食淀粉乳杆菌S-层蛋白对ST细胞抗TGEV感染的影响
发布时间：2022-02-20 08:18
仔猪病毒性腹泻是猪场常发且危害严重的一类传染病,主要表现为肠炎或败血症,是新生仔猪死亡的主要病因之一,给养猪业带来巨大的经济损失。引起仔猪腹泻常见的病毒有TGEV、PEDV和RV,其中TGEV和PEDV同属Ⅰ群冠状病毒。TGEV受体为猪氨肽酶,Bestatin可以抑制猪氨肽酶的活性。目前尚无有效预防以上两种疾病的商品化药物。已知多种益生菌可以抑制细菌性腹泻,部分益生菌具有抗病毒作用。益生菌具有安全性高、可增加营养物质吸收和提高机体免疫力等优点。益生菌在抗病毒过程中多种成分发挥作用,有研究表明部分益生菌的S-层蛋白可以与病毒受体结合,阻碍病毒对细胞的感染。本研究旨在筛选出可抑制TGEV和PEDV的益生菌株。研究其S-层蛋白对TGEV在ST细胞上增殖的影响,初步探究其S-层蛋白与TGEV受体猪氨肽酶之间的作用,以此探讨益生菌抗病毒的机制。为进一步研究益生菌抗病毒机制和研发抗病毒益生菌制剂奠定理论基础。本研究从实验室自筛益生菌株中筛选出具有抗TGEV和抗PEDV特性的益生菌株,选择其中具有S-层蛋白的益生菌菌株作为实验菌株。以病毒受体已确定的TGEV为研究的病毒,以细胞表面含有猪氨肽酶的ST...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省211工程院校
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
CONTENTS
摘要
Abstract
1 引言
1.1 益生菌的概况
1.1.1 益生菌定义
1.1.2 益生菌菌株的选择标准
1.1.3 益生菌抑制腹泻机制
1.2 益生菌抗病毒研究进展
1.2.1 具有抗病毒功效的益生菌菌株
1.2.2 筛选抗病毒功效的益生菌菌株的方法
1.2.3 益生菌抗病毒中起作用的主要成分
1.3 引起仔猪腹泻的常见病毒
1.3.1 常见引起腹泻的冠状病毒概述
1.3.2 冠状病毒受体研究进展
1.4 研究目的与意义
2 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 毒株、菌株和细胞
2.1.2 主要材料与试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 实验方法
2.2.1 抗病毒菌株筛选
2.2.2 S-层蛋白、代谢产物、牛血清白蛋白和代谢产物对TGEV在ST细胞增殖的抑制
2.2.3 各成分对TGEV吸附和入侵ST细胞的影响
2.2.4 Bestatin与不同成分组合预处理ST细胞对TGEV的抑制
2.2.5 检测指标及方法
2.2.6 数据统计分析
3 结果
3.1 抗病毒菌株的筛选
3.1.1 病毒感染细胞
3.1.2 病毒在细胞的增殖及RT-PCR检测结果
3.1.3 病毒滴度测定
3.1.4 MTT法筛选菌株
3.1.5 S-层蛋白基因的鉴定
3.1.6 S-层蛋白SDS-PAGE的检测
3.1.7 筛选结果
3.1.8 食淀粉乳杆菌生长曲线的测定
3.1.9 S-层蛋白、牛血清白蛋白、代谢产物和Bestatin细胞毒性结果
3.2 食淀粉乳杆菌S-层蛋白对TGEV在ST细胞增殖影响
3.2.1 不同浓度S-层蛋白、牛血清白蛋白、代谢产物和Bestatin对TGEV的抑制
3.2.2 各成分不同添加时序对TGEV在ST细胞增殖的影响
3.2.3 食淀粉乳杆菌S-层蛋白和代谢产物对TGEV滴度的影响
3.2.4 各成分对TGEV吸附和侵入ST细胞的影响
3.3 Bestatin与不同成分组合预处理ST细胞对TGEV增殖的影响
4 讨论
4.1 食淀粉乳杆菌S-层蛋白具有抗TGEV作用
4.2 食淀粉乳杆菌S-层蛋白可干扰TGEV吸附ST细胞
4.3 Bestatin和食淀粉乳杆菌S-层蛋白组合可增强对细胞保护
5 结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]仔猪腹泻原因及综合防治措施[J]. 丁正林,邓云春. 中国畜牧兽医文摘. 2011(06)
[2]唾液酸酶和唾液酸糖基转移酶的结构、功能与催化反应研究进展[J]. 王亚娟,邢国文. 有机化学. 2011(08)
[3]猪传染性胃肠炎诊断方法研究与进展[J]. 罗小华. 福建畜牧兽医. 2011(04)
[4]益生菌的作用机制及其在母猪生产中的应用[J]. 侯成立,季海峰,周雨霞,刘辉,张董燕,王四新,刘苹苹,王雅民. 中国畜牧兽医. 2011(07)
[5]益生素及其在防治仔猪腹泻中的应用[J]. 赵龙妹,张日俊. 饲料工业. 2011(04)
[6]乳酸菌产细菌素的研究进展及其应用前景[J]. 陈静,张玉苍,何连芳. 安徽农业科学. 2011(04)
[7]乳酸菌细菌素抗菌潜力挖掘研究进展[J]. 易华西,张兰威,杜明,韩雪. 中国食品添加剂. 2010(01)
[8]乳酸杆菌表层蛋白及应用研究[J]. 刘元元,杨秀华,王远亮,李宗军. 食品科学. 2010(03)
[9]仔猪腹泻的原因及防制[J]. 王佳. 中国畜牧兽医. 2010(01)
[10]猪传染性胃肠炎预防和治疗的研究进展[J]. 张春叶,沈红,陈永杰,程玛丽,芦山. 中国农学通报. 2010(01)
本文编号：3634641
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省211工程院校
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
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CONTENTS
摘要
Abstract
1 引言
1.1 益生菌的概况
1.1.1 益生菌定义
1.1.2 益生菌菌株的选择标准
1.1.3 益生菌抑制腹泻机制
1.2 益生菌抗病毒研究进展
1.2.1 具有抗病毒功效的益生菌菌株
1.2.2 筛选抗病毒功效的益生菌菌株的方法
1.2.3 益生菌抗病毒中起作用的主要成分
1.3 引起仔猪腹泻的常见病毒
1.3.1 常见引起腹泻的冠状病毒概述
1.3.2 冠状病毒受体研究进展
1.4 研究目的与意义
2 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 毒株、菌株和细胞
2.1.2 主要材料与试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 实验方法
2.2.1 抗病毒菌株筛选
2.2.2 S-层蛋白、代谢产物、牛血清白蛋白和代谢产物对TGEV在ST细胞增殖的抑制
2.2.3 各成分对TGEV吸附和入侵ST细胞的影响
2.2.4 Bestatin与不同成分组合预处理ST细胞对TGEV的抑制
2.2.5 检测指标及方法
2.2.6 数据统计分析
3 结果
3.1 抗病毒菌株的筛选
3.1.1 病毒感染细胞
3.1.2 病毒在细胞的增殖及RT-PCR检测结果
3.1.3 病毒滴度测定
3.1.4 MTT法筛选菌株
3.1.5 S-层蛋白基因的鉴定
3.1.6 S-层蛋白SDS-PAGE的检测
3.1.7 筛选结果
3.1.8 食淀粉乳杆菌生长曲线的测定
3.1.9 S-层蛋白、牛血清白蛋白、代谢产物和Bestatin细胞毒性结果
3.2 食淀粉乳杆菌S-层蛋白对TGEV在ST细胞增殖影响
3.2.1 不同浓度S-层蛋白、牛血清白蛋白、代谢产物和Bestatin对TGEV的抑制
3.2.2 各成分不同添加时序对TGEV在ST细胞增殖的影响
3.2.3 食淀粉乳杆菌S-层蛋白和代谢产物对TGEV滴度的影响
3.2.4 各成分对TGEV吸附和侵入ST细胞的影响
3.3 Bestatin与不同成分组合预处理ST细胞对TGEV增殖的影响
4 讨论
4.1 食淀粉乳杆菌S-层蛋白具有抗TGEV作用
4.2 食淀粉乳杆菌S-层蛋白可干扰TGEV吸附ST细胞
4.3 Bestatin和食淀粉乳杆菌S-层蛋白组合可增强对细胞保护
5 结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]仔猪腹泻原因及综合防治措施[J]. 丁正林,邓云春. 中国畜牧兽医文摘. 2011(06)
[2]唾液酸酶和唾液酸糖基转移酶的结构、功能与催化反应研究进展[J]. 王亚娟,邢国文. 有机化学. 2011(08)
[3]猪传染性胃肠炎诊断方法研究与进展[J]. 罗小华. 福建畜牧兽医. 2011(04)
[4]益生菌的作用机制及其在母猪生产中的应用[J]. 侯成立,季海峰,周雨霞,刘辉,张董燕,王四新,刘苹苹,王雅民. 中国畜牧兽医. 2011(07)
[5]益生素及其在防治仔猪腹泻中的应用[J]. 赵龙妹,张日俊. 饲料工业. 2011(04)
[6]乳酸菌产细菌素的研究进展及其应用前景[J]. 陈静,张玉苍,何连芳. 安徽农业科学. 2011(04)
[7]乳酸菌细菌素抗菌潜力挖掘研究进展[J]. 易华西,张兰威,杜明,韩雪. 中国食品添加剂. 2010(01)
[8]乳酸杆菌表层蛋白及应用研究[J]. 刘元元,杨秀华,王远亮,李宗军. 食品科学. 2010(03)
[9]仔猪腹泻的原因及防制[J]. 王佳. 中国畜牧兽医. 2010(01)
[10]猪传染性胃肠炎预防和治疗的研究进展[J]. 张春叶,沈红,陈永杰,程玛丽,芦山. 中国农学通报. 2010(01)
本文编号：3634641
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