病毒的入侵以及F的裂解和融合活性起到了重要作用。NDV F蛋白CT由31个氨基酸构成。经比较发现,不同副粘病毒之间CT的长度以及氨基酸类型有所不同。研究显示,将NDVF胞内尾部整体缺失后严重影响了合胞体的形成。Sergel T等的缺失研究显示,相比胞内尾部前段525-532aa的缺失而言,胞内尾部后段... 

【文章来源】:山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

新城疫病毒融合蛋白胞内尾部关键氨基酸定位及其对细胞自噬的影响


图3突变体蛋白表达效率流式定量检测结果??(A)各突变体具代表性的荧光直方图,x轴为荧光强度,y轴为细胞数量

突变体,荧光,标尺,探针


?山东大学硕士学位论文???■■■??wt?F?wt?F+HN?G540A+HN??■■■??N541A+HN?N542A+HN?L544A+HN??■?■HI??G545A+HN?Q546A+HN?M547A+HN??B??250-|??Z?200-?二??工?丨??i?150-??|?100-?B?j??1?JlljljOlJllii??Mutants??图4突变体蛋白引起的半融合现象(A)与半融合活性定量测定结果(B)??(A)?R18探针从鸡RBCs转移至发生半融合的BHK-21细胞表面,可通过红色荧光范围推??断半融合情况,白色箭头指示半融合事件(标尺为30(^m)。(B)半融合活性的定量结果,??以各突变体荧光强度值减阴性对照值后占野生型的百分比表示。(*,尸<0.05;?<0.01;??***,/>?<0.001;其它,戶>0.05)??Fig?4.?Qualitative(A)?and?Quantitative(B)?analysis?of?Semi-fusion?activity??39??

突变体,共转染,转染,蛋白


容物混合能力大幅上升,为??野生型的248.5%(/?<0.01),!^544八的内容物混合能力稍有下降,为野生型的??62.2%?(P<0.05)?,?N547A则大幅下降,为野生型的12.6%?(PC0.001)。其它??突变体处于野生型F蛋白的95.8%?119.9%之间,差别无统计学意义(P>0.05)??(图?5)。??3001?**??〇)?2?!??1+200-?(;?j??||?1?I??I?i?10°-?_?圓?_?_?*?i?_??Mutants??图5突变体蛋白内容物混合能力定量测定结果??以单独转染wtF的J值为阴性对照,wtF与wtHN共转染时的结果为阳性对照。用阳性对??照及各突变体的J值减去阴性对照值,将各突变体的数据以占阳性对照的百分比表示。结??果为三次以上独立实验数据的平均值(*,尸<0.05;?**,P<0.01;?***P<0.001)。??Fig?S.Content?mixing?abilities?of?wt?and?mutant?F?proteins??The?absorbance?value?of?wt?F?transfection?alone?was?taken?as?negative?control,?and?the?result??when?co-transfection?of?wt?F?and?wt?HN?as?positive?control.?The?negative?control?value?was??40??

【参考文献】:
期刊论文
[1]细胞自噬研究方法的比较与分析[J]. 李志元,张欣.  生物学杂志. 2018(04)
[2]番鸭呼肠孤病毒感染诱导细胞自噬的研究[J]. 吴异健,崔龙萍,黄诗杭,王全溪,吴晓平,周五朵,朱二鹏,黄一帆,吴宝成.  病毒学报. 2017(02)
[3]新城疫疫苗的研究进展[J]. 宋亚鹏,刘运超,姬鹏超,蒋大伟,刘畅,王国强,苏运芳,赵宝磊,陈玉梅,王聚财,邓瑞广,张改平.  中国兽医学报. 2017(02)
[4]禽流感病毒M2蛋白抑制细胞自噬体降解的研究[J]. 谷琳琳,马勇,包红梅,徐海峰,孙佳善,王秀荣,陈化兰.  中国预防兽医学报. 2017(01)
[5]新城疫的流行历史与现状[J]. 刘华雷,王志亮.  中国动物检疫. 2015(06)
[6]新城疫流行病学新特点及鹅新城疫防控策略[J]. 丁壮,尹仁福,薛聪,王建忠,钱晶.  中国兽医学报. 2015(01)



本文编号:3602174

资料下载
论文发表

本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3602174.html


Copyright(c)文论论文网All Rights Reserved | 网站地图 |

版权申明:资料由用户7661e***提供,本站仅收录摘要或目录,作者需要删除请E-mail邮箱bigeng88@qq.com