树突状细胞介导重组HA-DC乳酸菌对H9N2型禽流感保护作用研究
发布时间:2022-02-28 20:56
禽流感病毒感染呈世界范围分布,给养禽业造成巨大的经济损失,严重危害我国养禽业的发展。H9N2亚型禽流感病毒(AIV)是当今禽流感流行的主要型别之一,自我国有感染人事件以后,H9N2亚型流感病毒更引起了人们的关注。本研究以植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum NC8)作为递呈抗原的活菌载体,以禽流感病毒主要免疫保护性抗原HA蛋白的基因片段为靶基因,并融合36bp大小的树突状细胞诱导肽(DCpep),构建了表达HA-DC的重组植物乳杆菌表达系统,并对其免疫效果进行分析。依据目的基因和穿梭表达载体质粒的特点,应用primer5.0软件进行引物设计。以pSIP409-HA质粒作为模板,通过PCR扩增得到大约1701bp的HA基因,再经过一次PCR扩增得到大约1737bp的HA-DC基因,与带有粘性末端的pGEM-T Easy载体连接,得到pGEM-T-HA-DC。再将pGEM-T-HA-DC普通转化入DH5a中,进行酶切、PCR鉴定和测序分析后与穿梭表达载体pSIP409连接,再进行酶切、PCR鉴定后电转化入植物乳杆菌NC8中,得到重组菌L/pSIP409-HA-DC。在...
【文章来源】:吉林农业大学吉林省
【文章页数】:67 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一篇 文献综述
第一章 禽流感研究进展
第二章 乳酸菌作为口服疫苗传递载体的研究进展
第三章 树突状细胞及诱导肽的研究进展
第二篇 研究内容
第一章 表达HA-DC重组乳酸菌的构建
1.1 材料和方法
1.2 结果
1.3 讨论
1.4 小结
第二章 PSIP409-HA-DC在乳酸菌中的表达
2.1 材料与方法
2.2 结果
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 重组功能乳酸菌饲喂小鼠后免疫指标检测
3.1 材料与方法
3.2 结果
3.3 讨论
3.4 小结
结论
参考文献
附录
作者简介
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆与表达[J]. 王春岩,刘莉,杨文涛,王美芳,石春卫,杨桂连,王春凤. 中国微生态学杂志. 2012(09)
[2]猪流感病毒研究进展[J]. 王宏魁,黄涛,苏惠龙,曹三杰. 河南农业科学. 2011(12)
[3]H9N2禽流感病毒研究进展[J]. 鲁健,田科雄. 实用预防医学. 2011(02)
[4]牛乳中乳酸乳球菌nisRK基因的克隆与序列分析[J]. 郝凤奇,王春凤,杨桂连,叶丽萍,杨中娜. 吉林农业大学学报. 2010(01)
[5]乳酸杆菌在树突状细胞诱导抗肿瘤免疫杀伤中的作用[J]. 逯彩虹,程建新,孙富国,王海波,赵素芬,田瑛,闫西红,田学勤. 中国医科大学学报. 2009(08)
[6]绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体构建及重组乳酸菌制备[J]. 陈晓雷,杨桂连,王春凤. 吉林农业大学学报. 2009(03)
[7]H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立及高产细胞型疫苗株的拯救[J]. 刘大飞,刘明,刘春国,杨涛,万春和,陈浩,齐金龙,杜金玲,李洪涛,孙恩成,刘大程. 中国农业科学. 2009(05)
[8]肠道粘膜免疫系统抗原提呈细胞研究进展[J]. 周维英,张卫军,邹全明. 免疫学杂志. 2009(02)
[9]猪源A组轮状病毒重组质粒pW425et-Vp7在乳酸菌中的表达及免疫原性分析[J]. 胡静涛,王春凤. 微生物学报. 2008(11)
[10]H9N2亚型禽流感病毒对鸭免疫器官的组织学影响[J]. 李静萍,盖晋宏,魏锁成,胡庆平. 西北民族大学学报(自然科学版). 2008(03)
博士论文
[1]H9N2亚型禽流感病毒气源性传染的监测及其分子机制的研究[D]. 吕静.山东农业大学 2012
[2]H9N2亚型禽流感病毒抗原变异及感染哺乳动物分子机制的研究[D]. 平继辉.南京农业大学 2008
[3]鹅细小病毒VP3基因与鹅白细胞介素-2基因分泌性融合表达载体的构建及在乳酸杆菌中表达的研究[D]. 丁轲.四川农业大学 2006
[4]不同源性禽流感病毒株的分离鉴定及其主要基因信息的研究[D]. 王伟利.吉林农业大学 2006
硕士论文
[1]H5N1亚型禽流感病毒NS1149位氨基酸对生物学功能的影响[D]. 王爱琴.内蒙古农业大学 2006
本文编号:3645567
【文章来源】:吉林农业大学吉林省
【文章页数】:67 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一篇 文献综述
第一章 禽流感研究进展
第二章 乳酸菌作为口服疫苗传递载体的研究进展
第三章 树突状细胞及诱导肽的研究进展
第二篇 研究内容
第一章 表达HA-DC重组乳酸菌的构建
1.1 材料和方法
1.2 结果
1.3 讨论
1.4 小结
第二章 PSIP409-HA-DC在乳酸菌中的表达
2.1 材料与方法
2.2 结果
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 重组功能乳酸菌饲喂小鼠后免疫指标检测
3.1 材料与方法
3.2 结果
3.3 讨论
3.4 小结
结论
参考文献
附录
作者简介
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆与表达[J]. 王春岩,刘莉,杨文涛,王美芳,石春卫,杨桂连,王春凤. 中国微生态学杂志. 2012(09)
[2]猪流感病毒研究进展[J]. 王宏魁,黄涛,苏惠龙,曹三杰. 河南农业科学. 2011(12)
[3]H9N2禽流感病毒研究进展[J]. 鲁健,田科雄. 实用预防医学. 2011(02)
[4]牛乳中乳酸乳球菌nisRK基因的克隆与序列分析[J]. 郝凤奇,王春凤,杨桂连,叶丽萍,杨中娜. 吉林农业大学学报. 2010(01)
[5]乳酸杆菌在树突状细胞诱导抗肿瘤免疫杀伤中的作用[J]. 逯彩虹,程建新,孙富国,王海波,赵素芬,田瑛,闫西红,田学勤. 中国医科大学学报. 2009(08)
[6]绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体构建及重组乳酸菌制备[J]. 陈晓雷,杨桂连,王春凤. 吉林农业大学学报. 2009(03)
[7]H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立及高产细胞型疫苗株的拯救[J]. 刘大飞,刘明,刘春国,杨涛,万春和,陈浩,齐金龙,杜金玲,李洪涛,孙恩成,刘大程. 中国农业科学. 2009(05)
[8]肠道粘膜免疫系统抗原提呈细胞研究进展[J]. 周维英,张卫军,邹全明. 免疫学杂志. 2009(02)
[9]猪源A组轮状病毒重组质粒pW425et-Vp7在乳酸菌中的表达及免疫原性分析[J]. 胡静涛,王春凤. 微生物学报. 2008(11)
[10]H9N2亚型禽流感病毒对鸭免疫器官的组织学影响[J]. 李静萍,盖晋宏,魏锁成,胡庆平. 西北民族大学学报(自然科学版). 2008(03)
博士论文
[1]H9N2亚型禽流感病毒气源性传染的监测及其分子机制的研究[D]. 吕静.山东农业大学 2012
[2]H9N2亚型禽流感病毒抗原变异及感染哺乳动物分子机制的研究[D]. 平继辉.南京农业大学 2008
[3]鹅细小病毒VP3基因与鹅白细胞介素-2基因分泌性融合表达载体的构建及在乳酸杆菌中表达的研究[D]. 丁轲.四川农业大学 2006
[4]不同源性禽流感病毒株的分离鉴定及其主要基因信息的研究[D]. 王伟利.吉林农业大学 2006
硕士论文
[1]H5N1亚型禽流感病毒NS1149位氨基酸对生物学功能的影响[D]. 王爱琴.内蒙古农业大学 2006
本文编号:3645567
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3645567.html