4株NDV流行株的全基因测序分析及鸭源NDV HN蛋白的原核表达
发布时间：2022-02-17 16:30
新城疫（Newcastle disease，ND）是由新城疫病毒引起的能够感染多种禽类的一种急性、高度传染性疫病，是危害世界养禽业的重要传染病之一，给许多国家的养禽业造成巨大的经济损失。NDV对多种禽类都具有致病性，除家禽外，至少250种鸟类可自然或实验感染NDV。基因Ⅶ型NDV是我国当前流行最广的毒株。为研究近年来NDV的遗传进化趋势，本文通过克隆测序测定了两株基因Ⅶ型鸡源新城疫分离株Chicken/China/SD04/2011和Chicken/China/SDWF07/2011及两株基因Ⅵ型鸽源新城疫分离株Pigeon/China/SDLC/2011和Pigeon/China/SDS/2011的全基因序列。4株病毒与中国标准强毒F48E8、国外标准强毒Herts/33及疫苗株chicken/N.Ireland/Ulster/67、B1、Clone30、LaSota、Mukteswar核苷酸序列同源性在80％87％之间；其F蛋白前体F0裂解位点附近的氨基酸序列均为112RRQKRF117，符合NDV强毒株的特征；两株鸡源病毒属于基因Ⅶd亚型变异株；两株鸽源毒株...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 NDV 一般生物学特性
1.1.1 NDV 的分类地位与形态
1.1.2 NDV 的理化特性
1.1.3 NDV 的培养特性
1.1.4 NDV 的生物学活性
1.1.5 NDV 的血清型
1.1.6 NDV 的毒力与致病性
1.1.7 NDV 的毒株分类
1.2 NDV 的基因组结构
1.3 NDV 各个基因结构蛋白的分子生物学研究
1.3.1 F 蛋白分子生物学研究
1.3.2 HN 蛋白的分子生物学研究
1.3.3 M 蛋白的分子生物学研究
1.3.4 NP 蛋白、P 蛋白和 L 蛋白及其分子生物学研究
1.4 NDV 的分子流行病学
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 毒株、单抗和载体
2.1.2 主要试验试剂与耗材
2.1.3 主要试验设备和仪器
2.2 方法
2.2.1 4 株新城疫病毒的全基因测序
2.2.2 抗原变异分析
2.2.3 鸽源分离株的人工感染试验
2.2.4 鸭新城疫 HN 蛋白原核表达载体构建和表达
3 结果
3.1 4 株新城疫病毒的全基因测序
3.1.1 生物学特性测定
3.1.2 全基因组分析
3.1.3 同源性及遗传进化分析
3.2 抗原变异分析
3.2.1 抗原变异分析反应性
3.2.2 HN 蛋白抗原线性位点氨基酸位点变异分析
3.3 鸽源 NDV 的人工感染试验
3.4 鸭 NDV HN 蛋白原核表达
3.4.1 HN 基因 RT-PCR 扩增结果
3.4.2 HN 基因表达载体的构建与鉴定
3.4.3 表达产物的 SDS-PAGE 电泳分析
3.4.4 HN 蛋白的纯化及 Western blotting 分析结果
4 讨论
4.1 4 株新城疫病毒的全基因测序
4.2 抗原变异分析
4.3 鸽源新城疫的人工感染试验
4.4 鸭 NDV HN 蛋白的原核表达
5 结论
参考文献
附录
致谢
作者简介及发表论文情况
【参考文献】：
期刊论文
[1]免疫鸽群中2株新城疫病毒的分离鉴定及遗传进化分析[J]. 朱杰,赵晴晴,陈广仁,宋庆庆,胡顺林,王晓泉,李群辉,刘秀梵. 中国兽医科学. 2012(10)
[2]新城疫LaSota活疫苗对基因Ⅶ型分离株的免疫保护性试验[J]. 胡北侠,杨少华,许传田,张琳,黄艳艳,张秀美. 广东畜牧兽医科技. 2012(03)
[3]三株新城疫病毒强毒株的生物学特性及全基因组序列分析[J]. 杨少华,胡北侠,许传田,颜世敢,张琳,黄艳艳,张秀美. 病毒学报. 2012(02)
[4]新城疫病毒的进化及其新型疫苗的研制[J]. 刘秀梵,胡顺林. 中国兽药杂志. 2010(01)
[5]2008年江苏地区基因Ⅶd亚型新城疫病毒遗传变异分析[J]. 吴双,黄伟平,王伟伟,胡顺林,王晓泉,刘秀梵. 畜牧兽医学报. 2009(12)
[6]中国水禽新城疫病毒F和HN基因的变异趋势[J]. 徐怀英,秦卓明,王友令,欧阳文军,谭雷涛,何叶峰,金维江,袁小远. 畜牧兽医学报. 2009(03)
[7]3株单抗对新城疫病毒HN抗原变异的分析[J]. 胡北侠,黄艳艳,张秀美,何叶峰,秦卓明,黄庆华. 中国兽医学报. 2008(11)
[8]一株信鸽新城疫强毒的分离鉴定和分子特性分析[J]. 袁小远,王友令,徐怀英,欧阳文军,贾强,何叶峰,秦卓明. 农业生物技术学报. 2007(06)
[9]鸡新城疫强毒分离株SC01的分子特性及与La Sota和F48E8的交叉保护[J]. 汤承,岳华,吴宣,杨泽林,傅安静. 西南民族大学学报(自然科学版). 2006(04)
[10]番鸭副粘病毒1型的分离鉴定[J]. 黄瑜,李文杨,程龙飞,施少华,彭春香,傅光华. 中国预防兽医学报. 2005(02)
本文编号：3629739
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 NDV 一般生物学特性
1.1.1 NDV 的分类地位与形态
1.1.2 NDV 的理化特性
1.1.3 NDV 的培养特性
1.1.4 NDV 的生物学活性
1.1.5 NDV 的血清型
1.1.6 NDV 的毒力与致病性
1.1.7 NDV 的毒株分类
1.2 NDV 的基因组结构
1.3 NDV 各个基因结构蛋白的分子生物学研究
1.3.1 F 蛋白分子生物学研究
1.3.2 HN 蛋白的分子生物学研究
1.3.3 M 蛋白的分子生物学研究
1.3.4 NP 蛋白、P 蛋白和 L 蛋白及其分子生物学研究
1.4 NDV 的分子流行病学
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 毒株、单抗和载体
2.1.2 主要试验试剂与耗材
2.1.3 主要试验设备和仪器
2.2 方法
2.2.1 4 株新城疫病毒的全基因测序
2.2.2 抗原变异分析
2.2.3 鸽源分离株的人工感染试验
2.2.4 鸭新城疫 HN 蛋白原核表达载体构建和表达
3 结果
3.1 4 株新城疫病毒的全基因测序
3.1.1 生物学特性测定
3.1.2 全基因组分析
3.1.3 同源性及遗传进化分析
3.2 抗原变异分析
3.2.1 抗原变异分析反应性
3.2.2 HN 蛋白抗原线性位点氨基酸位点变异分析
3.3 鸽源 NDV 的人工感染试验
3.4 鸭 NDV HN 蛋白原核表达
3.4.1 HN 基因 RT-PCR 扩增结果
3.4.2 HN 基因表达载体的构建与鉴定
3.4.3 表达产物的 SDS-PAGE 电泳分析
3.4.4 HN 蛋白的纯化及 Western blotting 分析结果
4 讨论
4.1 4 株新城疫病毒的全基因测序
4.2 抗原变异分析
4.3 鸽源新城疫的人工感染试验
4.4 鸭 NDV HN 蛋白的原核表达
5 结论
参考文献
附录
致谢
作者简介及发表论文情况
【参考文献】：
期刊论文
[1]免疫鸽群中2株新城疫病毒的分离鉴定及遗传进化分析[J]. 朱杰,赵晴晴,陈广仁,宋庆庆,胡顺林,王晓泉,李群辉,刘秀梵. 中国兽医科学. 2012(10)
[2]新城疫LaSota活疫苗对基因Ⅶ型分离株的免疫保护性试验[J]. 胡北侠,杨少华,许传田,张琳,黄艳艳,张秀美. 广东畜牧兽医科技. 2012(03)
[3]三株新城疫病毒强毒株的生物学特性及全基因组序列分析[J]. 杨少华,胡北侠,许传田,颜世敢,张琳,黄艳艳,张秀美. 病毒学报. 2012(02)
[4]新城疫病毒的进化及其新型疫苗的研制[J]. 刘秀梵,胡顺林. 中国兽药杂志. 2010(01)
[5]2008年江苏地区基因Ⅶd亚型新城疫病毒遗传变异分析[J]. 吴双,黄伟平,王伟伟,胡顺林,王晓泉,刘秀梵. 畜牧兽医学报. 2009(12)
[6]中国水禽新城疫病毒F和HN基因的变异趋势[J]. 徐怀英,秦卓明,王友令,欧阳文军,谭雷涛,何叶峰,金维江,袁小远. 畜牧兽医学报. 2009(03)
[7]3株单抗对新城疫病毒HN抗原变异的分析[J]. 胡北侠,黄艳艳,张秀美,何叶峰,秦卓明,黄庆华. 中国兽医学报. 2008(11)
[8]一株信鸽新城疫强毒的分离鉴定和分子特性分析[J]. 袁小远,王友令,徐怀英,欧阳文军,贾强,何叶峰,秦卓明. 农业生物技术学报. 2007(06)
[9]鸡新城疫强毒分离株SC01的分子特性及与La Sota和F48E8的交叉保护[J]. 汤承,岳华,吴宣,杨泽林,傅安静. 西南民族大学学报(自然科学版). 2006(04)
[10]番鸭副粘病毒1型的分离鉴定[J]. 黄瑜,李文杨,程龙飞,施少华,彭春香,傅光华. 中国预防兽医学报. 2005(02)
本文编号：3629739
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