WT1基因对猪肾成纤维细胞和睾丸细胞的凋亡及发育基因表达影响的研究

发布时间：2022-12-17 21:20

　　威尔姆氏瘤基因1（Wilms tumour gene1, WT1）是第一个被发现与威尔姆氏瘤相关的功能失活的基因，并且在肾脏发育中起着十分重要的作用。WT1基因敲除小鼠无肾脏、生殖腺缺失以及视网膜畸形，因此，在发育过程中，WT1基因与肾脏及生殖腺细胞的存活及分化密切相关。目前对于WT1基因的研究大多数是关于人的各种肿瘤疾病以及小鼠的肾脏及睾丸发育方面的研究，而WT1基因在猪体内表达及功能研究的相关报道较少。猪是我国最重要的肉用家畜，同时在解剖、生理和代谢等方面与人类十分接近，药物代谢、器官大小和功能也基本相似，是人类异种器官移植的重要目标动物和理想的人类疾病模型动物。 因此本实验旨在分离培养原代猪胎儿成纤维细胞（PFF）以及猪肾成纤维细胞（PKF），检测三种猪细胞中PFF、PKF及睾丸细胞（ST）中WT1基因的表达，以及WT1蛋白在这三种细胞中的分布情况，为WT1基因在肾脏和生殖腺中表达及功能的进一步研究奠定基础。主要结果包括：（1）原代培养猪胎儿成纤维细胞（PFF）及猪肾成纤维细胞（PKF）；经RT-PCR及荧光定量PCR检测到WT1基因分别在PFF、PKF及ST细胞中表达；... 

【文章页数】：126 页

【学位级别】：博士

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内容提要
中文摘要
ABSTRACT
英文缩写词表
前言
第一篇 文献综述
    第1章 威尔姆氏瘤基因1（Wilms tumor gene 1, WT1）概述
        1.1 WT1 基因概况
        1.2 WT1 基因与肿瘤形成
        1.3 小结
    第2章 WT1 基因在肾脏和性腺发育中的作用
        2.1 WT1 基因与肾脏发育
        2.2 WT1 基因与性腺发育
        2.3 与泌尿生殖相关的发育基因
        2.4 小结
第二篇 实验研究
    第1章 威尔姆氏瘤基因1（WT1）在PFF、PKF及ST细胞中的表达情况分析
        1.1 材料与试剂
        1.2 实验方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第2章 pLV3-WT1 shRNA 慢病毒表达载体构建及其对PKF细胞中WT1 基因下调表达的影响
        2.1 材料与试剂
        2.2 实验方法
        2.3 实验结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第3章 pLV3-WT1 shRNA 慢病毒表达载体对 ST 细胞中 WT1 基因下调表达的影响
        3.1 材料与试剂
        3.2 实验方法
        3.3 实验结果
        3.4 讨论
        3.5 小结
    第4章 pIRES2-WT1-EGFP表达载体的构建及其在ST 细胞中的稳定表达
        4.1 材料与试剂
        4.2 实验方法
        4.3 结果
        4.4 讨论
        4.5 小结
    第5章 pLV3-WT1 shRNA慢病毒表达载体对 PFF细胞中WT1基因下调表达的影响
        5.1 材料与试剂
        5.2 实验方法
        5.3 实验结果
        5.4 讨论
        5.5 小结
结论
参考文献
导师简介
攻读博士期间发表论文
致谢



本文编号：3720656