猪繁殖与呼吸综合征病毒和副猪嗜血杆菌共感染对猪炎症反应的影响
发布时间：2022-01-22 23:45
副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）是一种存在于猪上呼吸道的条件性致病菌,有15种血清型,其中1、5、12、13和15型毒力较强,且各血清型之间交叉免疫保护现象较差,血清型5、12和13在中国流行较广,造成了养猪业巨大的经济损失。猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）主要在肺泡巨噬细胞（PAM）和其它一些单核细胞系中复制,宿主免疫力下降易继发性感染猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CFSV）、猪链球菌、HPS、猪肺炎支原体、胸膜肺炎放线杆菌和沙门氏菌等病原,使患病猪的临床症状加重,死亡率增加。PRRSV感染后继发性感染HPS的现象在临床上非常普遍,但关于PRRSV与HPS共感染的相关研究较少。本课题从疑似HPS感染的发病猪的心包液和关节液中分离出一株细菌,经测序及血清分型后确定为13型HPS;研究了13型HPS的培养条件及生长曲线,不同剂量的13型HPS感染仔猪的动物模型和PRRSV与HPS共感染对仔猪致病性的影响。主要内容及结果如下:（1）13型HPS...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
型HPS在最适培养基中的相关的生长曲线；A：13型HPS在最适培养基中的生长曲线；B：13型HPS在最适培养基中的活菌对数值；C：13型HPS的活菌数与OD600值的关系；C：13型HPS在最适培养基中的pH值
图 3 重组 pMD-18T 阳性质粒的鉴定结果Fig.3 Identification of recombinant pMD-18T positive plasmidM: DL2000；1：水对照；2-4：重组质粒的目的片段（275bp)曲线正确的阳性重组质粒经紫外分光光度计测定其浓度为 344 ng/μL，然后换算成拷贝1010copies/μL，然后在按 1:10 倍比稀释成 1×108~1×102copies/μL 的质粒标准品绘制标准曲线的模板。~1×102copies/μL 的浓度为标准品的模板进行实时荧光定量 PCR，然后以标准品模为 X 轴，以 Ct 值为 Y 轴建立标准曲线(图 4）即 Y=-3.4379X + 35.056，R2=0.9931可知：斜率为-3.4379，相关系数为 0.9931，扩增效率为 100%。
图 3 重组 pMD-18T 阳性质粒的鉴定结果Fig.3 Identification of recombinant pMD-18T positive plasmidM: DL2000；1：水对照；2-4：重组质粒的目的片段（275bp)3.2.1.2 标准曲线上述测序正确的阳性重组质粒经紫外分光光度计测定其浓度为 344 ng/μL，然后换算成拷贝数并稀释至 1×1010copies/μL，然后在按 1:10 倍比稀释成 1×108~1×102copies/μL 的质粒标准品，将此浓度作为绘制标准曲线的模板。以 1×108~1×102copies/μL 的浓度为标准品的模板进行实时荧光定量 PCR，然后以标准品模板拷贝数对数为 X 轴，以 Ct 值为 Y 轴建立标准曲线(图 4）即 Y=-3.4379X + 35.056，R2=0.9931。由此标准曲线可知：斜率为-3.4379，相关系数为 0.9931，扩增效率为 100%。
【参考文献】：
期刊论文
[1]某猪场猪瘟典型病例综合诊断及病毒E2基因分析[J]. 李焱,马梓承,刘照虎,王宏宇,孟凡亮,曹龙龙,焦秋林,刘蒙达,李宝全,刘思当. 中国细胞生物学学报. 2019(03)
[2]猪副猪嗜血杆菌病及其综合防控措施[J]. 高倞. 中国畜牧兽医文摘. 2015(08)
[3]不同培养方式对副猪嗜血杆菌发酵的影响[J]. 付强,程立坤,苗立中,王艳,沈志强. 中国畜牧兽医. 2014(10)
[4]副猪嗜血杆菌荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 苗立中,沈志强,韩文瑜. 动物医学进展. 2012(11)
[5]副猪嗜血杆菌血清型4液体发酵培养试验研究[J]. 林标声,李晓华,戴爱玲,杨小燕. 黑龙江畜牧兽医. 2012(09)
[6]副猪嗜血杆菌灭活疫苗对仔猪免疫保护效力的研究[J]. 宋凤香,陆桂英,肖丽辉,肖毅. 山东畜牧兽医. 2010(06)
[7]副猪嗜血杆菌感染诊断方法和最新基因分型方法的研究进展[J]. 李艳,刘静,Alex Olvera,Joaquim Segales. 国外畜牧学(猪与禽). 2008(05)
[8]副猪嗜血杆菌血清5型间接血凝试验和间接ELISA抗体检测方法的建立[J]. 石碧,崔耀文,贾凡,金卉,万云,蔡旭旺,方刚,陈焕春,周锐. 中国兽医科学. 2007(11)
[9]PRRSV缺失变异毒株HB-2（sh）/2002在人工感染仔猪组织中的分布与定位[J]. 匡宇,郭鑫,滕可导,杨汉春,陈艳红,查振林. 中国兽医杂志. 2007(03)
[10]副猪嗜血杆菌抗体间接血凝检测方法的建立及应用[J]. 魏子贡,蔡旭旺,金梅林,胡军勇,葛君,陈焕春. 中国兽医科学. 2006(09)
博士论文
[1]副猪嗜血杆菌感染致炎症相关信号通路的研究[D]. 陈雨珊.华中农业大学 2016
[2]副猪嗜血杆菌的分离鉴定及诊断方法与灭活疫苗的研究[D]. 蔡旭旺.华中农业大学 2006
硕士论文
[1]屠宰生猪肺脏健康评估及副猪嗜血杆菌的分离鉴定[D]. 冯秀.西北农林科技大学 2018
[2]山东省某猪场猪瘟病例的诊断及病毒分离鉴定[D]. 段辉.山东农业大学 2016
[3]副猪嗜血杆菌病重组亚单位疫苗候选抗原蛋白的免疫保护效力评价[D]. 李大鹏.中国农业科学院 2016
本文编号：3603145
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
型HPS在最适培养基中的相关的生长曲线；A：13型HPS在最适培养基中的生长曲线；B：13型HPS在最适培养基中的活菌对数值；C：13型HPS的活菌数与OD600值的关系；C：13型HPS在最适培养基中的pH值
图 3 重组 pMD-18T 阳性质粒的鉴定结果Fig.3 Identification of recombinant pMD-18T positive plasmidM: DL2000；1：水对照；2-4：重组质粒的目的片段（275bp)曲线正确的阳性重组质粒经紫外分光光度计测定其浓度为 344 ng/μL，然后换算成拷贝1010copies/μL，然后在按 1:10 倍比稀释成 1×108~1×102copies/μL 的质粒标准品绘制标准曲线的模板。~1×102copies/μL 的浓度为标准品的模板进行实时荧光定量 PCR，然后以标准品模为 X 轴，以 Ct 值为 Y 轴建立标准曲线(图 4）即 Y=-3.4379X + 35.056，R2=0.9931可知：斜率为-3.4379，相关系数为 0.9931，扩增效率为 100%。
图 3 重组 pMD-18T 阳性质粒的鉴定结果Fig.3 Identification of recombinant pMD-18T positive plasmidM: DL2000；1：水对照；2-4：重组质粒的目的片段（275bp)3.2.1.2 标准曲线上述测序正确的阳性重组质粒经紫外分光光度计测定其浓度为 344 ng/μL，然后换算成拷贝数并稀释至 1×1010copies/μL，然后在按 1:10 倍比稀释成 1×108~1×102copies/μL 的质粒标准品，将此浓度作为绘制标准曲线的模板。以 1×108~1×102copies/μL 的浓度为标准品的模板进行实时荧光定量 PCR，然后以标准品模板拷贝数对数为 X 轴，以 Ct 值为 Y 轴建立标准曲线(图 4）即 Y=-3.4379X + 35.056，R2=0.9931。由此标准曲线可知：斜率为-3.4379，相关系数为 0.9931，扩增效率为 100%。
【参考文献】：
期刊论文
[1]某猪场猪瘟典型病例综合诊断及病毒E2基因分析[J]. 李焱,马梓承,刘照虎,王宏宇,孟凡亮,曹龙龙,焦秋林,刘蒙达,李宝全,刘思当. 中国细胞生物学学报. 2019(03)
[2]猪副猪嗜血杆菌病及其综合防控措施[J]. 高倞. 中国畜牧兽医文摘. 2015(08)
[3]不同培养方式对副猪嗜血杆菌发酵的影响[J]. 付强,程立坤,苗立中,王艳,沈志强. 中国畜牧兽医. 2014(10)
[4]副猪嗜血杆菌荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 苗立中,沈志强,韩文瑜. 动物医学进展. 2012(11)
[5]副猪嗜血杆菌血清型4液体发酵培养试验研究[J]. 林标声,李晓华,戴爱玲,杨小燕. 黑龙江畜牧兽医. 2012(09)
[6]副猪嗜血杆菌灭活疫苗对仔猪免疫保护效力的研究[J]. 宋凤香,陆桂英,肖丽辉,肖毅. 山东畜牧兽医. 2010(06)
[7]副猪嗜血杆菌感染诊断方法和最新基因分型方法的研究进展[J]. 李艳,刘静,Alex Olvera,Joaquim Segales. 国外畜牧学(猪与禽). 2008(05)
[8]副猪嗜血杆菌血清5型间接血凝试验和间接ELISA抗体检测方法的建立[J]. 石碧,崔耀文,贾凡,金卉,万云,蔡旭旺,方刚,陈焕春,周锐. 中国兽医科学. 2007(11)
[9]PRRSV缺失变异毒株HB-2（sh）/2002在人工感染仔猪组织中的分布与定位[J]. 匡宇,郭鑫,滕可导,杨汉春,陈艳红,查振林. 中国兽医杂志. 2007(03)
[10]副猪嗜血杆菌抗体间接血凝检测方法的建立及应用[J]. 魏子贡,蔡旭旺,金梅林,胡军勇,葛君,陈焕春. 中国兽医科学. 2006(09)
博士论文
[1]副猪嗜血杆菌感染致炎症相关信号通路的研究[D]. 陈雨珊.华中农业大学 2016
[2]副猪嗜血杆菌的分离鉴定及诊断方法与灭活疫苗的研究[D]. 蔡旭旺.华中农业大学 2006
硕士论文
[1]屠宰生猪肺脏健康评估及副猪嗜血杆菌的分离鉴定[D]. 冯秀.西北农林科技大学 2018
[2]山东省某猪场猪瘟病例的诊断及病毒分离鉴定[D]. 段辉.山东农业大学 2016
[3]副猪嗜血杆菌病重组亚单位疫苗候选抗原蛋白的免疫保护效力评价[D]. 李大鹏.中国农业科学院 2016
本文编号：3603145
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