洛阳地区宠物犬沙门菌的分离鉴定及耐药性研究

发布时间：2022-12-08 00:12

　　伴随宠物犬与人类密切接触,造成沙门菌在犬与人之间扩散传播,给宠物犬及人类健康造成巨大威胁。目前,临床上治疗宠物犬沙门菌病主要依靠于抗生素。然而由于抗生素的广泛使用,导致沙门菌耐药性的增加与扩散,使临床沙门菌感染面临严峻挑战。本研究通过肛门拭子法采集样品,对洛阳地区宠物犬沙门菌进行分离、鉴定,检测宠物犬沙门菌的耐药性及耐药基因,为宠物犬沙门菌病的防治及宠物犬临床用药提供参考。研究结果如下:（1）采用肛门拭子法从洛阳市及周边县城共采集宠物犬粪便样品310份,通过TTB增菌液、麦康凯培养基和SS琼脂培养基对沙门菌进行初步分离,再利用革兰氏染色、生化鉴定、分子鉴定及血清型鉴定最终获得73株沙门菌。（2）选用临床常用的23种抗生素,通过纸片扩散法,进行药物敏感性试验。试验结果表明73株沙门菌表现不同程度的耐药。对阿莫西林、四环素和磺胺异噁唑耐药率最高,分别为84.93%、84.93%和82.19%;其次是氨苄西林、多西环素、氯霉素、复方新诺明和甲氧苄氨嘧啶,耐药率分别为78.08%、71.23%、64.38%、64.38%和76.71%;哌拉西林、头孢曲松、头孢克肟、头孢西丁、庆大霉素、环丙沙星... 

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
符号表
第1章 文献综述
    1.1 沙门菌概述
        1.1.1 沙门菌病原学特征
        1.1.2 沙门菌的危害
        1.1.3 沙门菌的检测技术与方法
    1.2 宠物犬沙门菌病概述
    1.3 沙门菌耐药性研究进展
        1.3.1 沙门菌耐药现状
        1.3.2 沙门菌耐药机制
第2章 宠物犬沙门菌样品的采集和分离鉴定
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 样品来源
        2.2.2 试验菌株
        2.2.3 主要试剂与培养基
        2.2.4 主要仪器设备
    2.3 方法
        2.3.1 样品的采集
        2.3.2 培养基的配制
        2.3.3 细菌的分离培养
        2.3.4 疑似菌株革兰氏染色镜检
        2.3.5 疑似菌株生化鉴定
        2.3.6 疑似菌株分子鉴定
        2.3.7 血清型鉴定
        2.3.8 菌株的冻存
    2.4 结果与分析
        2.4.1 细菌的分离培养结果
        2.4.2 疑似菌株革兰氏染色结果
        2.4.3 疑似菌株生化鉴定结果
        2.4.4 疑似菌株分子鉴定结果
        2.4.5 沙门菌血清型鉴定结果
        2.4.6 沙门菌分离株样品分布情况
    2.5 讨论
第3章 宠物犬沙门菌药敏试验
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 试验菌株
        3.2.2 药敏纸片
        3.2.3 主要试剂与培养基
        3.2.4 主要仪器设备
    3.3 方法
        3.3.1 培养基的配制
        3.3.2 菌株的复苏
        3.3.3 药敏试验
    3.4 结果与分析
        3.4.1 沙门菌药敏试验抑菌圈观察
        3.4.2 73株沙门菌药敏试验结果
        3.4.3 73株沙门菌多重耐药结果
    3.5 讨论
第4章 宠物犬沙门菌耐药基因检测
    4.1 引言
    4.2 材料
        4.2.1 试验菌株
        4.2.2 主要试剂
        4.2.3 主要仪器设备
    4.3 方法
        4.3.1 沙门菌总DNA提取
        4.3.2 氨基糖苷类耐药基因PCR扩增
        4.3.3 四环素类耐药基因PCR扩增
        4.3.4 β-内酰胺类耐药基因PCR扩增
        4.3.5 磺胺类耐药基因PCR扩增
        4.3.6 氯霉素类耐药基因PCR扩增
        4.3.7 PCR产物凝胶电泳检测
    4.4 结果与分析
        4.4.1 氨基糖苷类耐药基因检出结果
        4.4.2 四环素类耐药基因检出结果
        4.4.3 β-内酰胺类耐药基因检出结果
        4.4.4 磺胺类耐药基因检出结果
        4.4.5 氯霉类耐药基因检出结果
    4.5 讨论
第5章 结论
参考文献
缩略语词汇表
致谢
攻读学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡白痢的诊治[J]. 谭海峰.  养殖与饲料. 2018(12)
[2]沙门氏菌对常用抗菌药物的耐药机制研究进展[J]. 邓飞,陈斌,邵靓,李丽,邱明双,周莉媛.  畜禽业. 2018(11)
[3]沙门氏菌检测方法研究进展[J]. 赵春阳,江强世,刘畅,张文劲,陈颖钰,郭爱珍,胡长敏.  中国奶牛. 2018(10)
[4]基因芯片技术在病原性食品微生物检测中的应用[J]. 迪丽霍玛尔·吾尔开希,刘丽英.  现代食品. 2018(19)
[5]仔猪副伤寒的防治[J]. 胡根军.  畜禽业. 2018(07)
[6]腹泻幼犬粪便中沙门氏菌的分离与鉴定[J]. 凌清标.  福建畜牧兽医. 2018(03)
[7]贵州省猪源大肠杆菌对四环素类药物的耐药性及耐药基因检测[J]. 王学君,谭艾娟,吕世明,杜安定,陈波利,张盛珣.  中国畜牧兽医. 2018(05)
[8]仔猪副伤寒的防治[J]. 张桂霞.  中兽医学杂志. 2018(02)
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[10]树鼩粪便中沙门氏菌LAMP检测方法建立及应用[J]. 王璇,袁园,张志成,刘城秀,宋庆凯,孙晓梅.  中国比较医学杂志. 2018(02)

博士论文
[1]鸭源大肠杆菌主动外排基因及其调控基因的表达水平与多重耐药机制[D]. 刘建华.河南农业大学 2011

硕士论文
[1]山东地区死亡鸭胚中细菌分离鉴定及沙门氏菌耐药性与毒力基因检测[D]. 宫艳杉.山东农业大学 2017
[2]合肥市宠物犬与犬粮携带沙门氏菌情况调查及耐药性研究[D]. 王元兰.安徽农业大学 2013
[3]猪沙门氏菌耐药基因检测方法的建立及其应用[D]. 刘维红.华中农业大学 2006



本文编号：3713143