河田鸡白血病流行病学调查

发布时间：2017-05-14 01:13

  本文关键词：河田鸡白血病流行病学调查，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus, ALV)属于反转录病毒科(Retroviride),甲型反转录病毒属(Alpharetrovirus)。根据病毒囊膜糖蛋白抗原性、病毒干扰试验、宿主范围及基因组分子生物学特征,将ALV划分为A-J 10个亚群。ALV可以通过水平和垂直方式传播,能够引起血管瘤、骨髓瘤等肿瘤疾病,造成鸡消瘦、精神沉郁、死亡,对养禽业造成了巨大的经济损失。为了减少该病对养禽业的危害,预防和净化AL的工作尤为重要。本研究对AL流行状况进行调查,为预防和净化AL提供了重要的依据。本研究分为两部分：一、采集来源不同种鸡场、屠宰场、散养户的320只河田鸡的泄殖腔棉拭子,进行禽白血病p27抗原检测；采集5个保种场309枚鸡蛋的蛋清进行p27抗原检测；随机选取400只河田鸡进行ALV-A/B抗体与ALV-J抗体检测。结果显示：泄殖腔棉拭子p27抗原检测的平均阳性率为14.06%,其中种鸡场的平均阳性率为7.9%,屠宰场阳性率最高为20%,散养户的阳性率为14.83%；种鸡场鸡蛋的蛋清的p27抗原阳性率为11.65%,以上结果说明河田鸡群中存在ALV。对p27抗原阳性鸡进行的ALV-A/B、ALV-J抗体检测结果显示,ALV-A/B抗体阳性率为8.25%,ALV-J抗体阳性率为6%,ALV-A/B/J抗体阳性率为4.75%,表明河田鸡群中存在ALV-A/B、ALV-J感染和ALV-A/B/J共感染的状况。二、采集疑似AL症状的河田鸡血清及肝脾,用其血清及肝脾研磨液接种DF-1细胞,7d后进行细胞上清p27抗原检测,阳性样品用鉴别ALV亚群的特异性引物进行PCR鉴定。检测结果显示：接种病料的DF-1细胞,其上清用p27检测,有9个样品呈阳性,对阳性样品用特异性引物进行PCR鉴定,其中3个阳性样品能够跑出ALV通用引物的目的条带并且这3个阳性样品中有1个样品能够跑出BD亚群特异性引物的目的条带,可以鉴别出是ALV-B D亚群。
【关键词】：禽白血病 酶联免疫吸附试验 聚合酶链式反应试验 流行病学调查
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31
【目录】：

• 摘要7-8
• Abstract8-10
• 常用英文缩略词表10-12
• 1 综述及研究目的与意义12-21
• 1.1 文献综述12
• 1.2 病原学12-16
• 1.2.1 ALV亚群分类12-13
• 1.2.2 病毒的形态与结构13-14
• 1.2.3 病毒的基因及蛋白14-16
• 1.2.4 病毒的理化性质16
• 1.3 病毒的致病机制16
• 1.3.1 病毒的致瘤机制16
• 1.4 流行病学16-18
• 1.4.1 ALV流行概况16-17
• 1.4.2 传播途径与方式17-18
• 1.4.3 流行特性18
• 1.5 临床症状及病理变化18-19
• 1.6 诊断19-20
• 1.6.1 临床诊断19
• 1.6.2 实验室诊断19-20
• 1.7 AL的防制20-21
• 1.8 本课题研究的目的与意义21
• 2 材料与方法21-30
• 2.1 材料21-24
• 2.1.1 实验仪器21-22
• 2.1.2 实验试剂22-24
• 2.1.3 样品采集及来源24
• 2.2 方法24-30
• 2.2.1 ELISA检测24-27
• 2.2.2 病毒分离27-28
• 2.2.3 病毒基因组DNA提取28-29
• 2.2.4 聚合酶链式反应(PCR)检测29-30
• 3 结果与分析30-35
• 3.1 河田鸡群p27抗原检测结果30-31
• 3.2 河田鸡种鸡场初产鸡蛋蛋清p27抗原检测结果31
• 3.3 禽白血病A/B亚型和J亚型抗体检测结果31
• 3.4 群特异性引物PCR电泳图结果31-35
• 3.4.1 通用引物PCR电泳结果31-32
• 3.4.2 A亚群特异性鉴定引物PCR电泳结果32-33
• 3.4.3 B&D亚群特异性鉴定引物PCR电泳结果33
• 3.4.4 C亚群特异性鉴定引物PCR电泳结果33-34
• 3.4.5 E亚群特异性鉴定引物PCR电泳结果34-35
• 3.4.6 J亚群特异性鉴定引物PCR电泳结果35
• 4 讨论35-37
• 5 结论37-38
• 参考文献38-42
• 致谢42

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