基于蛋白组研究热应激影响肉鸡固有免疫的分子机制以及薄荷提取物的调节作用
发布时间：2022-02-27 07:49
为了阐明高温环境下肉鸡免疫机能下降的机制以及薄荷提取物的调节作用,本研究通过建立肉鸡免疫抑制的热应激模型,以脾脏为研究对象,应用iTRAQ定量蛋白组学技术,分析热应激下肉鸡脾脏总蛋白质的变化规律,结合生物信息学方法,对热应激引起免疫抑制的分子机制进行深入的研究,并研究薄荷提取物缓解热应激引起免疫抑制的机制。主要研究内容及结果如下:1、肉鸡免疫抑制的热应激模型构建:96只28日龄的健康AA肉鸡随机分成两组,分别为对照组21℃和热应激组31℃,每个组48只鸡,每个组4个重复,每个重复12只鸡,相对湿度为60%,42日龄时试验结束,测定体核温度、呼吸频率和生产性能以及免疫机能。结果表明:热应激显著增加了肉鸡的体核温度和呼吸频率,显著降低了脾脏重量和脾脏指数,显著升高了血浆IL-2,IFN-α,IL-1β,IL-6和TNF-α的含量,显著降低了IFN-β的含量,导致免疫功能的下降,从而构建了肉鸡免疫抑制的热应激模型。2、基于iTRAQ的肉鸡脾脏蛋白组学研究:42日龄时,对照组21℃和热应激组31℃每个重复各取3只鸡,进行屠宰取脾脏样品用于iTRAQ蛋白组学定量分析,利用基于质谱的PRM技术和R...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
对照组和热应激组肉鸡的脾脏重量和脾脏指数（A图为脾脏重量，B图为脾脏指数）
细胞因子含量（A 图为 IL-2,B 图为 IFN-α，C 图为 IFN-β，D 图为 IL-1β，E图为 IL-6，F 图为 TNF-α）nes in broilers of the heat stress and control groups: IL-2 (A), IFN-α (B), IFN-β (C),IL-1α(D), IL-6(E), and TNF-α(F).价肉鸡热应激的重要指标，关于环境高温对肉鸡体核温度和呼吸频恒温动物，成年家禽的体温通常维持在41-42℃。多数研究表明，热高，并且体核温度随着环境温度的升高而升高(Berrong, et al, 1998 1999;Lacey, et al, 2000; Yanagi, et al, 2002)。在对肉鸡热应激模型的构激建模的指标(Brown-Brandl, et al; 1997; Egbunike, 1979; 陶秀萍，在热应激的条件下，通过增加呼吸频率，促进增发散热。随着环境会显著的升高(李静等, 2005;Anderson, 1993; 陈燕等, 2013)。有研究3h，肉鸡的呼吸频率从30次/分钟逐渐上升到200次/分钟（Zhou, et al显著增加了肉鸡的呼吸频率(钟光等, 2018)。本研究发现热应激显著吸频率（P<0.05），与前人的研究结果一致，表明热应激模型已经构
3.1.2.7 质量控制（QC）本实验利用的是Q-Exactive 质谱仪，因此可以获得高质量的一级和二级质谱图谱，从而保证采集数据的准确性。从图3.1可以看出我们鉴定结果的准确可靠性，因为本实验鉴定到的肽段的质量偏差是在10ppm以内。从图3.2可以看出，MS2的MASCOT 得分比较理想，由此可以看出MS的实验数据质量比较高。图3.3所示，被等量标记后的热应激组和对照组样品中大部分蛋白质的丰度比值接近1。图3.1 肽段离子的质量偏差分布Figure3.1 Mass error distribution of peptide横坐标表示的是肽段离子理论质荷比和质谱测得质荷比的质量偏差，单位ppm即百万分之一，是一个相对单位。纵坐标为MASCOT肽段得分。
【参考文献】：
期刊论文
[1]循环热应激对黄羽肉鸡呼吸机能、生长性能和肝脏抗氧化功能的影响[J]. 钟光,邵丹,施寿荣,童海兵,宋志刚. 动物营养学报. 2018(03)
[2]固有免疫相关模式识别受体研究进展[J]. 何邵平,贺建华,陈佳亿,陈福,欧淑琦. 动物营养学报. 2017(11)
[3]下丘脑核转录因子NF-kB的临床研究进展[J]. 李凡,常彦青,丁军. 解放军医药杂志. 2016(11)
[4]持续偏热处理对肉仔鸡免疫器官指数、小肠形态结构和黏膜免疫指标的影响[J]. 张少帅,甄龙,冯京海,胡春红,彭骞骞,常玉,周莹,张敏红. 动物营养学报. 2015(12)
[5]偏热刺激对肉鸡休息行为、生理及生产性能的影响[J]. 胡春红,张敏红,冯京海,苏红光,张少帅. 动物营养学报. 2015(07)
[6]环境高温与饲粮粗蛋白质水平对肉鸡生产性能、氮代谢和氮排放的影响[J]. 陈燕,冯京海,张敏红,刘圈炜,姜礼文. 动物营养学报. 2013(10)
[7]Tissue expression and developmental regulation of chicken cathelicidin antimicrobial peptides[J]. Mallika Achanta,Lakshmi T Sunkara,Yugendar R Bommineni. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2012(02)
[8]急性高温对肉鸡生理状态及细胞免疫的影响[J]. 韩爱云,左晓磊,姚清国,肖霄,马媛媛,张文娜. 江苏农业科学. 2012(04)
[9]鸡Toll样受体研究进展[J]. 甘珊珊,何秀苗,韦平. 动物医学进展. 2010(09)
[10]高温下清凉冲剂对鸡免疫器官中CD4+、CD8+ T细胞数量的影响[J]. 李新国,王自力,朱晓宇,刘凤华,许剑琴. 中兽医医药杂志. 2006(06)
博士论文
[1]基于生理代谢、蛋白组学和菌群多样性解析热应激对泌乳奶牛的影响[D]. 闵力.中国农业大学 2017
[2]鸡NOD1基因克隆、功能及信号通路的初步研究[D]. 陶志云.扬州大学 2016
[3]肉鸡急性热应激损伤及其机理的研究[D]. 李守军.中国农业大学 2005
[4]不同温湿风条件对肉鸡应激敏感生理生化指标影响的研究[D]. 陶秀萍.中国农业科学院 2003
硕士论文
[1]环境高温与饲粮粗蛋白质水平对肉鸡氮代谢和有害气体生成的影响[D]. 陈燕.中国农业科学院 2013
[2]高温环境下不同日粮代谢能和粗蛋白水平对肉鸡氮沉积和氮排放的影响[D]. 殷瑞娟.河北工程大学 2013
[3]肉鸡组织的热应激损伤与Hsp90水平及其mRNA表达的变化[D]. 雷蕾.南京农业大学 2008
本文编号：3645093
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
对照组和热应激组肉鸡的脾脏重量和脾脏指数（A图为脾脏重量，B图为脾脏指数）
细胞因子含量（A 图为 IL-2,B 图为 IFN-α，C 图为 IFN-β，D 图为 IL-1β，E图为 IL-6，F 图为 TNF-α）nes in broilers of the heat stress and control groups: IL-2 (A), IFN-α (B), IFN-β (C),IL-1α(D), IL-6(E), and TNF-α(F).价肉鸡热应激的重要指标，关于环境高温对肉鸡体核温度和呼吸频恒温动物，成年家禽的体温通常维持在41-42℃。多数研究表明，热高，并且体核温度随着环境温度的升高而升高(Berrong, et al, 1998 1999;Lacey, et al, 2000; Yanagi, et al, 2002)。在对肉鸡热应激模型的构激建模的指标(Brown-Brandl, et al; 1997; Egbunike, 1979; 陶秀萍，在热应激的条件下，通过增加呼吸频率，促进增发散热。随着环境会显著的升高(李静等, 2005;Anderson, 1993; 陈燕等, 2013)。有研究3h，肉鸡的呼吸频率从30次/分钟逐渐上升到200次/分钟（Zhou, et al显著增加了肉鸡的呼吸频率(钟光等, 2018)。本研究发现热应激显著吸频率（P<0.05），与前人的研究结果一致，表明热应激模型已经构
3.1.2.7 质量控制（QC）本实验利用的是Q-Exactive 质谱仪，因此可以获得高质量的一级和二级质谱图谱，从而保证采集数据的准确性。从图3.1可以看出我们鉴定结果的准确可靠性，因为本实验鉴定到的肽段的质量偏差是在10ppm以内。从图3.2可以看出，MS2的MASCOT 得分比较理想，由此可以看出MS的实验数据质量比较高。图3.3所示，被等量标记后的热应激组和对照组样品中大部分蛋白质的丰度比值接近1。图3.1 肽段离子的质量偏差分布Figure3.1 Mass error distribution of peptide横坐标表示的是肽段离子理论质荷比和质谱测得质荷比的质量偏差，单位ppm即百万分之一，是一个相对单位。纵坐标为MASCOT肽段得分。
【参考文献】：
期刊论文
[1]循环热应激对黄羽肉鸡呼吸机能、生长性能和肝脏抗氧化功能的影响[J]. 钟光,邵丹,施寿荣,童海兵,宋志刚. 动物营养学报. 2018(03)
[2]固有免疫相关模式识别受体研究进展[J]. 何邵平,贺建华,陈佳亿,陈福,欧淑琦. 动物营养学报. 2017(11)
[3]下丘脑核转录因子NF-kB的临床研究进展[J]. 李凡,常彦青,丁军. 解放军医药杂志. 2016(11)
[4]持续偏热处理对肉仔鸡免疫器官指数、小肠形态结构和黏膜免疫指标的影响[J]. 张少帅,甄龙,冯京海,胡春红,彭骞骞,常玉,周莹,张敏红. 动物营养学报. 2015(12)
[5]偏热刺激对肉鸡休息行为、生理及生产性能的影响[J]. 胡春红,张敏红,冯京海,苏红光,张少帅. 动物营养学报. 2015(07)
[6]环境高温与饲粮粗蛋白质水平对肉鸡生产性能、氮代谢和氮排放的影响[J]. 陈燕,冯京海,张敏红,刘圈炜,姜礼文. 动物营养学报. 2013(10)
[7]Tissue expression and developmental regulation of chicken cathelicidin antimicrobial peptides[J]. Mallika Achanta,Lakshmi T Sunkara,Yugendar R Bommineni. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2012(02)
[8]急性高温对肉鸡生理状态及细胞免疫的影响[J]. 韩爱云,左晓磊,姚清国,肖霄,马媛媛,张文娜. 江苏农业科学. 2012(04)
[9]鸡Toll样受体研究进展[J]. 甘珊珊,何秀苗,韦平. 动物医学进展. 2010(09)
[10]高温下清凉冲剂对鸡免疫器官中CD4+、CD8+ T细胞数量的影响[J]. 李新国,王自力,朱晓宇,刘凤华,许剑琴. 中兽医医药杂志. 2006(06)
博士论文
[1]基于生理代谢、蛋白组学和菌群多样性解析热应激对泌乳奶牛的影响[D]. 闵力.中国农业大学 2017
[2]鸡NOD1基因克隆、功能及信号通路的初步研究[D]. 陶志云.扬州大学 2016
[3]肉鸡急性热应激损伤及其机理的研究[D]. 李守军.中国农业大学 2005
[4]不同温湿风条件对肉鸡应激敏感生理生化指标影响的研究[D]. 陶秀萍.中国农业科学院 2003
硕士论文
[1]环境高温与饲粮粗蛋白质水平对肉鸡氮代谢和有害气体生成的影响[D]. 陈燕.中国农业科学院 2013
[2]高温环境下不同日粮代谢能和粗蛋白水平对肉鸡氮沉积和氮排放的影响[D]. 殷瑞娟.河北工程大学 2013
[3]肉鸡组织的热应激损伤与Hsp90水平及其mRNA表达的变化[D]. 雷蕾.南京农业大学 2008
本文编号：3645093
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