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miR-1对陕北白绒山羊毛囊干细胞增殖分化的影响

发布时间:2022-02-23 23:41
  陕北白绒山羊是绒肉兼用型的地方培育品种,其皮肤次级毛囊所生长的毛发纤维(羊绒)因其优良的性状而具有极高的经济价值。miRNA是一类在大多数情况下结合在靶基因3’-UTR区引起靶基因降解或抑制mRNA翻译,进行转录后调控的非编码小分子。研究表明多种miRNAs对毛囊周期性发育过程进行调控,然而对于miRNAs如何调控陕北白绒山羊绒毛生长发育相关机制尚不清楚。本课题组前期对绒山羊毛乳头细胞和毛乳头来源外泌体的miRNAs测序分析发现miR-1在外泌体中特异性表达,且表达量较高。为了解析miR-1对绒山羊皮肤毛囊干细胞(HFSCs,Hair follical stem cells)生长发育的影响,本研究利用相关分子生物学手段来探究miR-1在毛囊周期性发育中的作用机理。试验过程及具体结果如下:1.过表达miR-1后,分别利用CCK8、EdU和流式细胞仪检测细胞周期技术来探究miR-1对陕北白绒山羊HFSCs增殖、凋亡等的调控作用。结果表明,过表达miR-1后HFSCs增殖能力显著减弱(p<0.01),处于S期的细胞比例显著减少(p<0.01),而处于G0-G1期的细胞比例显著增加... 

【文章来源】:西北农林科技大学陕西省211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】:65 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第一章 毛囊干细胞及miRNA对毛囊干细胞调控的研究进展
    1.1 毛囊的结构和形态发育
    1.2 毛囊干细胞的功能及定位
    1.3 毛囊干细胞的标记物
    1.4 miRNA在毛囊发育中的作用
        1.4.1 miRNA的功能
        1.4.2 miRNA与毛囊发育相关的研究进展
        1.4.3 miRNA参与毛囊发育的信号通路
        1.4.4 miRNA对毛囊干细胞调控的影响
    1.5 miR-1 的研究进展
        1.5.1 miR-1 与细胞增殖、凋亡的相关研究
        1.5.2 miR-1 与毛囊生长发育相关的研究
    1.6 研究目的与意义
第二章 miR-1 对陕北白绒山羊毛囊干细胞增殖和分化的影响
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验耗材、试剂及仪器
        2.1.3 实验方法
    2.2 实验结果
        2.2.1 过表达miR-1 对毛囊干细胞增殖的影响
        2.2.2 过表达miR-1 对毛囊干细胞分化的影响
    2.3 讨论
    2.4 小结
第三章 miR-1 的靶基因分析及验证
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验试剂、耗材及仪器
        3.1.3 实验方法
    3.2 结果
        3.2.1 miR-1 的靶基因预测
        3.2.2 陕北白绒山羊皮肤的总RNA纯度及完整性鉴定
        3.2.3 靶基因3’-UTR表达载体构建
        3.2.4 靶基因3’UTR及其突变表达载体的验证
        3.2.5 双荧光素酶报告基因检测
    3.3 讨论
    3.4 小结
第四章 总结
    4.1 结论
    4.2 创新点
    4.3 还需进一步探讨的问题
参考文献
附录
    实验仪器
    实验耗材
    实验方法
缩略词表
致谢
作者简介



本文编号:3641527

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