瓜蒌水提物对小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎的保护作用和机制研究

发布时间：2022-07-20 12:38

　　奶牛乳腺炎是多种致病因素作用于奶牛乳腺组织所导致的疾病,其常见的致病因素包括病原微生物感染、化学性刺激、物理性损伤和饲养管理不当等。奶牛乳腺炎会导致产奶量及乳品质大幅度下降,给畜牧业的发展带来巨大的经济损失。金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）是导致奶牛乳腺炎的重要致病菌。金黄色葡萄球菌能反复感染乳腺组织,诱导乳腺炎症反应、细胞凋亡,并且释放的外毒素可引起全身症状,导致奶牛死亡^[1]。因此,针对金黄色葡萄球菌性乳腺炎的防治应该考虑抗炎,增强免疫系统的杀菌作用。瓜蒌牛蒡汤是临床应用于乳腺炎治疗的经典方剂,其主要成分为瓜蒌,近年来也有研究表明,瓜蒌子、瓜蒌果皮、瓜蒌果实等内部的某些成分有很好的抑菌、抗炎等效果^[2]。但是瓜蒌对乳腺炎的保护机制目前尚未见报道。据此,本实验以金黄色葡萄球菌诱导的小鼠乳腺炎为实验动物模型,探索瓜蒌水提物对乳腺炎的预防作用及分子机制,从而为临床筛选有效防治奶牛乳腺炎的药物提供理论基础。首先,将泌乳7天的雌鼠随机分为空白对照、S.aureus、S.aureus+瓜蒌水提物（0.25... 

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
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引言
第一篇 文献综述
    第一章 奶牛乳腺炎研究进展
        1.1 奶牛乳腺炎的发展及危害
        1.2 乳腺炎的病因及发病机制
            1.2.1 乳头创伤
            1.2.2 乳汁淤积
            1.2.3 病原微生物感染
            1.2.4 宿主自身原因
            1.2.5 其他因素
        1.3 乳腺炎的临床症状
        1.4 乳腺炎的临床诊断
        1.5 乳腺炎的预防
            1.5.1 饲养管理模式
            1.5.2 疫苗的研制
            1.5.3 营养补充
            1.5.4 卫生管理
            1.5.5 产前处理
        1.6 乳腺炎的治疗
            1.6.1 抗生素
            1.6.2 中草药
            1.6.3 其他疗法
    第二章 中药治疗乳腺炎及瓜蒌药理作用
        2.1 中医对乳腺炎致病机理的解读
        2.2 中医对乳腺炎的治疗
        2.3 中药治疗乳腺炎的机制
            2.3.1 补气益血
            2.3.2 活血化瘀
            2.3.3 消炎抑菌
        2.4 瓜蒌的药理作用
            2.4.1 消炎抑菌
            2.4.2 改善心血管系统
            2.4.3 抗癌作用
        2.5 总结
第二篇 研究内容
    第一章 瓜蒌水提物对小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎的保护作用
        1.1 材料与方法
            1.1.1 实验动物
            1.1.2 试验菌株
            1.1.3 仪器设备
            1.1.4 实验试剂
            1.1.5 试剂配制
            1.1.6 瓜蒌水提物制备和分析
            1.1.7 ELISA试剂配制
            1.1.8 SDS-PAGE电泳相关试剂
        1.2 试验方法
            1.2.1 实验分组
            1.2.2 建立实验模型
            1.2.3 小鼠乳腺炎模型评估
            1.2.4 小鼠乳腺组织病理组织学检测
            1.2.5 小鼠乳腺组织的髓过氧化物酶(MPO)检测
            1.2.6 小鼠乳腺组织炎性细胞因子测定
            1.2.7 Western blot检测NF-κB信号通路的蛋白表达
            1.2.8 数据分析
        1.3 实验结果
            1.3.1 小鼠乳腺炎模型评估
            1.3.2 瓜蒌水提物的液相质谱分析结果
            1.3.4 瓜蒌水提物对金黄色葡萄球菌诱导的小鼠乳腺组织的MPO活性影响
            1.3.5 瓜蒌水提物对金黄色葡萄球菌诱导的小鼠乳腺组织炎性细胞因子表达的影响
            1.3.6 瓜蒌水提物对小鼠乳腺组织NF-κB信号通路的蛋白表达的影响
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 瓜蒌水提物对金黄色葡萄球菌感染的小鼠乳腺上皮细胞的保护作用及机制
        2.1 材料和方法
            2.1.1 实验动物
            2.1.2 仪器设备
            2.1.3 试剂
        2.2 试验方法
            2.2.1 小鼠乳腺上皮细胞的提取
            2.2.2 MTT法检测瓜蒌水提物对小鼠乳腺上皮细胞活性的影响
            2.2.3 ELISA方法检测炎性细胞因子IL-1β和 TNF-α的表达
            2.2.4 Western blot检测瓜蒌水提物对TLR2及NF-κB信号通路的蛋白表达
        2.3 实验结果
            2.3.1 瓜蒌水提物对小鼠乳腺上皮细胞毒性检测
            2.3.2 瓜蒌水提物对金黄色葡萄球菌诱导的小鼠乳腺上皮细胞炎性细胞因子表达的影响
            2.3.3 瓜蒌水提物对金黄色葡萄球菌诱导的小鼠乳腺上皮细胞NF-κB信号通路的影响
            2.3.4 瓜蒌水提物对TLR2信号通路的影响
        2.4 讨论
        2.5 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介
在学期间所取得的科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]中草药治疗奶牛乳房炎研究进展[J]. 郭玮,周海柱.  畜禽业. 2019(12)
[2]中药黄芪的药理及临床应用价值分析[J]. 胡光星,张焕峰.  临床医药文献电子杂志. 2019(93)
[3]瓜蒌皮中脂肪酸类成分的鉴定及其抗炎活性研究[J]. 左翠霞,柏自松,李楠,刘媛媛,李琳,邸晶蕊,张鹏.  中药材. 2019(09)
[4]奶牛隐性乳房炎诊断技术研究进展[J]. 阮瑞宝.  中国动物保健. 2019(01)
[5]中草药治疗奶牛隐性乳房炎的研究进展[J]. 岳碧娥,孙飞飞.  饲料博览. 2018(08)
[6]瓜蒌化学成分及药用价值的研究综述[J]. 刘明,李慧,李陈跟,陈德宇.  阜阳师范学院学报(自然科学版). 2018(01)
[7]制川乌与瓜蒌相反配伍对慢性心衰大鼠血流动力学及其机制研究[J]. 王楚盈,张超,张琦,李玉梅,张大方.  中药新药与临床药理. 2013(01)
[8]天花粉多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其Caspase-3和Caspase-8活化对凋亡的影响[J]. 曹丽莉,徐妍,徐水凌,金梦媚,沈超.  浙江大学学报(医学版). 2012(05)
[9]瓜蒌含药血清对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响[J]. 周艳芬,田景贤,靳祎,倪志华,张瑞英,朱宝成.  时珍国医国药. 2011(09)
[10]天花粉多糖促人外周血单个核细胞增殖和对人乳腺癌细胞人子宫颈癌细胞的生长抑制作用[J]. 赵桂珠,朱逢佳,徐水凌,曹丽莉,唐文稳.  时珍国医国药. 2011(09)

硕士论文
[1]常用外用中草药中离子成分含量测定的实验研究[D]. 代颖.山西大学 2007
[2]中药注射液的筛选及其对奶牛乳房炎的防治作用[D]. 崔一喆.东北农业大学 2006



本文编号：3664018