上海地区犬细小病毒病流行情况调查与病毒的分离鉴定

发布时间：2022-08-13 16:08

　　为了解犬细小病毒病在上海地区各类犬中的流行与病毒遗传变异情况,在全市范围内对流浪犬和家养犬进行了犬细小病毒的集中监测。分别采集家养犬和流浪犬粪便样品121份与675份,通过荧光定量PCR检测病毒DNA,阳性率分别为9.10%和34.52%。将阳性病料处理后接种至猫肾传代细胞（F81）,成功分离到4株犬细小病毒,对4株犬细小病毒的VP2基因测序,并结合GenBank中的相关序列进行遗传演化分析,确定了这4株犬细小病毒分别属于2c和2b亚型。选取了2c亚型犬细小病毒对其进行持续传代,至其细胞病变与病毒增殖效率逐渐稳定,将其纯化后测定TCID₅₀,通过电镜对病毒形态进行观察。结果表明,纯化后的病毒在电镜下观察呈现二十面体立体对称,无囊膜,直径20 nm左右,为典型细小病毒样粒子,病毒滴度为10^7.0 TCID₅₀/mL。本研究结果为上海地区犬细小病毒病防控提供了依据。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 病料采集与处理
    1.2 细胞系
    1.3 主要试剂
    1.4 犬细小病毒的检测
        1.4.1 核酸提取
        1.4.2 荧光定量PCR
    1.5 病毒的分离与鉴定
        1.5.1 病毒的分离
        1.5.2 病毒的鉴定
    1.6 基因片段的cDNA克隆、鉴定和测序
    1.7 绘制系统发育树
2 结果
    2.1 上海地区犬细小病毒病流行情况
    2.2 病毒分离和细胞病变
    2.3 病毒形态
    2.4 绘制系统发育树以及氨基酸序列分析比较
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]浅述犬细小病毒病的临床症状及防治[J]. 崔平,刘晓萌.  现代畜牧科技. 2018(11)
[2]犬细小病毒敦化株的分离与鉴定[J]. 任谓明,孙铭,叶明,赵丹.  中国兽医杂志. 2017(09)
[3]犬细小病毒性肠炎的临床症状、诊断与防控措施[J]. 孙丰兰.  现代畜牧科技. 2017(04)
[4]犬细小病毒病的临床症状和防治体会[J]. 李文莉.  畜禽业. 2016(11)
[5]犬细小病毒SH14株的分离鉴定及其VP2基因的序列分析[J]. 唐井玉,李传峰,戚伟强,贾仿阔,陈宗艳,王权,王桂军,刘光清.  中国兽医科学. 2015(11)
[6]中国国内首次检测到犬细小病毒CPV-2c[J]. 张仁舟,杨松涛,冯昊,崔苌盛,夏咸柱.  中国病原生物学杂志. 2010(04)
[7]犬细小病毒病的病理学观察[J]. 孙艳芳,扎西英派,辛国省,贾宁.  动物医学进展. 2007(06)

硕士论文
[1]2014-2015年上海地区犬细小病毒分离鉴定及基因分型[D]. 唐井玉.安徽农业大学 2016
[2]犬细小病毒的分离鉴定及动物感染模型的建立[D]. 王珊.吉林大学 2012



本文编号：3677345