褪黑素和盐酸多巴胺对羊精液低温保存效果的研究

发布时间：2017-05-13 23:01

  本文关键词：褪黑素和盐酸多巴胺对羊精液低温保存效果的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：随着羊人工授精技术的大规模推广与应用,养殖企业和养殖户对羊精液的需求量也越来越大。然而,羊精液低温保存后存在保存时间短、精子活率低、受胎率不高等问题,这严重制约着我国养羊业的发展。羊精液低温稀释剂的深入研究将对加快育种进程、保持和扩大种群中优秀种公羊的优良基因等起到至关重要的作用。因此,探究高效稳定的羊精液低温稀释液配方成为关键,并且抗氧化物及低温保护剂的研究成为羊精液保存的有效研究导向。本试验选取褪黑素和盐酸多巴胺,探讨其在羊精液低温保存过程中的效果,首先从五种低温稀释剂中筛选出最佳保存效果的配方,然后向此配方中分别添加10、20、40、80 mg/L的褪黑素以及1、2、4、8 mg/L的盐酸多巴胺,通过检测精子常规指标、线粒体活性、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量以及过氧化氢酶(CAT)等,分析其对羊精液低温保存效果的影响。本研究获得的主要结果如下:1.在5种低温保存稀释液中,“配方3”保存效果最好,其主要成分是葡萄糖1.15 g、D-果糖1.45 g,PVA(聚乙烯醇)0.25 g、柠檬酸钠1.17 g、乙二胺四乙酸0.23g、碳酸氢钠0.125 g、青霉素5000IU、链霉素0.1 g。在羊精液保存第5 d时,精子活率为45.42%、精子质膜完整率为47.24%、顶体完整率61.26%,显著高于其他组(P0.05)。“配方3”保存后精子的有效保存时间为3.2d,其次为“配方2”。在有效保存时间内,“配方2”稀释保存羊的精子活率、顶体完整率、质膜完整率显著低于“配方3”(P0.05),但显著高于“配方4”和“配方5”(P0.05);“配方1”的保存效果最差,显著低于其他组(P0.05)。因此,将“配方3”作为后续研究的基础稀释剂。2.以“配方3”为基础稀释液,分别添加不同浓度的褪黑素,表明随着褪黑素浓度的添加,各处理组精子活率、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性及精液中T-AOC浓度呈现先升高后降低的趋势,精液中MDA含量则呈相反变化趋势。当褪黑素添加浓度为20 mg/L的时,精液保存5 d后,精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性分别为49.73%、49.02%、67.43%和49.15%,显著高于其他组(P0.05)。当褪黑素添加浓度为40 mg/L时,羊精液保存效果差于20 mg/L处理组,但精子线粒体活性、精液中T-AOC和MDA含量两组间差异不显著(P0.05)。当褪黑素添加浓度为80 mg/L时,保存5 d各项指标均低其他组。因此,褪黑素最佳添加浓度为20 mg/L,而浓度大于40 mg/L时不利于羊精液保存。3.以“配方3”为稀释液分别添加不同浓度的盐酸多巴胺,表明添加适量的盐酸多巴胺有利于提高羊精液保存,其中当盐酸多巴胺的添加浓度为2 mg/L时保存效果最佳;保存5d后精子活率、质膜完整率、顶体完整、线粒体活性、T-AOC和CAT活性,分别为46.86%、49.22%、65.85%、46.25%、2.51 IU/mL和2.82U/mL显著高于其他各组(P0.05)。当盐酸多巴胺的添加浓度达到4 mg/L时,保存1 d开始,各项指标明显降低;保存5 d后精子活率、质膜完整率、顶体完整、线粒体活性、T-AOC活性和CAT活性显著低于其他各组(P0.05)。因此,2 mg/L盐酸多巴胺为羊精液低温保存的最适浓度。
【关键词】：羊精液 低温保存 褪黑素 盐酸多巴胺 保存效果
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S826
【目录】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-12
• 文献综述12-23
• 第一章 羊精液低温液态保存的研究进展12-23
• 1.1 羊精液低温保存稀释液的研究进展13-18
• 1.1.1 羊精液低温保存的原理13
• 1.1.2 羊精液低温保存稀释液主要成分13-16
• 1.1.3 羊精液低温保存效果的影响因素16-18
• 1.2 稀释剂中抗凋亡试剂的研究18-19
• 1.2.1 褪黑素18-19
• 1.2.2 盐酸多巴胺19
• 1.2.3 其他抗凋亡试剂19
• 1.3 精子品质的检测指标19-21
• 1.3.1 精子活率19-20
• 1.3.2 质膜完整率20
• 1.3.3 顶体完整率20
• 1.3.4 抗氧化酶类20-21
• 1.3.5 线粒体活性21
• 1.3.6 受胎率21
• 1.4 本研究的目的和意义21-23
• 试验研究23-45
• 第二章 羊精液低温液态保存的稀释液研究23-31
• 前言23-24
• 2.1 材料与方法24-26
• 2.1.1 试验材料24
• 2.1.2 试验方法24-26
• 2.1.3 检测指标及方法26
• 2.1.4 统计分析26
• 2.2 结果与分析26-28
• 2.2.1 五种精液稀释配方对羊精子活率的影响26-27
• 2.2.2 五种精液稀释配方对羊精子质膜完整率的影响27
• 2.2.2 五种精液稀释配方对羊精子顶体完整率的影响27-28
• 2.3 讨论28-30
• 2.4 小结30-31
• 第三章 褪黑素对羊精液低温保存效果的影响31-38
• 3.1 材料与方法31-32
• 3.1.1 试验材料31-32
• 3.1.2 试验方法32
• 3.1.3 检测方法32
• 3.1.4 统计分析32
• 3.2 结果与分析32-35
• 3.2.1 褪黑素对羊精液低温保存精子活率、质膜、顶体的影响32-34
• 3.2.2 褪黑素对低温保存后的羊精子线粒体活性影响34
• 3.2.3 褪黑素对低温稀释保存后羊精液中T-AOC和MDA浓度的影响34-35
• 3.3 讨论35-37
• 3.4 小结37-38
• 第四章 盐酸多巴胺对羊精液低温保存效果的影响38-45
• 4.1 材料与方法38-39
• 4.1.1 试验材料38-39
• 4.1.2 试验方法39
• 4.1.3 检测方法39
• 4.1.4 统计分析39
• 4.2 结果与分析39-42
• 4.2.1 盐酸多巴胺对羊精液低温保存精子活率、质膜、顶体的影响39-41
• 4.2.2 盐酸多巴胺对低温稀释保存后羊精子线粒体活性影响41
• 4.2.3 盐酸多巴胺羊精液中T-AOC浓度和CAT活性的影响41-42
• 4.3 讨论42-44
• 4.3.1 盐酸多巴胺对羊精子保存效果的影响42-43
• 4.3.2 梯度降温法在羊精液低温保存过程中的应用43-44
• 4.4 小结44-45
• 结论45
• 进一步研究内容45-46
• 参考文献46-55
• 致谢55-56
• 作者简介56

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄群山;王建辰;;褪黑素及其在羊季节性繁殖中的作用[J];国外兽医学.畜禽疾病;1991年01期

2 占今舜;张彬;;浅谈褪黑素在动物生产中的应用[J];饲料博览;2011年07期

3 张娜;张海军;杨荣超;黄韫宇;郭仰东;;褪黑素在植物中的功能研究进展[J];中国农学通报;2012年09期

4 左佳琦;谢佳恒;薛宇轩;冯欢;徐佳妮;黄萱;;褪黑素对缓解植物逆境胁迫作用的研究进展[J];基因组学与应用生物学;2014年03期

5 刘淑英,龄南;褪黑素生理作用的研究进展[J];动物医学进展;2005年07期

6 赵国先;李娜;宋海彬;马可为;;褪黑素对动物的免疫调节作用[J];中国饲料;2008年15期

7 代国杰;朱建津;高琳琳;单立娟;;褪黑素对小鼠抗氧化作用的影响[J];食品工业科技;2010年03期

8 张娜;张海军;杨荣超;黄韫宇;郭仰东;;褪黑素及其在植物中的功能研究进展(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2012年09期

9 徐芳;周海鹏;郭早霞;于宏安;袁玉川;巩智刚;王玉华;;植物褪黑素及其抗逆性研究[J];基因组学与应用生物学;2013年02期

10 刘淑英;齐景伟;赵怀平;徐斯日古楞;龄南;刘志楠;;不同光照条件下褪黑素对鸡鸭鹌鹑外周血淋巴细胞及其亚群变化的影响[J];中国兽医科学;2006年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 石琼;孙儒泳;张崇理;许荣昆;;人体中褪黑素的生理作用[A];中国动物科学研究——中国动物学会第十四届会员代表大会及中国动物学会65周年年会论文集[C];1999年

2 贾娇;杨红;;褪黑素及褪黑素能类药物临床应用的研究进展[A];中华医学会第十次全国精神医学学术会议论文汇编[C];2012年

3 叶晓华;怀佳萍;孙学成;徐晓;吴建胜;;褪黑素通过调节白介素22改善重症急性胰腺炎相关性肺损伤[A];2013第六届浙江省消化病学术大会论文汇编[C];2013年

4 袁崇刚;施英唐;何令;;持续光照和褪黑素对小鼠骨髓细胞周期的影响[A];动物学专辑——上海市动物学会2000年年会论文集[C];2000年

5 刘志民;刘志民;赵瑛;陆祖谦;沈玉美;谈雯;彭树勋;;褪黑素受体在体内分布及信息传导通路的研究[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年

6 徐峰;王芳;李经才;;褪黑素睡眠调节作用的神经机制[A];中国生理学会肥胖的临床与基础暨神经免疫内分泌学术研讨会论文摘要汇编[C];2003年

7 何颖;李经才;;褪黑素对学习、记忆的作用研究进展[A];2004全国时间生物医学学术会议论文集[C];2004年

8 邱旭升;邱勇;陈晖;孙旭;邓亮生;郑振耀;;青少年特发性脊柱侧凸患者褪黑素信号传导通路的初步研究[A];第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议论文汇编[C];2007年

9 吴建胜;怀佳萍;邵颖颖;孙学成;金尹;黄智铭;;褪黑素通过调节细胞内钙稳态改善急性坏死性胰腺炎[A];2012年浙江省内科学年会论文集[C];2012年

10 王卫民;肖国民;裘五四;吴建跃;程军;姜启周;徐海松;张眉;方蓉;;颅脑损伤昏迷患者血清褪黑素变化的临床研究初步报告[A];2009年浙江省神经外科学术年会论文汇编[C];2009年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 方舟子 留美学者，生物化学博士;褪黑素究竟有多神奇？[N];经济观察报;2007年

2 苹果;未成年人不宜服褪黑素治失眠[N];中国妇女报;2012年

3 李玉霞;“褪黑素”保健品不要随便吃[N];中国人口报;2004年

4 中国医学科学院药物研究所教授　张均田;含褪黑素保健品的功效[N];光明日报;2002年

5 ;褪黑素安全否看看专家怎么说[N];健康报;2002年

6 美国北达科他大学医学院 任骏 张晓;褪黑素：现状与前景[N];健康报;2002年

7 任骏 张晓;不必滥用褪黑素[N];科技日报;2002年

8 本报记者 黄萱;“褪黑素”到底是什么[N];人民政协报;2002年

9 本文由香港麦迪信医学出版有限公司供稿;褪黑素长期服用安全吗？用于儿童可靠吗？[N];医药经济报;2003年

10 主任医师 吕斌;褪黑素使用过量会影响生育[N];卫生与生活报;2006年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 蒋婷婷;褪黑素对糖尿病视网膜病变的保护作用及机制研究[D];复旦大学;2014年

2 郭攀;褪黑素保护镉暴露所致肝毒性效应的机制探讨[D];第三军医大学;2015年

3 李吉国;褪黑素对牙髓炎TLR4、NF-κB调节机制的相关研究[D];第四军医大学;2015年

4 徐永鹏;褪黑素对1-溴丙烷引起中枢神经系统损伤保护作用及机制研究[D];山东大学;2016年

5 黄海;褪黑素对外视网膜神经元信号传递的调制[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2005年

6 韩静;褪黑素抗吗啡奖赏效应的作用及其中枢机制的分析[D];福建医科大学;2008年

7 李晓峰;褪黑素对大鼠脑出血后继发性脑损伤的作用及机制研究[D];华中科技大学;2011年

8 平勇;褪黑素对鲫鱼和大鼠外层视网膜视杆信号通路的调制[D];复旦大学;2009年

9 王芳;影响褪黑素催眠作用的诸因素分析[D];沈阳药科大学;2002年

10 杨凌辉;褪黑素及光照周期的改变对大鼠脂肪组织代谢的影响[D];第二军医大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王江波;褪黑素、钙调蛋白在特发性脊柱侧凸模型中的相互作用[D];福建医科大学;2015年

2 马赛君;线粒体凋亡途径参与褪黑素诱导胃癌细胞凋亡[D];福建医科大学;2015年

3 赵景新;血液透析患者褪黑素水平与氧化应激、炎症状态及睡眠质量相关性分析[D];河北医科大学;2015年

4 刘帅;褪黑素对缺氧缺血所致的新生大鼠未成熟脑白质损伤的干预作用[D];郑州大学;2015年

5 胡奇珍;褪黑素抑制酒精性脂肪肝的动物实验研究[D];安徽医科大学;2015年

6 毛琳;不同尺寸纳米三氧化钨致小鼠肝肾毒性研究以及褪黑素的保护作用[D];华中师范大学;2015年

7 张笑哲;褪黑素对氧化应激条件下ARPE-19细胞与人脐静脉内皮细胞共培养体系的作用研究及机制探讨[D];复旦大学;2014年

8 肖志勇;新型褪黑素受体激动剂Neu-240改善帕金森模型大小鼠运动功能损伤[D];南华大学;2015年

9 胡春利;褪黑素通过Reelin信号通路对Aβ_(1-42)介导的神经退行性变的保护作用[D];辽宁医学院;2015年

10 李伟;外源褪黑素对超低温冷冻小鼠成熟卵母细胞发育潜力的影响[D];四川农业大学;2015年

  本文关键词：褪黑素和盐酸多巴胺对羊精液低温保存效果的研究，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：363776