四川省石渠县牦牛源蜱种鉴定及其携带巴尔通体、无形体与斑点热群立克次体的分子检测

发布时间：2022-02-24 16:40

　　蜱是一类寄生于脊椎动物体表的专性吸血性寄生虫,目前在全球已经发现800多种蜱,并且已经确定蜱至少能传播217种病原体,包括病毒、细菌和寄生虫等,给人类健康及畜牧业发展带来严重影响。迄今为止,有关石渠县蜱的种类及携带病原情况的资料一片空白,因此本研究旨在掌握石渠县蜱种类及携带病原的种类、感染情况和分子特征,为进一步完善相应的蜱媒病防控措施提供数据支撑。方法:采集石渠县8个地点牦牛体表寄生蜱,对采集到的蜱进行形态学鉴定以及线粒体16S rRNA和COI基因的分子生物学鉴定,并进行系统发育分析。再采用PCR检测技术,分别特异性扩增巴尔通体的gltA和rpoB基因、无形体的16S rRNA基因、立克次体的ompA和ompB基因片段、土拉菌和鼠疫耶尔森菌,并对阳性产物测序,再进行系统发育分析,最后统计分析病原的感染情况。结果:1)蜱种类:共采集1352只蜱,经鉴定为青海血蜱和西藏革蜱,其中青海血蜱394只,占29.13%;西藏革蜱958只,占70.87%,为优势种。2)病原检测结果:PCR检测结果显示,石渠县蜱传巴尔通体、无形体和斑点热群立克次体的阳性率分别为25.96%（351/1352）、1... 

【文章来源】：西南民族大学四川省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 蜱分类及蜱传病的研究进展
    1. 蜱分类研究进展
        1.1 蜱的概述
        1.2 蜱分类鉴定方法
            1.2.1 传统分类鉴定方法
            1.2.2 现代分类鉴定方法
        1.3 蜱类分布
            1.3.1 我国蜱类分布
            1.3.2 我国青藏高原蜱类分布
    2. 主要蜱传病原
        2.1 巴尔通体
        2.2 立克次体
        2.3 无形体
        2.4 土拉弗朗西斯菌
        2.5 鼠疫耶尔森菌
    3. 本研究的目的及意义
第2章 四川省石渠县牦牛体表寄生蜱形态学与分子生物学鉴定
    1 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 蜱虫采集
            1.1.2 主要试剂及配制
            1.1.3 主要仪器
            1.1.4 主要耗材
        1.2 方法
            1.2.1 形态学鉴定
            1.2.2 分子生物学鉴定
                1.2.2.1 虫体组织DNA提取
                1.2.2.2 PCR引物的选择
                1.2.2.3 PCR反应体系
                1.2.2.4 PCR反应条件
                1.2.2.5 琼脂糖凝胶电泳
                1.2.2.6 测序及结果分析
    2 结果
        2.1 蜱形态特征
            2.1.1 青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis)
            2.1.2 西藏革蜱(Dermacentor everestianus)
        2.2 蜱分子生物学鉴定结果与遗传进化分析
            2.2.1 COI基因和16S rRNA基因扩增结果
            2.2.2 COI基因和16S rRNA基因序列分析
                2.2.2.1 青海血蜱16S rRNA基因分析
                2.2.2.2 青海血蜱COI基因分析
                2.2.2.3 西藏革蜱16S rRNA基因分析
                2.2.2.4 西藏革蜱COI基因分析
        2.3 样本鉴定结果
    3 讨论
    4 小结
第3章 蜱传巴尔通体、无形体与斑点热群立克次体的分子检测
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 虫体组织DNA提取
            1.2.2 PCR引物的选择
            1.2.3 PCR反应体系
            1.2.4 PCR反应条件
            1.2.5 琼脂糖凝胶电泳
            1.2.6 序列分析及统计分析
    2 结果
        2.1 蜱传病原基因扩增结果
        2. 2 巴尔通体、无形体与斑点热群立克次体遗传进化分析
            2.2.1 巴尔通体gltA基因遗传进化分析
            2.2.2 巴尔通体rpoB基因遗传进化分析
            2.2.3 无形体16S rRNA基因遗传进化分析
            2.2.4 斑点热群立克次体ompA基因遗传进化分析
            2.2.5 斑点热群立克次体ompB基因遗传进化分析
        2. 3 巴尔通体、无形体与斑点热群立克次体检测结果
            2.3.1 各采样点巴尔通体、无形体与斑点热群立克次体感染情况
            2.3.2 不同蜱种的巴尔通体无形体与斑点热群立克次体感染情况
            2.3.3 同一地点不同蜱种的巴尔通体感染情况分析
            2.3.4 巴尔通体、无形体和斑点热群立克次体混合感染情况
    3 讨论
        3.1 巴尔通体的讨论分析
        3.2 无形体的讨论分析
        3.3 斑点热群立克次体的讨论分析
        3.4 巴尔通体、无形体与斑点热群立克次体的混合感染分析
    4 小结
全文结论
参考文献
硕士期间已发表的文章
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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本文编号：3643119