大足黑山羊PHLDA2基因克
发布时间：2022-02-22 12:01
山羊的养殖是动物农业支柱产业之一。近年来,随着人们饮食结构的调整,营养价值高、有益于身体健康的食品越来越受到欢迎。羊肉营养价值高使羊肉市场需求量的增加,因此提高山羊繁殖率成为满足山羊需求市场的关键。绵羊、山羊的繁殖率普遍较低限制了山羊大规模的养殖。成活羔羊数是影响繁殖性能因素之一。有关研究报道,胎盘的正常生长和发育起到关键的作用,胎盘是胎体营养供应的源泉,对胎体的正常生长发育至关重要。PHLDA2（pleckstrin homology-like domain, family A, member2,又称为IPL或TSSC3）,编码含有PH （pleckstrin homology）同源域的小型细胞质蛋白,具有调节细胞信号、包内运输等功能。研究表明,在人和鼠中,PHLDA2基因为母源表达的印记基因,调控胎盘的生长发育和糖原储存。因此,对山羊PHLDA2基因相关研究具有重要意义。本研究采用RACE方法克隆了山羊PHLDA2基因cDNA全长并进行了详细的生物信息学分析,同时构建了该基因在不同组织中表达谱；通过RT-PCR产物直接测序法分析了该基因在F1代胎盘组织的印记状况,采用巢式PCR法克...
【文章来源】：西南大学重庆市211工程院校教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 文献综述
1.1 基因组印记的研究进展
1.1.1 基因组印记及其发现
1.1.2 印记基因的特征
1.1.3 印记基因的可能的机制
1.1.4 印记基因进化理论
1.1.5 DNA甲基化研究方法
1.2 基因组印记的生物学意义
1.2.1 印记基因与胎儿胎盘的生长发育
1.2.2 印记基因与相关遗传疾病
1.2.3 基因组印记与动物克隆
1.2.4 印记基因与家畜遗传育种
1.3 PHLDA2基因研究进展
第2章 绪论
2.1 研究目的和意义
2.2 研究范围和内容
2.3 技术路线
第3章 材料和方法
3.1 实验材料
3.1.1 实验动物
3.1.2 主要仪器与设备
3.1.3 主要试剂、试剂盒和培养基
3.1.4 常用试剂及其配制
3.1.5 常用生物信息学网站和分析软件
3.2 实验方法
3.2.1 总RNA提取、完整性检测、浓度测定和cDNA的制备
3.2.2 山羊PHLDA2基因cDNA克隆
3.2.3 PHLDA2基因生物信息学分析
3.2.4 PHLDA2基因组织表达谱构建
3.2.5 山羊PHLDA2基因在胎盘组织印记分析
3.2.6 山羊PHLDA2启动子克隆和序列分析
3.2.7 PHLDA2基因甲基化分析
第4章 结果和分析
4.1 山羊总RNA提取
4.2 山羊PHLDA2基因的克隆及生物信息学分析
4.2.1 山羊PHLDA2基因克隆
4.2.2 山羊PHLDA2基因生物信息学分析
4.3 PHLDA2基因组织表达谱分析
4.3.1 PHLDA2基因标准曲线绘制
4.4 PHLDA2基因在胎盘组织印记分析
4.4.1 基因组DNA的提取
4.4.2 山羊胎盘PHLDA2基因印记状态分析结果
4.5 山羊PHLDA2基因启动子克隆和生物信息学分析
4.5.1 山羊PHLDA2基因启动子序列获得
4.5.2 山羊PHLDA2基因序列分析
4.6 PHLDA2基因启动子和第一外显子区域甲基化分析
4.6.1 山羊PHLDA2基因启动子区域甲基化绘制
4.6.2 山羊PHLDA2基因第一外显子区域甲基化绘制
第5章 讨论
5.1 山羊PHLDA2基因克隆与组织表达谱分析
5.1.1 山羊PHLDA2基因克隆
5.1.2 PHLDA2基因组织表达谱分析
5.2 PHLDA2基因胎盘印记状态分析
5.3 山羊PHLDA2基因启动子克隆和甲基化分析
5.3.1 山羊PHLDA2基因启动子生物信息学分析
5.3.2 山羊PHLDA2基因甲基化分析
参考文献
附录
致谢
发表论文及参加课题一览表
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪COPG2和MEST克隆、印记状况和组织表达分析[J]. 李顺,蒋曹德,石萍,董然然,魏晋,田家伟. 中国农业科学. 2010(23)
[2]猪印记基因的研究现状及其应用前景[J]. 周泉勇,唐艳强,赵书红. 猪业科学. 2010(07)
[3]绵羊基因组印记遗传研究进展[J]. 张立岭. 中国草食动物. 2001(04)
本文编号：3639400
【文章来源】：西南大学重庆市211工程院校教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 文献综述
1.1 基因组印记的研究进展
1.1.1 基因组印记及其发现
1.1.2 印记基因的特征
1.1.3 印记基因的可能的机制
1.1.4 印记基因进化理论
1.1.5 DNA甲基化研究方法
1.2 基因组印记的生物学意义
1.2.1 印记基因与胎儿胎盘的生长发育
1.2.2 印记基因与相关遗传疾病
1.2.3 基因组印记与动物克隆
1.2.4 印记基因与家畜遗传育种
1.3 PHLDA2基因研究进展
第2章 绪论
2.1 研究目的和意义
2.2 研究范围和内容
2.3 技术路线
第3章 材料和方法
3.1 实验材料
3.1.1 实验动物
3.1.2 主要仪器与设备
3.1.3 主要试剂、试剂盒和培养基
3.1.4 常用试剂及其配制
3.1.5 常用生物信息学网站和分析软件
3.2 实验方法
3.2.1 总RNA提取、完整性检测、浓度测定和cDNA的制备
3.2.2 山羊PHLDA2基因cDNA克隆
3.2.3 PHLDA2基因生物信息学分析
3.2.4 PHLDA2基因组织表达谱构建
3.2.5 山羊PHLDA2基因在胎盘组织印记分析
3.2.6 山羊PHLDA2启动子克隆和序列分析
3.2.7 PHLDA2基因甲基化分析
第4章 结果和分析
4.1 山羊总RNA提取
4.2 山羊PHLDA2基因的克隆及生物信息学分析
4.2.1 山羊PHLDA2基因克隆
4.2.2 山羊PHLDA2基因生物信息学分析
4.3 PHLDA2基因组织表达谱分析
4.3.1 PHLDA2基因标准曲线绘制
4.4 PHLDA2基因在胎盘组织印记分析
4.4.1 基因组DNA的提取
4.4.2 山羊胎盘PHLDA2基因印记状态分析结果
4.5 山羊PHLDA2基因启动子克隆和生物信息学分析
4.5.1 山羊PHLDA2基因启动子序列获得
4.5.2 山羊PHLDA2基因序列分析
4.6 PHLDA2基因启动子和第一外显子区域甲基化分析
4.6.1 山羊PHLDA2基因启动子区域甲基化绘制
4.6.2 山羊PHLDA2基因第一外显子区域甲基化绘制
第5章 讨论
5.1 山羊PHLDA2基因克隆与组织表达谱分析
5.1.1 山羊PHLDA2基因克隆
5.1.2 PHLDA2基因组织表达谱分析
5.2 PHLDA2基因胎盘印记状态分析
5.3 山羊PHLDA2基因启动子克隆和甲基化分析
5.3.1 山羊PHLDA2基因启动子生物信息学分析
5.3.2 山羊PHLDA2基因甲基化分析
参考文献
附录
致谢
发表论文及参加课题一览表
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪COPG2和MEST克隆、印记状况和组织表达分析[J]. 李顺,蒋曹德,石萍,董然然,魏晋,田家伟. 中国农业科学. 2010(23)
[2]猪印记基因的研究现状及其应用前景[J]. 周泉勇,唐艳强,赵书红. 猪业科学. 2010(07)
[3]绵羊基因组印记遗传研究进展[J]. 张立岭. 中国草食动物. 2001(04)
本文编号：3639400
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