猪链球菌脑膜炎株的病原特性及其5’核苷酸酶的分子致病机制

发布时间：2022-02-23 18:35

　　猪链球菌（Streptococcus suis, SS）是猪的重要病原菌,同时也是一种重要的人畜共患病病原。根据荚膜多糖抗原的不同,SS可分为33个血清型,其中猪链球菌2型（SS2）分布最广,毒力最强。此外,流行病学调查表明,猪链球菌9型（SS9）也是一个重要致病血清型,与断奶仔猪脑膜炎、败血症和肺炎的爆发相关。通过分析SS2脑膜炎株SC070731病原特性和研究SS9脑膜炎株5’核苷酸酶（NT）抑制宿主免疫系统及其对毒力影响,为进一步了解猪链球菌致病机制提供依据。1.SS2脑膜炎株SC070731的病原特性本课题组前期分离一株SS2脑膜炎株SC070731,并对其进行全基因组测序,发现该菌株存在96.7%（57/59）的毒力因子,且与其它SS2相比含有一特有105 K基因岛。通过斑马鱼模型毒力评价、生长曲线、溶血试验及青霉素药敏试验等进一步了解该菌株病原特性。结果显示：SC070731对斑马鱼LD5o是4.95×105CFU/尾,与SS2强毒株HA9801和ZY05719相近,但是显著强于SS2毒力株P1/7（P<0.05）；其复制一代所需时间为48 min,与HA9801、Z... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩写词表
第一篇 文献综述
    第一章 猪链球菌毒力因子的研究进展
        1 猪链球菌病概述
        2 猪链球菌的毒力因子概述
            2.1 猪链球菌的毒力因子的鉴定
            2.2 猪链球菌毒力因子的致病机理
        参考文献
    第二章 胞外核苷酸酶的研究进展
        1 胞外核苷酸酶的主要功能
        2 胞外核苷酸酶的分类
            2.1 胞外三磷酸核苷酸酶
            2.2 胞外焦磷酸核苷酸酶
            2.3 碱性磷酸酶
            2.4 胞外5'-核苷酸酶
        参考文献
第二篇 试验研究
    第三章 猪链球菌脑膜炎株SC070731的病原特性
        1 材料与方法
            1.1 菌株及培养条件
            1.2 测定各菌株的生长曲线
            1.3 溶血试验
            1.4 斑马鱼试验
            1.5 青霉素药敏试验
        2 实验结果
            2.1 生长曲线比较
            2.2 溶血特性比较
            2.3 斑马鱼毒力比较
            2.4 青霉素药敏试验
        3 讨论
        参考文献
    第四章 猪链球菌脑膜炎株5'核苷酸酶基因缺失株的构建及其生物学特性
        1 材料与方法
            1.1 菌株和质粒
            1.2 试剂与仪器
            1.3 缺失株的构建与鉴定
            1.4 互补株的构建与鉴定
            1.5 生长特性分析
            1.6 5'核苷酸酶活性
            1.7 5'核苷酸酶的克隆表达
            1.8 5'核苷酸酶的细胞定位
        2 实验结果
            2.1 缺失载体的构建与鉴定
            2.2 缺失株的筛选
            2.3 互补载体的构建与鉴定
            2.4 互补株的筛选
            2.5 生长特性分析
            2.6 5'核苷酸酶活性的鉴定
            2.7 表达载体的鉴定
            2.8 重组蛋白的表达及纯化
            2.9 重组蛋白的免疫原性检测
            2.10 兔抗5’核苷酸酶多克隆抗体制备
            2.11 Western blot检测5’核苷酸酶细胞定位
        3 讨论
        参考文献
    第五章 猪链球菌脑膜炎株5'核苷酸酶的分子致病机制
        1 材料与方法
            1.1 菌株、试剂和仪器
            1.2 实验动物
            1.3 猪全血存活试验
            1.4 小鼠脏器分布试验
            1.5 斑马鱼毒力试验
            1.6 小鼠转录组分析
        2 实验结果
            2.1 5'核苷酸酶促进猪链球菌在猪全血中的存活
            2.2 小鼠模型评价5'核苷酸酶缺失株毒力
            2.3 斑马鱼模型评价5'核苷酸酶缺失株毒力
            2.4 小鼠白细胞体内转录组揭示5'核苷酸酶分子致病机制
        3 讨论
        参考文献
全文总结
致谢
硕士期间发表及待发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]用斑马鱼检测猪链球菌2型的致病力[J]. 濮俊毅,黄新新,陆承平.  中国农业科学. 2007(11)
[2]猪链球菌2型纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白全基因的克隆及融合表达[J]. 孙理云,范红结,陆承平.  农业生物技术学报. 2005(06)



本文编号：3641143