美洲型PRRSV二价核酸疫苗的制备及小鼠的免疫研究
发布时间：2022-02-13 08:50
猪繁殖与呼吸综合征(Procine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS 最早于1987年在美国报道,自爆发以来,给养猪业造成了严重的经济损失。在1995年左右传入中国,引起该病的的病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒（Procine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV）。我国流行的主要是美洲型PRRSV及其变异株,近些年来我国PRRSV谱系呈多样化趋势,增加了我国对PRRS的预防和治疗的难度。JXA1-like谱系毒株是PRRS爆发以来比较流行的高致病性PRRSV（HP-PRRSV）,而NADC30-like谱系毒株是近些年流行的HP-PRRSV。通过这两个谱系构建的二价核酸疫苗将是一种非常理想的防控PRRSV的新型疫苗。从某发病猪场采集样本采集到一株PRRSV将其命名为YN-L株。对其进行全基因扩增,然后对其Nsp2、GP5基因和全基因组进行遗传进化分析及同源性比对,并对其Nsp2、GP5基因编码的氨基酸的序列进行比对,证实该YN-L株为JX41-like谱系毒株。对YN-L毒株...
【文章来源】：延边大学吉林省211工程院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１猪蓝耳病病毒基因组结构??Ｆｉｇｌ?Ｇｅｎｏｍｉｃ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ?ｂｌｕｅ?ｅａｒ?ｄｉｓｅａｓｅ?ｖｉｒｕｓ??
延边大学硕士学位论文－前言蛋白酶能够抑制Ｉ型ＩＦＮ的转录，Ｎｓｐｉｐ则可以通ＲＮＡ诱导的Ｉ型ＩＦＮ转录起下调作用［６２］。Ｎｓｐ２是乃？兄ｓｒ非结构蛋白中最大的蛋白，并且在所有非结插入和缺失等情况［６３＿６５１。美洲型Ｎｓｐ２的同源性是并且Ｎｓｐ２的Ｎ末端与Ｃ末端具有一定的相似性。Ｎｐ２ｆ这三个亚型位于中间的高变区，并且在病毒基因。Ｎｓｐ４为胰凝乳蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，该蛋白酶ｓｐ９和ＮｓｐｌＯ能够增强在中国出现的ＨＰ－Ｐ／？兄９Ｆ的酶活性，并含有一个（ＣＯＲＯＮＡ）基序｜６７１，Ｎｓｐｌ２
?株全基因扩增结果??提取疑似阳性样品的总ＲＮＡ，再反转录成ｃＤＮＡ。进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增出该毒株全基因??的各片段，各目的片段与预期片段大小基本一致，结果如图４所示。将测序结果拼接后获??得尸狀ＳＫＩＷ－Ｌｇ株的全基因序列，全长１５３２０ｂｐ，命名为为ＫＶ－ＬＰ株。??Ｍｌ?１２３４５６?７８９?１０??２０００ｂｐ??麵ｂｐ??７５０ｂｐ??５００ｂｐ??：??图４尸／？兄ＳＴ｝７Ｖ－Ｚ＾株全基因各片段的ＲＴ－ＰＣＲ??Ｆｉｇ４?Ｔｈｅ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｎｓ?ｏｆ?１０?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ?ｏｆ?ＰＲＲＳＶ?ＹＮ－ＬＱ?ｓｔｒａｉｎ??Ｍ１．ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｎｌ．＾＾Ｆ－ｌＦ；?２．ＰＲＲＳＶ－２Ｆ；?３．ＰＲＲＳＶ－３Ｆ；?４．ＰＲＲＳＶ－４Ｆ；?５．ＰＲＲＳＶ－５Ｆ；?６．ＰＲＲＳＶ－６Ｆ；??１．ＰＲＲＳＶ－１Ｖ；?Ｓ．ＰＲＲＳＶＳＦ；?９．ＰＲＲＳＶ－９Ｆ（＼）；?＼０．ＰＲＲＳＶ－９Ｆ（２）??１．?２?ＮｓＰ２和ＧＰ５基因进化树分析及同源性比对??｝Ｗ－Ｚ＾株Ｎｓｐ２和ＧＰ５的核苷酸序列与ＧｅｎＢａｎｋ收录的部分经典毒株的进化??树分祈及Ｍ源性比对，结果见图５、６、７和８。??２２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪繁殖和呼吸系统综合征的血清学检测及病毒的分离和鉴定(初报)[J]. 陈博文,孙颖杰,罗长保,孙延峰,潘凤城,林志雄,苏永生,李树根,童昆周. 中国兽医杂志. 1996(05)
本文编号：3622883
【文章来源】：延边大学吉林省211工程院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１猪蓝耳病病毒基因组结构??Ｆｉｇｌ?Ｇｅｎｏｍｉｃ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ?ｂｌｕｅ?ｅａｒ?ｄｉｓｅａｓｅ?ｖｉｒｕｓ??
延边大学硕士学位论文－前言蛋白酶能够抑制Ｉ型ＩＦＮ的转录，Ｎｓｐｉｐ则可以通ＲＮＡ诱导的Ｉ型ＩＦＮ转录起下调作用［６２］。Ｎｓｐ２是乃？兄ｓｒ非结构蛋白中最大的蛋白，并且在所有非结插入和缺失等情况［６３＿６５１。美洲型Ｎｓｐ２的同源性是并且Ｎｓｐ２的Ｎ末端与Ｃ末端具有一定的相似性。Ｎｐ２ｆ这三个亚型位于中间的高变区，并且在病毒基因。Ｎｓｐ４为胰凝乳蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，该蛋白酶ｓｐ９和ＮｓｐｌＯ能够增强在中国出现的ＨＰ－Ｐ／？兄９Ｆ的酶活性，并含有一个（ＣＯＲＯＮＡ）基序｜６７１，Ｎｓｐｌ２
?株全基因扩增结果??提取疑似阳性样品的总ＲＮＡ，再反转录成ｃＤＮＡ。进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增出该毒株全基因??的各片段，各目的片段与预期片段大小基本一致，结果如图４所示。将测序结果拼接后获??得尸狀ＳＫＩＷ－Ｌｇ株的全基因序列，全长１５３２０ｂｐ，命名为为ＫＶ－ＬＰ株。??Ｍｌ?１２３４５６?７８９?１０??２０００ｂｐ??麵ｂｐ??７５０ｂｐ??５００ｂｐ??：??图４尸／？兄ＳＴ｝７Ｖ－Ｚ＾株全基因各片段的ＲＴ－ＰＣＲ??Ｆｉｇ４?Ｔｈｅ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｎｓ?ｏｆ?１０?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ?ｏｆ?ＰＲＲＳＶ?ＹＮ－ＬＱ?ｓｔｒａｉｎ??Ｍ１．ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｎｌ．＾＾Ｆ－ｌＦ；?２．ＰＲＲＳＶ－２Ｆ；?３．ＰＲＲＳＶ－３Ｆ；?４．ＰＲＲＳＶ－４Ｆ；?５．ＰＲＲＳＶ－５Ｆ；?６．ＰＲＲＳＶ－６Ｆ；??１．ＰＲＲＳＶ－１Ｖ；?Ｓ．ＰＲＲＳＶＳＦ；?９．ＰＲＲＳＶ－９Ｆ（＼）；?＼０．ＰＲＲＳＶ－９Ｆ（２）??１．?２?ＮｓＰ２和ＧＰ５基因进化树分析及同源性比对??｝Ｗ－Ｚ＾株Ｎｓｐ２和ＧＰ５的核苷酸序列与ＧｅｎＢａｎｋ收录的部分经典毒株的进化??树分祈及Ｍ源性比对，结果见图５、６、７和８。??２２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪繁殖和呼吸系统综合征的血清学检测及病毒的分离和鉴定(初报)[J]. 陈博文,孙颖杰,罗长保,孙延峰,潘凤城,林志雄,苏永生,李树根,童昆周. 中国兽医杂志. 1996(05)
本文编号：3622883
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3622883.html
