猪传染性胃肠炎生产毒种种用特性研究

发布时间：2022-07-03 19:34

　　猪传染性胃肠炎（Transmissible gastroenteritis of swine, TGE）是由传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis virus, TGEV）引起的一种急性的、高度接触性的胃肠道传染病。传染性胃肠炎病毒属于冠状病毒科（Coronaviridae）冠状病毒属（Coronavirus）成员,主要引起病猪发热、腹泻、呕吐、脱水等临床症状。尤其是2周龄内仔猪病死率可高达100%,造成巨大经济损失,而疫苗免疫接种是预防该病发生的最有效的方法。制备出稳定、纯净、可靠、安全的毒种可为疫苗的研发奠定基础。在本研究中,对本实验室2012年分离保存并命名的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）SC-T株种毒进行毒力测定、RT-PCR鉴定、热稳定试验、pH3.0值稳定试验、氯仿敏感性试验、病毒核酸类型鉴定试验、纯净性检测。PT-PCR鉴定结果表明：目的基因条带大小和预期目的基因条带大小相同,目的基因测序结果与TGEV基因序列相符。热稳定试验、pH3.0值稳定试验、氯仿敏感性试验表明：该种毒对高温敏感,在50℃以下活性稳定,随着温度升高病毒滴度降低,... 

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
1 文献综述
    1.1 猪传染性胃肠炎病毒研究概述
        1.1.1 病原特征
        1.1.2 流行特征
        1.1.3 致病机理
        1.1.4 临床症状
        1.1.5 病理变化
        1.1.6 诊断
        1.1.7 预防治疗
        1.1.8 分子生物学特征
    1.2 猪传染性胃肠炎病毒疫苗研究进展
        1.2.1 强毒疫苗
        1.2.2 灭活疫苗
        1.2.3 弱毒疫苗
        1.2.4 单位疫苗
        1.2.5 核酸疫苗
        1.2.6 重组活载体疫苗
        1.2.7 基因缺失疫苗
        1.2.8 转基因植物疫苗
2 材料
    2.1 材料
        2.1.1 细胞
        2.1.2 生产毒种
        2.1.3 检验毒种
        2.1.4 抗体
        2.1.5 引物
        2.1.6 主要试剂
        2.1.7 主要仪器
        2.1.8 实验动物
        2.1.9 cDNA材料
3 方法
    3.1 细胞的培养与保存
    3.2 细胞纯净检测
        3.2.1 细胞无菌检测
        3.2.2 细胞支原体污染检测
    3.3 TGEV SC-T株在ST细胞上的增殖培养与细胞病变观察
    3.4 种毒的鉴定
        3.4.1 种毒的毒力测定
        3.4.2 种毒的RT-PCR鉴定
        3.4.3 种毒的理化特性鉴定
        3.4.4 种毒的纯净检测
    3.5 基础种子批和生产种子批的建立
        3.5.1 毒种的繁殖
        3.5.2 毒种毒力测定
        3.5.3 种子批的建立
    3.6 基础种子、生产种子的鉴定
        3.6.1 基础种子、生产种子的毒力测定
        3.6.2 基础种子、生产种子的纯净检测
        3.6.3 免疫原性试验
        3.6.4 毒种特异性鉴定
        3.6.5 安全性试验
4 结果
    4.1 细胞的培养与保存的结果
    4.2 细胞纯净检测结果
        4.2.1 细胞无菌检测
        4.2.2 细胞支原体污染检测结果
    4.3 TGEV SC-T株在ST细胞上的增殖培养与细胞病变观察
    4.4 种毒的鉴定结果
        4.4.1 种毒的毒力测定结果
        4.4.2 种毒的RT-PCR鉴定
        4.4.3 种毒的理化特性鉴定结果
        4.4.4 种毒的纯净检测结果
    4.5 基础种子批和生产种子批的建立结果
        4.5.1 毒种的繁殖结果
        4.5.2 病毒毒力测定结果
        4.5.3 种子批的建立的结果
    4.6 基础种子、生产种子的鉴定结果
        4.6.1 基础种子、生产种子的毒力测定结果
        4.6.2 基础种子、生产种子的纯净检测结果
        4.6.3 免疫原性试验结果
        4.6.4 毒种特异性鉴定结果
        4.6.5 安全性试验结果
5. 讨论
    5.1 TGEV SC-T株种毒的增殖特性
    5.2 TGEV SC-T株种毒的理化特性
    5.3 TGEV SC-T株种毒的纯净检测
    5.4 TGEV SC-T株基础种子批、生产种子批的建立与鉴定
        5.4.1 基础种子批与生产种子批的建立
        5.4.2 基础种子批与生产种子批的鉴定
6 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]干酪乳杆菌表面展示表达TGEV-S抗原表位及其免疫原性分析[D]. 魏广丽.黑龙江八一农垦大学 2008



本文编号：3655517