亚硒酸钠对脱氧雪腐镰刀菌烯醇致GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞氧化损伤的保护作用
发布时间：2022-09-18 19:08
脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol,DON）在饲料、饲料原料中的污染严重。DON可作用于免疫系统,其能引起免疫细胞的氧化损伤。硒有着抗氧化的功能。本研究使用RNAi技术建立GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞,通过单独/联合添加脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）、亚硒酸钠（Na2SeO3）,探究DON致GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞氧化损伤作用,Na2SeO3对DON致GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞氧化损伤的保护作用进而探究硒是否是通过硒蛋白GPx1拮抗DON毒性。方法:（1）GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞的建立:应用RNAi、流式细胞术、qPCR和Western Blot技术建立GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞。（2）抗氧化指标的检测:试验分为11组,分别为D1（DON 824 ng/mL）,D2（DON 412 ng/mL）,D3（DON206 ng/mL）,D4（DON 103 ng/mL）,S（Na2SeO3 2μmol/L）,SD1（Na2
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写词
第一章 文献综述
1.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒性及其机制研究进展
1.1.1 DON的理化性质
1.1.2 DON的污染情况
1.1.3 DON诱导的氧化应激及机制
1.1.4 DON对脾脏的损伤
1.2 硒的抗氧化作用
1.2.1 微量元素硒的概述及硒的抗氧化作用
1.2.2 硒蛋白GPx1的抗氧化作用
1.2.3 添加硒对细胞或机体内的硒蛋白GPx1的影响
1.3 RNA干扰技术及其应用
1.4 研究目的意义
第二章 体外GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞的建立
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 主要仪器
2.1.3 主要试剂
2.2 试验方法
2.2.1 猪脾脏淋巴细胞悬液制备
2.2.2 GPx1敲低型猪脾淋巴细胞的建立
2.3 试验结果
2.3.1 GPx1-siRNA在猪脾脏淋巴细胞中的转染效率
2.3.2 GPx1mRNA相对表达量检测
2.3.3 GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞中GPx1蛋白的表达
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对猪脾脏淋巴细胞GPx1敲低模型抗氧化功能的影响
3.1 试验材料
3.1.1 试验模型
3.1.2 主要仪器
3.1.3 主要试剂
3.2 试验方法
3.2.1 样品分组及处理
3.2.2 检测指标及方法
3.3 数据分析
3.4 试验结果
3.4.1 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞H_2O_2含量的影响
3.4.2 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞MDA含量的影响
3.4.3 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞SOD活性的影响
3.4.4 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞CAT活性的影响
3.4.5 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞GSH含量的影响
3.4.6 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞T-AOC的影响
3.4.7 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞抑制羟自由基能力的影响
3.4.8 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞ROS含量的影响
3.5 讨论
3.5.1 敲低GPx1对猪脾脏淋巴细胞抗氧化功能的影响
3.5.2 DON对GPx1敲低型淋巴细胞的氧化损伤及抗氧化功能的影响
3.5.3 Na_2SeO_3对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞自身氧化损伤的保护作用
3.5.4 Na_2SeO_3对DON致GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞氧化损伤的抑制作用
3.6 小结
全文结论
参考文献
致谢
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]ROS介导的氧化应激与自噬[J]. 高婷,王子旭,陈祝茗,曹静,董玉兰,董彦君,陈耀星. 中国畜牧兽医. 2018(03)
[2]真菌毒素DON和ZEN的体外联合毒性评价[J]. 徐慧,石慧,张银志,孙秀兰,纪剑,张入元. 食品工业科技. 2017(23)
[3]2017年上半年我国部分地区饲料及饲料原料中霉菌毒素的污染状况分析[J]. 刘凤芝,李锋,王永丽. 粮食与饲料工业. 2017(11)
[4]GPX1在结直肠癌组织中的表达及其对癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响[J]. 陈文彬,钟文洲. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2017(09)
[5]脱氧雪腐镰刀菌烯醇与玉米赤霉烯酮联合暴露对体外培养鸡脾脏淋巴细胞内环境稳态的影响[J]. 任志华,王亚超,邓俊良. 动物营养学报. 2017(08)
[6]2016年山东省饲料原料及配合饲料霉菌毒素污染状况调查[J]. 朱风华,陈甫,刘文华,徐进栋,朱连勤. 中国畜牧杂志. 2017(06)
[7]氟对小鼠睾丸谷胱甘肽抗氧化系统的影响[J]. 李素娟,邢艳刚,薛星晨,张玉良,于宇翔,赵阳飞,牛瑞燕,孙子龙. 畜牧兽医学报. 2017(05)
[8]陕西省120份市售玉米及其制品中真菌毒素的污染状况调查[J]. 胡佳薇,田丽,王敏娟,王彩霞,郭蓉,乔海鸥. 现代预防医学. 2017(09)
[9]2016年山东省主要家禽饲料中AFB1、DON和ZEN污染情况调查及风险评估[J]. 陈甫,朱风华,朱连勤. 中国家禽. 2017(09)
[10]植物乳杆菌JM113的体外抗氧化能力及其对采食脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染饲粮的肉仔鸡保护作用[J]. 阮栋. 广东饲料. 2017(03)
博士论文
[1]霉菌毒素DON、ZEA及其联合染毒对体外培养鸡脾脏淋巴细胞凋亡的分子机制研究[D]. 王亚超.四川农业大学 2012
[2]硒和Vc对Triol导致血管平滑肌细胞损伤的保护作用及其机理[D]. 汤蓉.华中科技大学 2005
[3]硒的化学形态与生物形态分析的新技术与新方法[D]. 徐芳.复旦大学 2003
硕士论文
[1]SPF雏鸡感染REV后免疫器官氧化—抗氧化功能的变化[D]. 张美曦.东北农业大学 2017
[2]DON、ZEA联合染毒对体外培养猪脾脏淋巴细胞凋亡及氧化损伤的研究[D]. 梁珍.四川农业大学 2016
[3]亚硒酸钠对脱氧雪腐镰刀菌烯醇致体外培养猪脾脏淋巴细胞氧化损伤的保护作用研究[D]. 赵传平.四川农业大学 2016
[4]硒对大鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎抗氧化损伤作用的研究[D]. 张军.扬州大学 2015
[5]ZEA、DON及联合染毒对小鼠体液免疫及抗氧化功能影响的研究[D]. 周锐.四川农业大学 2014
[6]CAT和GPX1过表达对人支气管上皮细胞辐射致癌模型DNA氧化损伤和恶性表型的影响[D]. 魏志权.中国疾病预防控制中心 2013
[7]镰刀菌毒素ZEA、DON及其联合染毒对小鼠脑损伤机制的研究[D]. 李洋.四川农业大学 2013
[8]日粮不同硒水平对生长肉兔生长性能、抗氧化、血液生化指标及肝脏GPx1mRNA表达量的影响[D]. 张艳艳.山东农业大学 2010
[9]氧化应激在脱氧雪腐镰刀菌烯醇致HepG2细胞DNA损伤中的作用[D]. 张晓欧.大连医科大学 2009
[10]谷胱甘肽和硒的反应机理研究[D]. 金花.延边大学 2006
本文编号：3680260
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写词
第一章 文献综述
1.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒性及其机制研究进展
1.1.1 DON的理化性质
1.1.2 DON的污染情况
1.1.3 DON诱导的氧化应激及机制
1.1.4 DON对脾脏的损伤
1.2 硒的抗氧化作用
1.2.1 微量元素硒的概述及硒的抗氧化作用
1.2.2 硒蛋白GPx1的抗氧化作用
1.2.3 添加硒对细胞或机体内的硒蛋白GPx1的影响
1.3 RNA干扰技术及其应用
1.4 研究目的意义
第二章 体外GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞的建立
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 主要仪器
2.1.3 主要试剂
2.2 试验方法
2.2.1 猪脾脏淋巴细胞悬液制备
2.2.2 GPx1敲低型猪脾淋巴细胞的建立
2.3 试验结果
2.3.1 GPx1-siRNA在猪脾脏淋巴细胞中的转染效率
2.3.2 GPx1mRNA相对表达量检测
2.3.3 GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞中GPx1蛋白的表达
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对猪脾脏淋巴细胞GPx1敲低模型抗氧化功能的影响
3.1 试验材料
3.1.1 试验模型
3.1.2 主要仪器
3.1.3 主要试剂
3.2 试验方法
3.2.1 样品分组及处理
3.2.2 检测指标及方法
3.3 数据分析
3.4 试验结果
3.4.1 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞H_2O_2含量的影响
3.4.2 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞MDA含量的影响
3.4.3 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞SOD活性的影响
3.4.4 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞CAT活性的影响
3.4.5 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞GSH含量的影响
3.4.6 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞T-AOC的影响
3.4.7 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞抑制羟自由基能力的影响
3.4.8 DON及Na_2SeO_3单独或联合作用对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞ROS含量的影响
3.5 讨论
3.5.1 敲低GPx1对猪脾脏淋巴细胞抗氧化功能的影响
3.5.2 DON对GPx1敲低型淋巴细胞的氧化损伤及抗氧化功能的影响
3.5.3 Na_2SeO_3对GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞自身氧化损伤的保护作用
3.5.4 Na_2SeO_3对DON致GPx1敲低型猪脾脏淋巴细胞氧化损伤的抑制作用
3.6 小结
全文结论
参考文献
致谢
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]ROS介导的氧化应激与自噬[J]. 高婷,王子旭,陈祝茗,曹静,董玉兰,董彦君,陈耀星. 中国畜牧兽医. 2018(03)
[2]真菌毒素DON和ZEN的体外联合毒性评价[J]. 徐慧,石慧,张银志,孙秀兰,纪剑,张入元. 食品工业科技. 2017(23)
[3]2017年上半年我国部分地区饲料及饲料原料中霉菌毒素的污染状况分析[J]. 刘凤芝,李锋,王永丽. 粮食与饲料工业. 2017(11)
[4]GPX1在结直肠癌组织中的表达及其对癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响[J]. 陈文彬,钟文洲. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2017(09)
[5]脱氧雪腐镰刀菌烯醇与玉米赤霉烯酮联合暴露对体外培养鸡脾脏淋巴细胞内环境稳态的影响[J]. 任志华,王亚超,邓俊良. 动物营养学报. 2017(08)
[6]2016年山东省饲料原料及配合饲料霉菌毒素污染状况调查[J]. 朱风华,陈甫,刘文华,徐进栋,朱连勤. 中国畜牧杂志. 2017(06)
[7]氟对小鼠睾丸谷胱甘肽抗氧化系统的影响[J]. 李素娟,邢艳刚,薛星晨,张玉良,于宇翔,赵阳飞,牛瑞燕,孙子龙. 畜牧兽医学报. 2017(05)
[8]陕西省120份市售玉米及其制品中真菌毒素的污染状况调查[J]. 胡佳薇,田丽,王敏娟,王彩霞,郭蓉,乔海鸥. 现代预防医学. 2017(09)
[9]2016年山东省主要家禽饲料中AFB1、DON和ZEN污染情况调查及风险评估[J]. 陈甫,朱风华,朱连勤. 中国家禽. 2017(09)
[10]植物乳杆菌JM113的体外抗氧化能力及其对采食脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染饲粮的肉仔鸡保护作用[J]. 阮栋. 广东饲料. 2017(03)
博士论文
[1]霉菌毒素DON、ZEA及其联合染毒对体外培养鸡脾脏淋巴细胞凋亡的分子机制研究[D]. 王亚超.四川农业大学 2012
[2]硒和Vc对Triol导致血管平滑肌细胞损伤的保护作用及其机理[D]. 汤蓉.华中科技大学 2005
[3]硒的化学形态与生物形态分析的新技术与新方法[D]. 徐芳.复旦大学 2003
硕士论文
[1]SPF雏鸡感染REV后免疫器官氧化—抗氧化功能的变化[D]. 张美曦.东北农业大学 2017
[2]DON、ZEA联合染毒对体外培养猪脾脏淋巴细胞凋亡及氧化损伤的研究[D]. 梁珍.四川农业大学 2016
[3]亚硒酸钠对脱氧雪腐镰刀菌烯醇致体外培养猪脾脏淋巴细胞氧化损伤的保护作用研究[D]. 赵传平.四川农业大学 2016
[4]硒对大鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎抗氧化损伤作用的研究[D]. 张军.扬州大学 2015
[5]ZEA、DON及联合染毒对小鼠体液免疫及抗氧化功能影响的研究[D]. 周锐.四川农业大学 2014
[6]CAT和GPX1过表达对人支气管上皮细胞辐射致癌模型DNA氧化损伤和恶性表型的影响[D]. 魏志权.中国疾病预防控制中心 2013
[7]镰刀菌毒素ZEA、DON及其联合染毒对小鼠脑损伤机制的研究[D]. 李洋.四川农业大学 2013
[8]日粮不同硒水平对生长肉兔生长性能、抗氧化、血液生化指标及肝脏GPx1mRNA表达量的影响[D]. 张艳艳.山东农业大学 2010
[9]氧化应激在脱氧雪腐镰刀菌烯醇致HepG2细胞DNA损伤中的作用[D]. 张晓欧.大连医科大学 2009
[10]谷胱甘肽和硒的反应机理研究[D]. 金花.延边大学 2006
本文编号：3680260
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