气肿疽检测方法的比较

发布时间：2022-01-26 05:45

　　气肿疽（Clostridiumchauvoei）,病原体为气肿疽梭菌,反刍动物易感。该病的典型发病特征为动物肌肉发生炎性肿胀,触压有捻发音,该病多发于春夏季天热多雨的气候,呈散发式流行。近年来,牛感染气肿疽的病例较为多见,这为肉牛经济的发展乃至整个畜牧业的生产带来了巨大的经济损失。为了针对不同的临床环境和检测需要,对疑似气肿疽病例进行快速、有效的诊断,在第一时间对疾病的流行和暴发进行控制。本研究应用4种方法对20例阳性样本进行检测。选择特异性较强的CctA基因作为PCR检测的目的基因,通过筛选最合适的退火温度,确定了最适合气肿疽检测的PCR检测方法。将气肿疽裂解后的菌体作为抗原,并优化了 ELISA检测法中的多种反应条件,进行气肿疽ELISA检测。利用抗原、抗体的特性,在免疫层析法的基础上以气肿疽胶体金免疫层析试纸条进行气肿疽的胶体金检测。通过纯化气肿疽梭菌有效抗原并免疫豚鼠作为一抗用于气肿疽梭菌双抗体夹心Dot-ELISA方法的检测。结果显示,本试验成功应用PCR、ELISA、胶体金及Dot-ELISA对气肿疽进行了临床检测,PCR及胶体金检测方法阳性检出率较高,检出率可达100%,... 

【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校

【文章页数】：36 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３．ＰＣＲ方法临床检测试验??Ｆｉｇ．３．?Ｃｌｉｎｉｃａｌ?ｔｅｓｔ?ｏｆ?ＰＣＲ?ｍｅｔｈｏｄ??

１．２气肿疸梭菌ＣｃｔＡ基因的扩增??以气肿疽梭菌ＤＮＡ为模板，以Ｃｌ、Ｃ２为引物进行ＰＣＲ扩增。结果显示：??可得到大小约为５０１?ｂｐ大小的条带（如图２所示）。??１３??

延边大学硕士学位论文－结果抗体用量的确定??抗体的最低量为２５?ｌｉ?ｇ，单克隆抗体与胶体金的的?ｍｌ。??的临床检测??金检测肝脏病料样本共２０份，试纸条检测结果阳性ｆ?ｉ?￥?Ｖ?：?ｃ?Ｊ?Ｓ?１?＾?ｎ?，１?＾?ｉｆＳ?＾?Ｖ??

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]牛气肿疽CctA基因核酸疫苗的制备及免疫效果评价[D]. 齐强.延边大学 2017
[2]延边地区牛气肿疽流行病学调查及CctA基因真核表达载体的构建与表达[D]. 段雪岩.延边大学 2016
[3]气肿疽梭菌PCR检测方法的建立及初步应用[D]. 司唯.延边大学 2015
[4]延边株气肿疽梭菌的分离鉴定及cctA基因的克隆和表达[D]. 云巾宴.延边大学 2015
[5]气肿疽梭菌单克隆抗体的制备及胶体金诊断试纸条的研制[D]. 姜丹丹.延边大学 2013
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本文编号：3609932