仔猪早期断奶应激诱导自噬发生规律的研究

发布时间：2022-12-17 11:04

　　在现代畜牧生产中,仔猪早期断奶已经被广泛的采用,由于生产需要以及饲养条件和营养水平的不断改进,仔猪断奶的时间被不断提前,但是仔猪在断奶时易受到环境和营养等多方面的刺激,从而造成一系列的仔猪早期断奶应激综合症。自噬是一种溶酶体依赖性的降解途径,它广泛的存在于真核生物中,在细胞的生长发育以及蛋白质的代谢中发挥着非常重要的作用。我们实验室已有的研究证实在断奶后1～2天,自噬能够被迅速的激活,但是在断奶后的短时间内,自噬的变化规律还有待进一步的研究,同时由于仔猪在断奶时营养物质和能量摄入受限,随着断奶时间的延长,体内调控营养和能量代谢的通路可能也会发生变化。 本试验内容包括五部分：1.在断奶过程中,仔猪血液中常规生理生化指标的变化规律；2.在断奶过程中,仔猪血液中相关激素的变化规律；3.断奶应激对仔猪肠道结构的影响；4.断奶应激对仔猪肝脏中AMPK表达量的影响；5.断奶应激对仔猪肝脏中mTOR表达量的影响。6.基于实验室已有的研究结果,探究随着断奶时间的延长,自噬的变化规律。研究结果如下： （1）通过对仔猪血液中常规生理生化指标的测定发现,与对照组相比,在断奶后1-7天,白细胞呈现... 

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略语表
1 文献综述
    1.1 仔猪早期断奶的必要性分析
        1.1.1 缩短母猪的繁殖周期,增加母猪的年产仔数
        1.1.2 提高仔猪的成活率
        1.1.3 提高分娩舍的利用率
        1.1.4 提高饲料利用率,减少饲料消耗
        1.1.5 母猪体重损失少,节省饲料
    1.2 早期断奶仔猪的消化生理特点
        1.2.1 早期断奶应激对仔猪肠道结构变化的影响
        1.2.2 早期断奶应激对仔猪消化酶以及胃酸分泌的影响
        1.2.3 早期断奶应激对仔猪消化道微生物区系的影响
    1.3 早期断奶应激对仔猪抗病能力的影响
    1.4 细胞自噬的简介及其作用机理
        1.4.1 自噬的分类及其形成过程
            1.4.1.1 大自噬
            1.4.1.2 小自噬
            1.4.1.3 分子伴侣介导的自噬
        1.4.2 自噬的生物学作用和意义
    1.5 雷帕霉素靶蛋白(The target protein of rapamycin,TOR)信号通路
    1.6 AMPK(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路
    1.7 早期断奶应激对自噬的影响
    1.8 AMPK、mTOR和自噬三者之间的联系
    1.9 研究目的与意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料选择
        2.1.1 试验动物
        2.1.2 主要药品及试剂
        2.1.3 试验缓冲液及其配制
            2.1.3.1 蛋白酶抑制剂配方
            2.1.3.2 SDS-PAGE缓冲液
            2.1.3.3 其他缓冲液
            2.1.3.4 细胞裂解液配方
            2.1.3.5 Schiff液的配制
    2.2 试验方法及处理
        2.2.1 试验设计
        2.2.2 动物样品的采集
        2.2.3 血液指标的测定
            2.2.3.1 血液中生理生化指标测定
            2.2.3.2 血液中氨基酸的测定
            2.2.3.3 血液中葡萄糖的测定
            2.2.3.4 血液中相关激素的测定
        2.2.4 苏木素—伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H&E染色)
            2.2.4.1 组织切片制作流程
            2.2.4.2 H&E染色流程
        2.2.5 糖原染色(periodic acid-Schiff staining,PAS染色)
        2.2.6 透射电镜
        2.2.7 SDS-PAGE/Western-Blot
            2.2.7.1 蛋白样品的制备
            2.2.7.2 SDS-PAGE/Western Blot
    2.3 图像处理及数据分析
3 结果与分析
    3.1 早期断奶应激对仔猪血液指标的影响
        3.1.1 早期断奶应激对仔猪血液中常规生理指标的影响
        3.1.2 早期断奶应激对仔猪血液中相关激素指标的影响
    3.2 早期断奶应激对仔猪肠道和肝脏形态变化的影响
    3.3 早期断奶应激对仔猪能量代谢的影响
        3.3.1 早期断奶应激对仔猪肝脏中糖原分布的影响
        3.3.2 早期断奶应激对仔猪血液中葡萄糖浓度的影响
        3.3.3 早期断奶应激对仔猪肝脏中AMPK的影响
    3.4 早期断奶应激对仔猪肝脏中自噬的影响
        3.4.1 早期断奶应激对仔猪肝脏中LC3的影响
        3.4.2 早期断奶应激对仔猪肝脏中p62的影响
        3.4.3 早期断奶应激对仔猪肝脏组织中自噬泡数量的影响
    3.5 早期断奶应激对仔猪氨基酸代谢的影响
        3.5.1 早期断奶应激对仔猪血液中氨基酸的影响
        3.5.2 早期断奶应激对仔猪肝脏组织中mTOR的影响
4 讨论与小结
    4.1 早期断奶应激对仔猪血液中常规生理指标的影响
    4.2 早期断奶应激对仔猪血液中相关激素指标的影响
    4.3 早期断奶应激对仔猪肠道形态的影响
    4.4 早期断奶应激对仔猪能量代谢的影响
    4.5 早期断奶应激对仔猪自噬的影响
    4.6 早期断奶应激对仔猪氨基酸代谢的影响
    4.7 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]小自噬的研究进展[J]. 陈艾,童煜,毛萌.  中国病理生理杂志. 2012(05)
[2]运动对生长激素的影响[J]. 张颖,李涛.  咸宁学院学报. 2011(06)
[3]断奶仔猪的生理特点及乳酸杆菌在断奶仔猪中应用的研究进展[J]. 石英军,黄兴国.  广东饲料. 2011(04)
[4]仔猪免疫系统的建立及早期断奶对仔猪免疫功能的影响研究[J]. 陈静,刘显军,边连全,朴钟云.  吉林农业科学. 2011(01)
[5]冷束缚应激对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞及白细胞介素2和6表达的影响[J]. 王长青,赵长青,索利敏.  中华耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2009 (12)
[6]仔猪消化道微生物区系变化影响因素研究[J]. 杨玲,杨卫景,马先进,洪杰.  中兽医学杂志. 2009(05)
[7]早期断奶应激对仔猪血清皮质醇含量和肠形态及肠屏障通透性的影响[J]. 钱仲仓,刘海萍,徐勇,胡彩虹.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2009(10)
[8]猪胎及仔猪消化道发育的研究进展[J]. 赵元,秦贵信,鲍男,王涛,张兵.  中国畜牧杂志. 2008(09)
[9]合生素对断奶仔猪生产性能及血液生理生化指标的影响[J]. 王龙昌,周岩民,罗有文,康峰,王恬.  畜牧与兽医. 2008(04)
[10]几种酸化剂对断奶仔猪胃酸分泌、胃肠道消化酶活性和微生物菌群的影响[J]. 朱晓萍,张德福.  黑龙江畜牧兽医. 2007(03)



本文编号：3719816