靛玉红抑制脂多糖诱导小鼠乳腺上皮细胞凋亡的研究
发布时间：2022-02-11 09:11
奶牛乳腺炎是严重危害养牛业的重要疾病,仍缺乏有效治疗手段。乳腺上皮细胞作为乳腺的第一道防线,其适时凋亡在奶牛乳腺炎转归中发挥着关键作用。中药单体靛玉红作用广泛,兼具难耐药、低毒、无残留等优点,为奶牛乳腺炎绿色高效防治提供了新思路。本研究旨在探讨靛玉红对脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞凋亡的影响并阐明机制。通过使用脂多糖刺激小鼠乳腺上皮细胞建立凋亡模型,并设置空白对照组、二甲基亚砜组及脂多糖组三个对照组,使用不同浓度的靛玉红,在脂多糖诱导前和诱导后实施干预,从凋亡细胞形态、凋亡相关基因m RNA和蛋白水平,观察靛玉红对脂多糖诱导小鼠乳腺上皮细胞凋亡的影响。结果,靛玉红可以剂量依赖性改善脂多糖诱导小鼠乳腺上皮细胞发生的凋亡现象,显著促进脂多糖诱导小鼠乳腺上皮细胞中Bcl-x L、Bcl-2等抗凋亡基因表达,抑制Bak、Bax、Caspase-8和Caspase-3等促凋亡基因和蛋白表达有关。上述结果表明,靛玉红通过促进抗凋亡基因的表达及抑制促凋亡基因表达,适时调控脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞凋亡。
【文章来源】：中国兽医科学. 2020,50(12)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
靛玉红对MMECs凋亡率的影响
中国兽医科学第50卷图3Western-blot和qRT-PCR检测靛玉红对LPS诱导MMECs中Bcl成员表达的影响Figure3EffectsofindirubinonBclfamilyexpressioninLPS-inducedMMECsbyWesternblotandqRT-PCRA：Western-blot检测Bcl-2蛋白表达水平；B：Bcl-2表达量分析；C：Bcl-2的mRNA表达水平分析；D：Bcl-xl的mRNA表达水平；E：Bax的mR-NA表达水平分析；F：Bak的mRNA表达水平分析。###P＜0.001，与对照组比较；**P＜0.01，***P＜0.001，与LPS组比较。A：Bcl-2proteinexpressionlevelbyWestern-blot；B：Bcl-2expressionanalysis；C：Bcl-2mRNAexpressionlevelanalysis；D：Bcl-xlmRNAexpres-sionlevelanalysis；E：BaxmRNAexpressionlevelanalysis；F：BakmRNAexpressionlevelanalysis.###P＜0.001comparedwithcontrolgroup；**P＜0.01，***P＜0.001comparedwithLPSgroup.亡形态改善，随着靛玉红使用量的增大，凋亡改善的效果更加明显。另外，脂多糖和靛玉红加入顺序对凋亡影响不明显，细胞凋亡形态差异不大。细胞形态变化是细胞凋亡的主要依据，凋亡细胞计数统计凋亡率（图2）。结果证明，LPS可诱导MMECs凋亡发生率增加，靛玉红可以抑制LPS诱导MMECs凋亡，显著降低凋亡率，并且呈剂量依赖性。2.2靛玉红影响Bcl-2家族关键成员分析Bcl-2家族成员在凋亡中扮演着至关重要的角色。实验结果显示，LPS可以诱导Bcl-2（图3A-C）蛋白和mRNA水平下降，以及Bax（图3E）和Bak（图3F）的mRNA水平的升高；靛玉红在蛋白和mRNA水平上增加Bcl-2的活性，并增加了Bcl-xL（图3D）的mRNA水平表达，抑制Bax和Bak的mRNA表达水平，对LPS诱导的MMECs凋亡发挥抑制效应。2.3靛玉红影响Caspase家族成员活性的分析为了检测靛玉红对Caspase家族关键成员活性的影响，采用qRT-PCR和Western-bl
Western-blot和qRT-PCR检测靛玉红对LPS诱导MMECs中Caspase-3和Caspase-8的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]白花杜鹃水提液对多房棘球蚴的体外杀灭和体内感染疗效的研究[J]. 高艳,郝宝成,宋向东,续文君,李立,闫鸿斌,吴金措姆,拉巴次旦,田波,贾万忠. 中国兽医科学. 2019(10)
[2]6-溴-靛玉红-3’-肟抑制脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞凋亡[J]. 刘畅,唐鑫,张文劲,赵春阳,郭爱珍,胡长敏. 畜牧兽医学报. 2018(12)
[3]我国牛源金黄色葡萄球菌耐药现状及药敏检测方法探讨[J]. 王登峰,李建军,段新华,杨学云,吴建勇,玛利亚木,王治才. 中国动物传染病学报. 2011(01)
[4]中草药防治奶牛乳房炎[J]. 钱立,丁建平,陶勇,章孝荣,葛凯,姚贵东,谷玉. 动物医学进展. 2006(05)
[5]细胞凋亡与炎症[J]. 杨苓山. 国外医学(创伤与外科基本问题分册). 1997(01)
硕士论文
[1]CTSB、CTSS基因表达与绵羊卵丘细胞凋亡及卵母细胞发育能力相关性研究[D]. 常庆玲.河北农业大学 2014
本文编号：3620007
【文章来源】：中国兽医科学. 2020,50(12)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
靛玉红对MMECs凋亡率的影响
中国兽医科学第50卷图3Western-blot和qRT-PCR检测靛玉红对LPS诱导MMECs中Bcl成员表达的影响Figure3EffectsofindirubinonBclfamilyexpressioninLPS-inducedMMECsbyWesternblotandqRT-PCRA：Western-blot检测Bcl-2蛋白表达水平；B：Bcl-2表达量分析；C：Bcl-2的mRNA表达水平分析；D：Bcl-xl的mRNA表达水平；E：Bax的mR-NA表达水平分析；F：Bak的mRNA表达水平分析。###P＜0.001，与对照组比较；**P＜0.01，***P＜0.001，与LPS组比较。A：Bcl-2proteinexpressionlevelbyWestern-blot；B：Bcl-2expressionanalysis；C：Bcl-2mRNAexpressionlevelanalysis；D：Bcl-xlmRNAexpres-sionlevelanalysis；E：BaxmRNAexpressionlevelanalysis；F：BakmRNAexpressionlevelanalysis.###P＜0.001comparedwithcontrolgroup；**P＜0.01，***P＜0.001comparedwithLPSgroup.亡形态改善，随着靛玉红使用量的增大，凋亡改善的效果更加明显。另外，脂多糖和靛玉红加入顺序对凋亡影响不明显，细胞凋亡形态差异不大。细胞形态变化是细胞凋亡的主要依据，凋亡细胞计数统计凋亡率（图2）。结果证明，LPS可诱导MMECs凋亡发生率增加，靛玉红可以抑制LPS诱导MMECs凋亡，显著降低凋亡率，并且呈剂量依赖性。2.2靛玉红影响Bcl-2家族关键成员分析Bcl-2家族成员在凋亡中扮演着至关重要的角色。实验结果显示，LPS可以诱导Bcl-2（图3A-C）蛋白和mRNA水平下降，以及Bax（图3E）和Bak（图3F）的mRNA水平的升高；靛玉红在蛋白和mRNA水平上增加Bcl-2的活性，并增加了Bcl-xL（图3D）的mRNA水平表达，抑制Bax和Bak的mRNA表达水平，对LPS诱导的MMECs凋亡发挥抑制效应。2.3靛玉红影响Caspase家族成员活性的分析为了检测靛玉红对Caspase家族关键成员活性的影响，采用qRT-PCR和Western-bl
Western-blot和qRT-PCR检测靛玉红对LPS诱导MMECs中Caspase-3和Caspase-8的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]白花杜鹃水提液对多房棘球蚴的体外杀灭和体内感染疗效的研究[J]. 高艳,郝宝成,宋向东,续文君,李立,闫鸿斌,吴金措姆,拉巴次旦,田波,贾万忠. 中国兽医科学. 2019(10)
[2]6-溴-靛玉红-3’-肟抑制脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞凋亡[J]. 刘畅,唐鑫,张文劲,赵春阳,郭爱珍,胡长敏. 畜牧兽医学报. 2018(12)
[3]我国牛源金黄色葡萄球菌耐药现状及药敏检测方法探讨[J]. 王登峰,李建军,段新华,杨学云,吴建勇,玛利亚木,王治才. 中国动物传染病学报. 2011(01)
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[5]细胞凋亡与炎症[J]. 杨苓山. 国外医学(创伤与外科基本问题分册). 1997(01)
硕士论文
[1]CTSB、CTSS基因表达与绵羊卵丘细胞凋亡及卵母细胞发育能力相关性研究[D]. 常庆玲.河北农业大学 2014
本文编号：3620007
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3620007.html
