绵羊GDF9基因G1突变可视化检测方法的建立

发布时间：2022-02-19 14:32

　　为了建立快速可视化检测绵羊生长分化因子9基因（Growth differentiation factor 9,GDF9）G1突变的方法,针对绵羊GDF9基因G1突变设计扩增阻滞突变系统（Amplification refractory mutation system,ARMS）特异性引物,并在其下游引物3′端的第2—4位碱基处设计额外的错配以筛选特异性最佳的引物对,将改良的ARMS与核酸染料SYBR GreenⅠ结合,可视化检测GDF9基因G1突变。结果显示,改良的ARMS特异性引物能够区分突变型和野生型,通过整合改良的ARMS与SYBR GreenⅠ可视化检测G1突变,发现已知突变型样本显示亮绿色,而已知野生型样本显示橙黄色,两者颜色变化明显。采用建立的可视化检测绵羊GDF9基因G1突变的方法检测25个小尾寒羊样本,结果表明,该方法能够准确区分绵羊GDF9基因G1突变的野生型和突变型,其检测结果与测序结果相符,准确度高达100%。可见,建立的可视化检测方法可用于检测绵羊GDF9基因G1突变。 

【文章来源】：河南农业科学. 2020,49(08)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 试验材料
        1.1.1 供试样本
        1.1.2 主要试剂
    1.2 试验方法
        1.2.1 DNA提取
        1.2.2 引物设计
        1.2.3 ARMS PCR及最佳引物对的筛选
        1.2.4 ARMS和SYBR Green
        1.2.5 可视化检测系统的准确度检测
2 结果与分析
    2.1 GDF9基因G1突变可视化检测最佳引物对的筛选
    2.2 GDF9基因G1突变可视化检测结果
    2.3 GDF9基因G1突变可视化检测系统的准确度
3 结论与讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]7种绵羊和4种山羊GDF9基因G1突变检测[J]. 古丽格娜,艾买提·买买提,於建国,郝耿,杨会国,储明星,买买提明,郭晓飞,潘章源,狄冉,刘秋月.  中国草食动物科学. 2015(04)
[2]利用AIMs分析亚洲9个绵羊群体的群体结构[J]. 张媛媛,韩德平,邓卫东,毛华明,邓学工,邓学梅.  生物化学与生物物理进展. 2015(07)
[3]山羊生长分化因子9基因外显子2的PCR-SSCP分析[J]. 吴泽辉,储明星,李学伟,方丽,叶素成,刘忠慧,陈国宏.  中国农业科学. 2006(04)



本文编号：3633072