蒙古马精液冷冻保存的研究

发布时间：2022-09-30 16:34

　　蒙古马是世界上古老的品种,也是优秀的地方品种。通过冷冻精液人工授精技术可以加快蒙古马提纯复壮及提高本品种选育进程。由于农业机械化的推进及国内对马繁殖技术关注度的下降,目前还没有人对蒙古马精子的冷冻保存方法进行过系统的研究,仍未探索到一种成熟有效并可推广到生产实践中的冷冻保存技术程序。为了研究出在实际生产中能够推广应用的蒙古马精液冷冻保存方法,进一步完善蒙古马冷冻精液品质,本研究对蒙古马精液冷冻程序及冷冻保护液配方的进行了优化,同时,使用最优冷冻保护液配方和冷冻保护程序对蒙古马精液进行了冷冻,并开展了人工授精受胎率验证试验,其结果如下:（1）将蒙古马精子置于不同渗透压（30、50、100、200、240、300、360、420、480、550、600mOsm/kg）的盐水溶液中孵育后,测定其前进运动精子百分比（PM）和精子质膜完整率（MI）。结果显示,蒙古马精子渗透压耐受范围为200～400mOsm/kg,从此渗透压再回到等渗状态时,其活力是可以恢复的,而渗透压超出这一范围其活力恢复能力降低。2)比较了沉降离心法之不同离心力和离心时间（400 g,15 min;600 g,10 min;... 

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
缩略语表
引言
1 文献综述
    1.1 马精液冷冻保存的研究进展
    1.2 马精液冷冻保存中存在的问题
    1.3 AI在国内外的使用状况
    1.4 AI使用效率低下的原因
    1.5 马精液冷冻保存损伤机制
        1.5.1 机械损伤
        1.5.2 氧化损伤
    1.6 影响马精液冷冻保存质量的因素
        1.6.1 外观
        1.6.2 精液量
        1.6.3 精液密度
        1.6.4 精清
        1.6.5 离心
        1.6.6 渗透压
        1.6.7 降温速率
        1.6.8 平衡时间
        1.6.9 解冻程序
    1.7 马精液冷冻保存液的主要成分
        1.7.1 冷冻保护剂
        1.7.2 卵黄
        1.7.3 糖类
        1.7.4 抗氧化剂
    1.8 马精液品质常用测定指标
        1.8.1 精子活率
        1.8.2 精子形态
        1.8.3 顶体完整率
        1.8.4 质膜完整率
        1.8.5 线粒体膜电位
        1.8.6 抗氧化能力
2 蒙古马细管精液冷冻程序的优化研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 马冷冻精液的制作
        2.1.4 试验设计
        2.1.5 精子质量评价
        2.1.6 数据统计与分析
    2.2 结果
        2.2.1 渗透压对蒙古马精液冷冻保存效果的影响
        2.2.2 不同离心方法去除精清对蒙古马精液冷冻质量及精子损失率的影响
        2.2.3 不同平衡时间对蒙古马精液冷冻保存效果的影响
        2.2.4 不同降温速率对蒙古马精液冷冻保存效果的影响
    2.3 讨论
        2.3.1 渗透压对蒙古马精液冷冻保存效果的影响
        2.3.2 不同离心方法去除精清对蒙古马精液冷冻质量及精子损失率的影响
        2.3.3 不同平衡时间对蒙古马精液冷冻保存效果的影响
        2.3.4 不同降温速率对蒙古马精液冷冻保存效果的影响
    2.4 结论
3 冷冻保护液不同成分对蒙古马细管精液冷冻效果的研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验动物的选择
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 马冷冻精液的制作
        3.1.4 试验设计
        3.1.5 精子质量评价
        3.1.6 数据统计分析
    3.2 结果
        3.2.1 不同浓度gly和DMF对马精子冷冻效果的影响
        3.2.2 不同浓度卵黄、LDL对蒙古马精子低温保存及冷冻效果的影响
        3.2.3 不同糖类组合对马精子低温保存效果的影响
    3.3 讨论
        3.3.1 不同浓度gly和DMF对马精子冷冻效果的影响
        3.3.2 不同浓度卵黄、LDL对蒙古马精子低温保存及冷冻效果的影响
        3.3.3 不同糖类组合对马精子低温保存效果的影响
    3.4 结论
4 不同抗氧化剂对蒙古马精液品质的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 试验动物的选择
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 马冷冻精液的制作
        4.1.4 试验设计
        4.1.5 精子质量评价
        4.1.6 统计分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 不同抗氧化剂对冷冻-解冻后马精子质量的影响
        4.2.2 不同抗氧化剂对蒙古马精液中抗氧化相关指标的影响
    4.3 讨论
    4.4 结论
5 蒙古马细管精液冷冻保护液的验证
    5.1 材料与方法
        5.1.1 试验动物的选择
        5.1.2 稀释液的制备
        5.1.3 精液的采集
        5.1.4 精液的处理
        5.1.5 精液的冷冻及解冻
        5.1.6 试验设计
        5.1.7 母马的管理和人工授精
        5.1.8 数据统计分析
    5.2 结果
        5.2.1 冻后活力均值
        5.2.2 受胎率验证
    5.3 讨论
        5.3.1 输精方法对受胎率的影响
        5.3.2 不同种公马精液对受胎率的影响
        5.3.3 不同精子活力对受胎率的影响
    5.4 小结
6 结论
7 研究创新点
致谢
附录
作者简介
参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]Sperm pretreatment with glutathione improves IVF embryos development through increasing the viability and antioxidative capacity of sex-sorted and unsorted bull semen[J]. HU Ting-xi,ZHU Hua-bin,SUN Wei-jun,HAO Hai-sheng,ZHAO Xue-ming,DU Wei-hua,WANG Zong-li.  Journal of Integrative Agriculture. 2016(10)



本文编号：3683894