禽β-防御素6和9基因的克

发布时间：2022-10-15 19:50

　　【目的】探究重组禽β-防御素6 （AvBD6）、禽β-防御素9 （AvBD9）蛋白的原核表达及其生物学特性。【方法】将AvBD6和AvBD9成熟肽基因克隆到表达载体pGEX-6P-1上,进而将重组表达质粒转化到BL21（DE3）pLysS感受态中,用IPTG进行诱导表达后对其进行纯化,SDS-PAGE电泳分析重组蛋白AvBD6和AvBD9的表达情况,继而检测其体外抗菌活性并用透射电镜观察细菌形态变化,检测重组蛋白对鸡红细胞的溶血活性。【结果】重组AvBD6和AvBD9蛋白诱导表达的分子量约为30 ku,且主要在上清中表达。2种重组蛋白对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抗菌活性。电镜观察显示:菌体内容物外泄,损伤严重,并且重组蛋白对鸡红细胞无溶血活性。【结论】本研究制备的AvBD6和AvBD9重组蛋白具有良好的生物安全性和抑菌效果,为进一步研究其抗菌机制及临床初步应用奠定了基础。 

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【参考文献】：
期刊论文
[1]重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达及生物学特性[J]. 王秋玲,徐倩倩,张婷婷,赵文钧,陈玉秋,齐甜铭,马得莹.  微生物学通报. 2016(09)
[2]重组鸡β-防御素2蛋白的表达与生物学活性鉴定[J]. 马得莹,张婷婷,徐杨,高梦莹,王秋玲,徐倩倩,韩宗玺,刘胜旺.  东北农业大学学报. 2015(08)
[3]鸡β-防御素Gal-9 cDNA的克隆、表达及其抑菌活性的研究[J]. 冯培祥,朱梅胜,杨莉,檀学进,潘福星,齐娟,郭妍妍,张毅,尹燕博.  畜牧兽医学报. 2014(06)
[4]鸡β-防御素Gal-3在大肠杆菌中的诱导表达[J]. 付连军,莫索,贺元欣,刘欢,王彦,魏刚,张琦,王会岩.  西北农业学报. 2013(03)
[5]鸡β-防御素-9的融合表达及其多克隆抗体的制备与鉴定[J]. 许兰娇,洪智敏,司微,刘宝生,张锦华,刘思国,黎观红.  动物营养学报. 2013(03)
[6]重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究[J]. 韩宗玺,廖文艳,王瑞琴,邵昱昊,马得莹.  中国预防兽医学报. 2009(06)

硕士论文
[1]鸡AvBD9毕赤酵母组成型高效表达及其条件优化[D]. 张永正.安徽农业大学 2013
[2]鸡AvBD7成熟肽在大肠杆菌中的表达及抗菌活性分析[D]. 李民欢.安徽农业大学 2012



本文编号：3691928