Ala-Gln对断奶仔猪体液免疫及肠黏膜细胞免疫的调控作用

发布时间：2022-07-20 15:22

　　本研究以21日龄早期断奶仔猪为试验对象，研究了Ala-Gln对仔猪体液免疫及肠黏膜细胞免疫的调节作用，并以仔猪小肠上皮细胞（IPEC-1）为模型探讨了Ala-Gln对仔猪小肠上皮细胞增殖与凋亡的调控机制。试验一：Ala-Gln对断奶仔猪外周血细胞因子、免疫器官细胞因子及T淋巴细胞亚群的调节作用本试验采用单因子试验设计，选用遗传背景和体重相近（6.7±0.9kg）、21±2日龄断奶的长白×大白去势仔猪100头，按完全随机区组设计分为4处理，每个处理设5个重复，每个重复5头仔猪。各处理仔猪饲粮为在基础饲粮基础上分别添加0%、0.15%、0.30%和0.45%Ala-Gln。试验期为21d。于试验第7、14、21d从每个重复随机选取1头接近平均体重的仔猪进行前腔静脉采血并屠宰。采集外周血液及免疫器官用于测定细胞因子含量和外周T淋巴细胞亚群分布表达以探讨Ala-Gln对断奶仔猪体液免疫的影响。结果显示，（1）饲粮中添加0.15%、0.30%Ala-Gln提高了仔猪断奶后第7d血液中ALB、TP、免疫球蛋白IgA、IgG的含量（P<0.05），降低了COR的含量（P<0.05）；0.... 

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩写词表
第一章 文献综述
    1 研究的目的与意义
    2 国内外研究现状
        2.1 仔猪的免疫机制
            2.1.1 仔猪肠道黏膜免疫
            2.1.2 肠道黏膜屏障功能
                2.1.2.1 分泌型免疫球蛋白 A
                2.1.2.2 小肠上皮细胞
        2.2 早期断奶对仔猪免疫机能的影响
            2.2.1 早期断奶对仔猪免疫系统发育的影响
            2.2.2 早期断奶对仔猪肠道黏膜免疫的影响
            2.2.3 早期断奶对仔猪体液免疫和细胞免疫的影响
        2.3 Gln 及其二肽对断奶仔猪免疫机能影响的研究进展
            2.3.1 Gln 及其二肽对断奶仔猪血液中免疫分子的影响
            2.3.2 Gln 及其二肽对断奶仔猪肠道免疫的影响
            2.3.3 Gln 及其二肽对断奶仔猪细胞因子的影响
    3 技术路线
第二章 试验研究
    试验一 Ala-Gln 对断奶仔猪外周血细胞因子、免疫器官细胞因子及 T 淋巴细胞亚群的调节作用
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 试验材料
            1.2 试验动物和分组
            1.3 试验日粮
            1.4 饲养管理
            1.5 样品采集及预处理
            1.6 测定指标与方法
                1.6.1 血清生化指标
                1.6.2 血清中免疫球蛋白
                1.6.3 血清中细胞因子
                1.6.4 免疫器官指数及其细胞因子
                    1.6.4.1 免疫器官指数
                    1.6.4.2 免疫器官细胞因子
                1.6.5 外周血 T 淋巴细胞亚群的数量
        2 数据处理与统计分析
        3 结果与分析
            3.1 饲粮不同水平的 Ala-Gln 对断奶仔猪血液生化指标的影响
            3.2 饲粮不同水平的 Ala-Gln 对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影响
            3.3 饲粮不同水平的 Ala-Gln 对断奶仔猪血清细胞因子的影响
            3.4 饲粮不同水平的 Ala-Gln 对断奶仔猪免疫器官指数及其细胞因子含量的影响
            3.5 饲粮不同水平的 Ala-Gln 对断奶仔猪外周血液 T 淋巴细胞亚群数量的影响
        4 讨论
            4.1 Ala-Gln 对断奶仔猪血液生化指标的影响
            4.2 Ala-Gln 对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影响
            4.3 Ala-Gln 对断奶仔猪血清和免疫器官细胞因子的影响
            4.4 Ala-Gln 对断奶仔猪外周血液 T 淋巴细胞亚群数量的影响
    试验二 Ala-Gln 对断奶仔猪小肠黏膜固有层 SIgA 浆细胞数量、SIgA 及黏膜中细胞因子含量的影响
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 试验材料
            1.2 试验分组及日粮
            1.3 样品采集及预处理
            1.4 测定指标及方法
                1.4.1 小肠黏膜固有层 SIgA 浆细胞数量
                    1.4.1.1 常规切片操作
                    1.4.1.2 羊抗猪 SIgA 抗体
                    1.4.1.3 小肠 SIgA 浆细胞的数量
                1.4.2 小肠黏膜 SIgA 含量
                1.4.3 小肠黏膜细胞因子含量
        2 数据处理与统计分析
        3 结果与分析
            3.1 饲粮不同水平的 Ala-Gln 对断奶仔猪小肠固有层 SIgA 浆细胞数量的影响
            3.2 饲粮不同水平的 Ala-Gln 对断奶仔猪空肠黏膜中 SIgA 含量的影响
            3.3 饲粮不同水平的 Ala-Gln 对断奶仔猪小肠黏膜细胞因子的影响
        4 讨论
            4.1 Ala-Gln 对断奶仔猪小肠固有层 SIgA 浆细胞分布及 SIgA 分泌量的影响
            4.2 Ala-Gln 对断奶仔猪小肠黏膜中细胞因子的影响
    试验三 Ala-Gln 对仔猪小肠上皮细胞凋亡的影响
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 主要试剂
            1.2 主要仪器设备
            1.3 试验方法
                1.3.1 基础培养液
                1.3.2 试验细胞
                1.3.3 细胞的培养
                1.3.4 IPEC-1 细胞凋亡率检测
                1.3.5 Caspase-3 激活产物和 Bcl-2 的表达量测定
                    1.3.5.1 SDS-PAGE 缓冲液
                    1.3.5.2 膜蛋白的提取与处理
                    1.3.5.3 目的蛋白电泳及 Western-blot
        2 数据处理与统计分析
        3 结果与分析
            3.1 Ala-Gln 对仔猪小肠上皮细胞凋亡的影响
            3.2 Ala-Gln 对仔猪小肠上皮细胞凋亡相关蛋白表达的影响
        4 讨论
第三章 本研究的总体结论、创新点及有待进一步解决的问题
    1 总体结论
    2 创新点
    3 有待进一步解决的问题
参考文献
致谢
附图


【参考文献】：
期刊论文
[1]谷氨酰胺二肽调节断奶仔猪生长性能的研究进展[J]. 余珊珊.  畜牧与饲料科学. 2011(04)
[2]仔猪免疫系统的建立及早期断奶对仔猪免疫功能的影响研究[J]. 陈静,刘显军,边连全,朴钟云.  吉林农业科学. 2011(01)
[3]丙氨酰谷氨酰胺二肽对早期断奶仔猪抗氧化能力及肠道保护的研究[J]. 陈恒灿,马黎,陈克嶙,谭丽勤,袁雪波,郭荣富.  畜牧兽医学报. 2011(02)
[4]丙氨酰谷氨酰胺二肽对哺乳仔猪生长性能、小肠形态学和血清生化指标的影响[J]. 袁雪波,马黎,陈克嶙,谭丽勤,陈恒灿,郭荣富.  动物营养学报. 2011(01)
[5]丙氨酰-谷氨酰胺双肽对外科危重患者术后免疫功能的临床研究[J]. 叶吉云,黄洁,田大广,张捷.  昆明医学院学报. 2010(06)
[6]丙氨酰谷氨酰胺对胃肠道肿瘤患者术后营养及免疫功能的影响[J]. 揭志刚,李伟,李正荣,刘逸,谢小平.  中华普通外科学文献(电子版). 2010(02)
[7]不同日龄断奶应激对仔猪血液生化和免疫指标的影响[J]. 冷静,朱仁俊.  安徽农业科学. 2010(04)
[8]肠道黏膜免疫屏障及其菌群与机体健康关系的研究进展[J]. 李伟,陈庆森.  食品科学. 2008(10)
[9]早期丙氨酰谷氨酰胺强化营养对危重病患者热休克蛋白及炎症因子表达的影响[J]. 张铮,秦海东,倪海滨,徐英,吴海荣.  江苏医药. 2008(02)
[10]谷氨酰胺二肽对断奶仔猪生长、免疫、抗氧化力和小肠粘膜形态的影响[J]. 席鹏彬,林映才,蒋宗勇,郑春田,朱选.  动物营养学报. 2007(02)

博士论文
[1]屎肠球菌EF1对仔猪小肠黏膜屏障功能的影响[D]. 黄怡.浙江大学 2012
[2]早期断奶仔猪肠上皮细胞氧化与损伤及二氢杨梅素对其调控作用[D]. 杨家军.中国农业科学院 2012
[3]谷氨酰胺对早期断奶仔猪肠道营养与免疫功能影响机理的研究[D]. 刘涛.华中农业大学 2002

硕士论文
[1]Ala-Gln对断奶仔猪小肠黏膜屏障功能和吸收功能的调控作用[D]. 邓宸玺.江西农业大学 2013



本文编号：3664238