重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗研究及应用
发布时间：2022-01-25 20:51
高致病性H5和H7亚型禽流感的暴发不仅给养禽业造成重大损失,也给人类的生命健康构成严重威胁,而疫苗免疫是预防禽流感的主动措施、关键环节和最后防线。因此,为了防止H5和H7亚型禽流感在中国的肆虐,重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9H7-Re1株）于2017年在养殖场中广泛应用。但是,2017年底以来的全国禽流感流行病学调查结果显示,我国H5亚型禽流感病毒以2.3.2.1和2.3.4.4分支为主,并且2.3.4.4d分支和2.3.2.1d分支病毒已成为当前威胁我国养禽业的主要流行株。进一步的抗原性分析和攻毒试验结果表明,Re-8株疫苗株与2018年分离到的2.3.4.4d和2.3.2.1d分支代表病毒株均存在较大抗原性差异,并且在临床上所使用的二价灭活疫苗不能对当时流行的H5亚型高致病性禽流感病毒提供完全保护作用,因此需要将H5N1 Re-8株疫苗种毒进行更新。此外,H7N9 H7-Re1株与分离到的部分H7N9病毒的抗原性差异较大,并且这种差异还在不断增加,因此将H7N9 H7-Re1株疫苗种毒一并进行更新。本研究将构建的H5亚型Re-11株、Re-...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
种毒免疫原性HI抗体测定结果
中国农业科学院硕士学位论文第三章重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗的实验室研究25扰。图3-1不同灭活疫苗免疫后HI抗体测定结果Fig3-1HIantibodytitersafterimmunizationwithdifferentvaccines3.3.2成品物理性状的检验对制备的3批（20180322、20180326、20180329）三价灭活疫苗进行物理性状检验，结果表明，3批疫苗均为乳白色均匀乳剂，油包水型，离心后管底无水量析出，具有较好的稳定性，黏度分别在65.3cp、66.5cp、68.6cp之间，符合黏度低于200cp的标准。详见表3-1。表3-13批三价灭活疫苗性状检验结果Table3-1Theresultsofthreebatchesoftrivalentvaccine疫苗批次外观剂型稳定性黏度（cp）20180322乳白色均匀乳剂油包水型无水析出66.520180326乳白色均匀乳剂油包水型无水析出68.620180329乳白色均匀乳剂油包水型无水析出65.33.3.33批三价灭活疫苗安全性试验将各疫苗以2mL/只的剂量免疫SPF鸡、SPF鸭和商品鹅后，均观察14d，各免疫禽免疫部位无炎症反应，疫苗吸收良好，仅有少量残留，采食、饮水和精神状态均正常，无不良临床症状。3.3.43批三价灭活疫苗免疫效力试验3.3.4.13批三价灭活疫苗对鸡的免疫效力评估3批三价灭活疫苗（20180322、20180326、20180329）以0.3mL/只的剂量免疫3周龄SPF鸡，免疫后3周测所有免疫鸡的HI抗体效价。结果表明，免疫3批灭活疫苗3周时的SPF鸡的H5
中国农业科学院硕士学位论文第三章重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗的实验室研究26亚型Re-11株HI抗体效价平均值分别为8.0log2、7.8log2和8.1log2，Re-12株HI抗体效价平均值分别为7.9log2、7.7log2和7.7log2，H7-Re2株HI抗体效价平均值分别为8.2log2、7.9log2和8.0log2，详情见图3-2。分别用3株高致病性亲本毒株进行攻毒，结果表明，免疫组鸡均健活，病毒分离阴性数均为10/10；对照组全部发并死亡，而且10/10病毒分离阳性，详情见表3-2。图3-2SPF鸡免疫3批灭活疫苗抗体测定结果Fig3-2TheantibodytestresultsofSPFchickensimmunizedwith3batchesofvaccine表3-23批灭活疫苗免疫SPF鸡后攻毒结果Table3-2ThechallengetestresultsofSPFchickensimmunizedwith3batchesofvaccine注：“*”表示鸡死亡。疫苗批次（接种方式）攻毒毒株攻毒后3d和5d排毒率保护数/存活数/总数3d喉头3d泄殖腔5d喉头5d泄殖腔20180322（颈部皮下）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/1020180326（颈部皮下）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/1020180329（肌肉注射）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/10PBS（对照组）DK/GZ/S4184/17(H5N6)10/1010/10/*/*0/0/10CK/LN/SD007/17(H5N1)10/1010/10/*/*0/0/10CK/GX/SD098/17(H7N9)10/1010/10/*/*0/0/10
【参考文献】：
期刊论文
[1]表达H9亚型禽流感病毒HA基因重组鸭肠炎病毒的构建[J]. 孙莹,张兵,李岭,黄小洁,侯力丹,刘丹,李启红,李俊平,王乐元,李慧姣,杨承槐. 中国农业科学. 2019(23)
[2]Insights from avian influenza surveillance of chickens and ducks before and after exposure to live poultry markets[J]. Mei Li,Xin Yin,Lizheng Guan,Xia Zhang,Guohua Deng,Tao Li,Pengfei Cui,Yong Ma,Yujie Hou,Jianzhong Shi,Hualan Chen. Science China（Life Sciences）. 2019(06)
[3]重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）对商品肉鸡的免疫效力研究[J]. 吴姣姣,曾显营,陈晓涵,臧金凯,包红梅,施建忠,邓国华,郭兴福,刘景利,毛胜刚,杨帆,陈志宇,孙项楠,路通,陈化兰,田国彬. 中国预防兽医学报. 2019(06)
[4]Why were so few people infected with H7N9 influenza A viruses in China from late 2017 to 2018?[J]. Xiaoman Wei,Jie Cui. Science China（Life Sciences）. 2018(11)
[5]我国首个DNA疫苗获得批准[J]. 姜永萍. 农业知识. 2018(24)
[6]H5N1亚型禽流感变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫原性研究[J]. 田国彬,曾显营,钟功勋,姜永萍,李雁冰,施建忠,毛胜刚,冯菊艳,王君伟,陈化兰. 中国预防兽医学报. 2009(09)
本文编号：3609191
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
种毒免疫原性HI抗体测定结果
中国农业科学院硕士学位论文第三章重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗的实验室研究25扰。图3-1不同灭活疫苗免疫后HI抗体测定结果Fig3-1HIantibodytitersafterimmunizationwithdifferentvaccines3.3.2成品物理性状的检验对制备的3批（20180322、20180326、20180329）三价灭活疫苗进行物理性状检验，结果表明，3批疫苗均为乳白色均匀乳剂，油包水型，离心后管底无水量析出，具有较好的稳定性，黏度分别在65.3cp、66.5cp、68.6cp之间，符合黏度低于200cp的标准。详见表3-1。表3-13批三价灭活疫苗性状检验结果Table3-1Theresultsofthreebatchesoftrivalentvaccine疫苗批次外观剂型稳定性黏度（cp）20180322乳白色均匀乳剂油包水型无水析出66.520180326乳白色均匀乳剂油包水型无水析出68.620180329乳白色均匀乳剂油包水型无水析出65.33.3.33批三价灭活疫苗安全性试验将各疫苗以2mL/只的剂量免疫SPF鸡、SPF鸭和商品鹅后，均观察14d，各免疫禽免疫部位无炎症反应，疫苗吸收良好，仅有少量残留，采食、饮水和精神状态均正常，无不良临床症状。3.3.43批三价灭活疫苗免疫效力试验3.3.4.13批三价灭活疫苗对鸡的免疫效力评估3批三价灭活疫苗（20180322、20180326、20180329）以0.3mL/只的剂量免疫3周龄SPF鸡，免疫后3周测所有免疫鸡的HI抗体效价。结果表明，免疫3批灭活疫苗3周时的SPF鸡的H5
中国农业科学院硕士学位论文第三章重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗的实验室研究26亚型Re-11株HI抗体效价平均值分别为8.0log2、7.8log2和8.1log2，Re-12株HI抗体效价平均值分别为7.9log2、7.7log2和7.7log2，H7-Re2株HI抗体效价平均值分别为8.2log2、7.9log2和8.0log2，详情见图3-2。分别用3株高致病性亲本毒株进行攻毒，结果表明，免疫组鸡均健活，病毒分离阴性数均为10/10；对照组全部发并死亡，而且10/10病毒分离阳性，详情见表3-2。图3-2SPF鸡免疫3批灭活疫苗抗体测定结果Fig3-2TheantibodytestresultsofSPFchickensimmunizedwith3batchesofvaccine表3-23批灭活疫苗免疫SPF鸡后攻毒结果Table3-2ThechallengetestresultsofSPFchickensimmunizedwith3batchesofvaccine注：“*”表示鸡死亡。疫苗批次（接种方式）攻毒毒株攻毒后3d和5d排毒率保护数/存活数/总数3d喉头3d泄殖腔5d喉头5d泄殖腔20180322（颈部皮下）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/1020180326（颈部皮下）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/1020180329（肌肉注射）DK/GZ/S4184/17(H5N6)0/100/100/100/1010/10/10CK/LN/SD007/17(H5N1)0/100/100/100/1010/10/10CK/GX/SD098/17(H7N9)0/100/100/100/1010/10/10PBS（对照组）DK/GZ/S4184/17(H5N6)10/1010/10/*/*0/0/10CK/LN/SD007/17(H5N1)10/1010/10/*/*0/0/10CK/GX/SD098/17(H7N9)10/1010/10/*/*0/0/10
【参考文献】：
期刊论文
[1]表达H9亚型禽流感病毒HA基因重组鸭肠炎病毒的构建[J]. 孙莹,张兵,李岭,黄小洁,侯力丹,刘丹,李启红,李俊平,王乐元,李慧姣,杨承槐. 中国农业科学. 2019(23)
[2]Insights from avian influenza surveillance of chickens and ducks before and after exposure to live poultry markets[J]. Mei Li,Xin Yin,Lizheng Guan,Xia Zhang,Guohua Deng,Tao Li,Pengfei Cui,Yong Ma,Yujie Hou,Jianzhong Shi,Hualan Chen. Science China（Life Sciences）. 2019(06)
[3]重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）对商品肉鸡的免疫效力研究[J]. 吴姣姣,曾显营,陈晓涵,臧金凯,包红梅,施建忠,邓国华,郭兴福,刘景利,毛胜刚,杨帆,陈志宇,孙项楠,路通,陈化兰,田国彬. 中国预防兽医学报. 2019(06)
[4]Why were so few people infected with H7N9 influenza A viruses in China from late 2017 to 2018?[J]. Xiaoman Wei,Jie Cui. Science China（Life Sciences）. 2018(11)
[5]我国首个DNA疫苗获得批准[J]. 姜永萍. 农业知识. 2018(24)
[6]H5N1亚型禽流感变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫原性研究[J]. 田国彬,曾显营,钟功勋,姜永萍,李雁冰,施建忠,毛胜刚,冯菊艳,王君伟,陈化兰. 中国预防兽医学报. 2009(09)
本文编号：3609191
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