湖北省一株猪肺炎支原体的分离鉴定及其生物学特性分析
发布时间:2022-02-09 13:10
猪支原体肺炎是危害全球养猪业的重要疫病。为了能对该病进行更好的防控,从湖北地区规模化养殖场疑似临床病料中成功检测并分离获得了一株猪肺炎支原体,并通过多重PCR鉴别、纤毛黏附试验和流式细胞术对其生物学特性进行了研究。结果表明,多重PCR鉴别检测以及16SrRNA序列测定进一步证实分离菌株为猪肺炎支原体,命名为Hubei-1;纤毛黏附试验结果显示Hubei-1具有较强的纤毛黏附能力;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞试验提示Hubei-1能诱导单核细胞和淋巴细胞的凋亡;炎症因子检测发现Hubei-1能激活猪肺泡巨噬细胞TNF-α的分泌。
【文章来源】:动物医学进展. 2020,41(06)北大核心
【文章页数】:5 页
【部分图文】:
TNF-α分泌结果
猪支原体肺炎疑似病料经处理过滤后按照1∶5的比例接种至KM2液体培养基中,37℃恒温培养,在液体培养基连续传5代后,样品培养物颜色变化趋于稳定,36h开始变黄,72h后呈现明显的黄色(图1)。2.2 PCR鉴定与测序分析
将采集的猪支原体肺炎临床疑似样品按照材料与方法所述的步骤进行处理,盲传后利用猪肺炎支原体鉴别引物,通过PCR方法对其进行检测,结果显示扩增出大小约1 000bp的目的片段(图2),与预期目的条带大小一致,提示猪肺炎支原体的存在。随后对分离菌株进行16SrRNA的PCR扩增和序列测定,并将16SrRNA测序结果在NCBI上进行分析比对,进一步从基因水平上证实了分离菌株为猪肺炎支原体。2.3 纤毛黏附能力
【参考文献】:
期刊论文
[1]猪支原体肺炎流行病学和诊断技术研究进展[J]. 王华,张清,王君玮,徐天刚,吴延功,王志亮. 动物医学进展. 2009(09)
[2]猪肺炎支原体的分离及PCR鉴定[J]. 张锋钢,沈志强,高云英,李浩波,王金良,谢印乾,管宇,刘吉山. 中国兽医杂志. 2007(04)
本文编号:3617066
【文章来源】:动物医学进展. 2020,41(06)北大核心
【文章页数】:5 页
【部分图文】:
TNF-α分泌结果
猪支原体肺炎疑似病料经处理过滤后按照1∶5的比例接种至KM2液体培养基中,37℃恒温培养,在液体培养基连续传5代后,样品培养物颜色变化趋于稳定,36h开始变黄,72h后呈现明显的黄色(图1)。2.2 PCR鉴定与测序分析
将采集的猪支原体肺炎临床疑似样品按照材料与方法所述的步骤进行处理,盲传后利用猪肺炎支原体鉴别引物,通过PCR方法对其进行检测,结果显示扩增出大小约1 000bp的目的片段(图2),与预期目的条带大小一致,提示猪肺炎支原体的存在。随后对分离菌株进行16SrRNA的PCR扩增和序列测定,并将16SrRNA测序结果在NCBI上进行分析比对,进一步从基因水平上证实了分离菌株为猪肺炎支原体。2.3 纤毛黏附能力
【参考文献】:
期刊论文
[1]猪支原体肺炎流行病学和诊断技术研究进展[J]. 王华,张清,王君玮,徐天刚,吴延功,王志亮. 动物医学进展. 2009(09)
[2]猪肺炎支原体的分离及PCR鉴定[J]. 张锋钢,沈志强,高云英,李浩波,王金良,谢印乾,管宇,刘吉山. 中国兽医杂志. 2007(04)
本文编号:3617066
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