PI3K/AKT和MEK/ERK通路调控H3K27me3甲基化酶和去甲基化酶基因表达的研究
发布时间：2022-01-24 20:41
组蛋白甲基化是一种重要的表观遗传修饰，参与基因的表达调控。组蛋白H3K27me3是抑制基因转录的表观遗传修饰标记之一，可以抑制靶基因的转录。目前研究发现，组蛋白H3K27me3受组蛋白甲基化酶和去甲基化酶的调控。其中，Zester同源增强子2是组蛋白H3K27甲基化转移酶，EZH1是它的同源物，它们都是Polycomb蛋白家族的成员。UTX和JMJD3是组蛋白H3K27me3去甲基化酶。PI3K/AKT信号通路对组蛋白甲基化酶EZH2基因表达已经有报道，但在成肌细胞分化过程中是否调控组蛋白H3K27甲基化酶和去甲基化酶的表达还不清楚，我们用小鼠成肌细胞C2C12为研究材料，采用免疫印迹、染色质免疫共沉淀（Chromatinimmunoprecipitation，CHIP）、定量PCR（Q-PCR）的方法研究PI3K/AKT信号通路在成肌细胞分化阶段对组蛋白H3K27甲基化酶EZH1/EZH2和去甲基化酶UTX/JMJD3的表达调控。此外，在多种肿瘤组织中检测到EZH2存在过表达的现象，UTX和JMJD3也被检测到发生突变或者表达下降。MEK/ERK信号通路是生物体内广泛存在的一条信号通...
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：96 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
目录
缩略词表（Abbreviations）
第一章 文献综述
1.1 表观遗传学
1.1.1 表观遗传学的定义
1.1.2 DNA甲基化修饰
1.1.3 染色质重塑
1.1.4 组蛋白修饰
1.1.5 RNA干扰
1.1.6 非编码RNA
1.1.7 表观遗传调控与X染色体失活
1.1.8 表观遗传调控与胚胎发育
1.1.9 表观遗传调控与肿瘤
1.1.10 表观遗传调控与肌肉发育
1.1.11 组蛋白乙酰化
1.1.12 组蛋白磷酸化
1.1.13 组蛋白甲基化
1.1.14 组蛋白甲基化酶和去甲基化酶研究进展
1.2 PI3K/AKT信号通路的研究
1.3 MEK/ERK信号通路的研究
1.3.1 MEK/ERK信号通路概述
1.3.2 MEK/ERK信号通路与EZH2基因表达
1.4 研究的目的和意义
第二章 成肌细胞分化过程EZH1/EZH2和UTX/JMJD3的表达
前言
2.1 材料与方法
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验方法
2.1.3 统计分析
2.2 结果
2.2.1 吉姆萨染色鉴定成肌细胞分化
2.2.2 C2C12细胞分化过程中MyHC、Myogenin、MCK蛋白表达
2.2.3 C2C12细胞分化过程中EZH1/EZH2、UTX/JMJD3的表达
2.3 分析和讨论
第三章 成肌细胞分化过程中PI3K/AKT通路调控EZH1/EZH2和UTX/JMJD3的表达
前言
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 实验方法
3.1.3 统计分析
3.2 结果
3.2.1 IGF-1和Ly294002处理分化C2C12细胞Myogenin、MCK蛋白表达
3.2.2 组蛋白H3K27me3富集
3.2.3 IGF-1和Ly294002处理分化C2C12细胞EZH1/EZH2、UTX/JMJD3蛋白的表达
3.3 分析与讨论
第四章 MER/ERK信号通路调控EZH1/EZH2和UTX/JMJD3基因的表达
前言
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 实验方法
4.1.3 统计分析
4.2 结果
4.2.1 MEK/ERK信号通路抑制剂抑制ERK磷酸化
4.2.2 MEK/ERK信号通路抑制剂对EZH1、EZH2基因mRNA表达的影响
4.2.3 MEK/ERK信号通路抑制剂对EZH1、EZH2蛋白表达的影响
4.2.4 MEK/ERK信号通路抑制剂对UTX、JMJD3基因mRNA表达的影响
4.2.5 MEK/ERK信号通路抑制剂对UTX、JMJD3蛋白表达的影响
4.3 分析和讨论
第五章 MER/ERK信号通路在肿瘤细胞调控EZH1/EZH2和UTX/JMJD3的表达
前言
5.1 材料与方法
5.1.1 材料
5.1.2 实验方法
5.1.3 统计分析
5.2 结果
5.2.1 免疫荧光检测
5.2.2 细胞核内蛋白的表达
5.2.3 Timecouse检测MEK/ERK信号通路抑制剂对HEPA1-6细胞的影响
5.2.4 siRNA干扰对蛋白表达影响
5.3 分析和讨论
第六章 结论
第七章 创新点
参考文献
致谢
导师简介
个人简介
导师评阅表
本文编号：3607265
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：96 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
目录
缩略词表（Abbreviations）
第一章 文献综述
1.1 表观遗传学
1.1.1 表观遗传学的定义
1.1.2 DNA甲基化修饰
1.1.3 染色质重塑
1.1.4 组蛋白修饰
1.1.5 RNA干扰
1.1.6 非编码RNA
1.1.7 表观遗传调控与X染色体失活
1.1.8 表观遗传调控与胚胎发育
1.1.9 表观遗传调控与肿瘤
1.1.10 表观遗传调控与肌肉发育
1.1.11 组蛋白乙酰化
1.1.12 组蛋白磷酸化
1.1.13 组蛋白甲基化
1.1.14 组蛋白甲基化酶和去甲基化酶研究进展
1.2 PI3K/AKT信号通路的研究
1.3 MEK/ERK信号通路的研究
1.3.1 MEK/ERK信号通路概述
1.3.2 MEK/ERK信号通路与EZH2基因表达
1.4 研究的目的和意义
第二章 成肌细胞分化过程EZH1/EZH2和UTX/JMJD3的表达
前言
2.1 材料与方法
2.1.1 实验材料
2.1.2 实验方法
2.1.3 统计分析
2.2 结果
2.2.1 吉姆萨染色鉴定成肌细胞分化
2.2.2 C2C12细胞分化过程中MyHC、Myogenin、MCK蛋白表达
2.2.3 C2C12细胞分化过程中EZH1/EZH2、UTX/JMJD3的表达
2.3 分析和讨论
第三章 成肌细胞分化过程中PI3K/AKT通路调控EZH1/EZH2和UTX/JMJD3的表达
前言
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 实验方法
3.1.3 统计分析
3.2 结果
3.2.1 IGF-1和Ly294002处理分化C2C12细胞Myogenin、MCK蛋白表达
3.2.2 组蛋白H3K27me3富集
3.2.3 IGF-1和Ly294002处理分化C2C12细胞EZH1/EZH2、UTX/JMJD3蛋白的表达
3.3 分析与讨论
第四章 MER/ERK信号通路调控EZH1/EZH2和UTX/JMJD3基因的表达
前言
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 实验方法
4.1.3 统计分析
4.2 结果
4.2.1 MEK/ERK信号通路抑制剂抑制ERK磷酸化
4.2.2 MEK/ERK信号通路抑制剂对EZH1、EZH2基因mRNA表达的影响
4.2.3 MEK/ERK信号通路抑制剂对EZH1、EZH2蛋白表达的影响
4.2.4 MEK/ERK信号通路抑制剂对UTX、JMJD3基因mRNA表达的影响
4.2.5 MEK/ERK信号通路抑制剂对UTX、JMJD3蛋白表达的影响
4.3 分析和讨论
第五章 MER/ERK信号通路在肿瘤细胞调控EZH1/EZH2和UTX/JMJD3的表达
前言
5.1 材料与方法
5.1.1 材料
5.1.2 实验方法
5.1.3 统计分析
5.2 结果
5.2.1 免疫荧光检测
5.2.2 细胞核内蛋白的表达
5.2.3 Timecouse检测MEK/ERK信号通路抑制剂对HEPA1-6细胞的影响
5.2.4 siRNA干扰对蛋白表达影响
5.3 分析和讨论
第六章 结论
第七章 创新点
参考文献
致谢
导师简介
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本文编号：3607265
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