鸡胚胎干细胞的分离培养与鉴定

发布时间：2022-08-12 16:10

　　利用胰蛋白酶消化法从X期鸡胚中分离胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）,以鸡胚成纤维细胞为滋养层,进行体外培养,采用形态法和标志分子检测对获得的干细胞进行鉴定。结果显示,获得典型的呈巢状或岛状的鸡胚胎干细胞（chicken embryonic stem cells,cESCs）克隆,细胞碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）染色呈蓝紫色,表明具有较高的内源性AKP活性;胚胎阶段特异性表面抗原SSEA-1（stage specific embryonic antigen 1,SSEA-1）鉴定结果呈阳性,显示cESCs克隆具有多能性。本试验成功分离出cESCs,可体外培养并保持未分化状态及多能性。 

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验材料
    1.2 试验试剂
    1.3 CEF饲养层的制备
    1.4 胚盘细胞分离
    1.5 cESCs的传代及体外培养
    1.6 cESCs的鉴定
        1.6.1 碱性磷酸酶活性鉴定
        1.6.2 SSEA-1鉴定
2 结果
    2.1 cESCs的分离培养
    1.2 cESCs的鉴定
        1.2.1 AKP染色
        1.2.2 SSEA-1鉴定
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[2]鸡胚胎干细胞的体外培养和鉴定[J]. 何文俊,刘红,叶玲玲,李世崇,王启伟,陈昭烈.  生物技术通报. 2013(07)
[3]鸡胚胎干细胞分离方法和培养体系的优化[J]. 张曼玉,陈志胜,计慧琴,陈胜峰,刘本杰,邓衔柏,王丙云,袁立,江青艳.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(45)
[4]鸡胚胎干细胞分离培养和单细胞克隆的制备[J]. 吴信生,何先红,戴建明,田智泉,杨海燕,徐琪,李碧春.  中国家禽. 2008(22)
[5]鸡胚胎干细胞的分离和培养[J]. 戴建明,何先红,赵文明,吴信生,李碧春.  中国畜牧杂志. 2007(19)
[6]畜禽胚胎干细胞的研究进展[J]. 郝小静,杜立新,孙允东,周琳.  当代畜牧. 2002(03)



本文编号：3676189