八眉猪皮下和肌内前体脂肪细胞分离培养及生脂基因组织表达

发布时间：2022-02-09 10:34

　　猪作为主要的肉用动物其脂肪组织在体内的分布及脂肪沉积是影响其胴体品质和肉质风味的关键因素,皮下脂肪影响胴体品质,肌内脂肪与肌肉的风味品质密切相关。皮下和肌内前体脂肪细胞增殖分化和代谢的调控机制存在差异致使皮下脂肪组织与肌内脂肪组织脂质代谢的不同。因此,研究皮下和肌内前体脂肪细胞分化以及分化过程中生脂相关基因的表达,对于阐明其调控脂肪合成的分子机制及控制脂肪形成有重要意义。此外,八眉猪作为优良的地方猪种其不同组织的生脂相关基因表达也可能存在较大差异,这种差异与脂肪代谢和脂肪沉积有关。本文以3日龄的八眉猪仔猪为试验动物,利用胶原酶消化法从其皮下脂肪组织和背最长肌获得皮下和肌内前体脂肪细胞,采用MTT比色和细胞计数等方法研究猪皮下和肌内前体脂肪细胞生长增殖特性;利用油红O染色提取法测定脂肪含量；以荧光定量PCR检测皮下脂肪细胞和肌内脂肪细胞生脂相关基因FAS、ACC1、SCD、 ChREBP和SREBP-1c表达的差异,同时分析了其在八眉猪仔猪肝脏、皮下脂肪组织、背最长肌、肾脏、心脏以及小肠等组织的表达变化,为地方猪种优良性状基因的利用提供基础。主要研究结果如下：1.采用胶原酶消化法从八眉猪... 

【文章来源】：西北民族大学甘肃省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

皮下前体脂肪细胞培养（lOOx)

2.3.4.2肌内前体脂肪细胞诱导分化后的形态学观察当细胞汇合后，部分细胞开始自发充脂（如图2-6-A所示）。当加入诱导培养基分化诱导后，细胞体积逐渐变大，形态从纤维样变为楠圆形；诱导2d后细胞内开始出现葡萄串状的脂滴，（如图2-6-B所示）；随着诱导时间的增加，细胞内的脂滴不断聚集，诱导第4 d充脂速度加快（如图2-6-C所示）；诱导10 d后，细胞内脂肪分布以大脂滴为主，周围分布着小脂滴，脂滴已经充满细胞内部（图2-6-E所示）。18

利用突光定量PCR检测皮下和肌内前体脂肪细胞分化过程中生脂相关基因的表达，从图2-15可看出，ChREBP在诱导分化的第4 d，表达量显著增加（PO.Ol),且皮下脂肪细胞的表达量显著高于肌内脂肪（PO.Ol)，随着诱导时间的延长，ChREBP的表达显著增加，到第8d，其表达量达到峰值。细胞在诱导24h后，22

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3616853