奶牛乳腺主要乳成分合成代谢的转录组学研究
发布时间：2023-01-04 11:08
乳腺是哺乳动物特有的器官,乳腺的功能是泌乳。哺乳动物乳腺经历了形态和结构上-系列的变化,这些变化与乳腺的物质代谢密切相关,乳腺物质代谢直接影响乳的质量和产量。目前尚缺乏对乳腺物质代谢的系统研究。 本实验以荷斯坦奶牛为实验材料,采用荧光定量PCR技术检测αs1-casein、αs2-casein、 β-casein、κ-casein、β-lactoglobin、WAP基因在乳腺发育各时期的表达,结果显示,这些蛋白质基因在泌乳期表达均上调。PCR技术检测与乳腺蛋白质转录和翻译作用相关的PRLR、 AKT1、STAT5、 ELF5、EIF4EBP1、S6K基因表达,结果显示,EIF4EBP1的基因表达下调,其它基因表达上调,并且与乳蛋白质基因表达趋势基本一致,提示EIF4EBP1对泌乳具有抑制作用,其它基因在转录或翻译水平调控乳蛋白质的合成。PRLR通过JAK2激活STAT5在转录水平发挥作用,AKT1则通过mTOR对EIF4EBP1的负调控和对S6K的正调控在翻译水平发挥作用。采用HPLC方法检测乳腺中β-酪蛋白,最早出现在妊娠6个月。 采用荧光定量PCR技术检测乳腺发育各...
【文章页数】：94 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 乳腺物质代谢特点
1.1.1 乳蛋白的合成
1.1.2 乳脂的合成
1.1.3 乳糖的合成
1.1.4 乳腺葡萄糖的吸收
1.2 乳腺发育研究进展
1.2.1 乳腺发育概述
1.2.2 乳腺组织学发育
1.3 催乳素对乳腺发育及泌乳调控
1.3.1 PRL及其受体结构
1.3.2 PRL在乳腺发育及泌乳中的作用
1.4 催乳素主要的信号传导通路对乳腺发育及物质代谢调节
1.4.1 JAK-STAT信号途径
1.4.2 AKT信号途径
1.5 研究的目的和意义
2 材料与方法
2.1 奶牛乳腺蛋白质代谢研究
2.1.1 编码乳蛋白的基因表达
2.1.2 调控乳蛋白合成的部分基因表达
2.1.3 高效液相色谱法检测乳腺及乳中的酪蛋白
2.2 奶牛乳腺脂代谢研究
2.2.1 血清甘油三酯和总胆固醇的测定
2.2.2 乳腺脂代谢主要酶及调节因子mRNA的表达
2.2.3 乳中游离脂肪酸的检测
2.3 奶牛乳腺糖代谢研究
2.3.1 血清葡萄糖浓度测定
2.3.2 糖代谢相关基因的mRNA检测
2.3.3 Western blotting检测GLUT1蛋白在乳腺中的表达
2.3.4 免疫荧光方法检测GLUT1蛋白在乳腺中的表达定位
2.3.5 高效液相色谱法检测乳腺及乳中的乳糖
2.4 数据处理与统计分析
3 结果
3.1 不同发育时期奶牛乳腺蛋白质代谢
3.1.1 编码乳蛋白质基因的表达
3.1.2 调控乳蛋白合成的部分基因表达
3.1.3 HPLC检测乳腺及乳中的酪蛋白
3.2 不同发育时期奶牛乳腺脂代谢
3.2.1 血清甘油三酯和总胆固醇的测定
3.2.2 奶牛乳腺脂肪酸的吸收、活化及运输
3.2.3 脂肪酸合成及去饱和
3.2.4 甘油三酯和乳脂滴合成
3.2.5 转录调节相关基因及核受体基因
3.2.6 气相色谱法检测甲酯化的脂肪酸
3.3 不同发育时期奶牛乳腺糖代谢
3.3.1 血清葡萄糖浓度
3.3.2 不同发育时期奶牛乳腺乳糖合成相关基因mRNA表达
3.3.3 不同发育时期奶牛乳腺GLUT1蛋白表达
3.3.4 不同发育时期奶牛乳腺GLUT1蛋白的表达定位
3.3.5 HPLC方法检测奶牛乳腺及乳中的乳糖
4 讨论
4.1 不同发育时期奶牛乳腺蛋白质代谢
4.1.1 不同发育时期奶牛乳腺乳蛋白基因表达
4.1.2 PRLR、AKT1基因对乳蛋白转录和翻译相关基因表达的调控
4.2 不同发育时期奶牛乳腺脂代谢
4.2.1 不同发育时期奶牛乳腺脂肪酸吸收、活化和运输
4.2.2 不同发育时期奶牛乳腺脂肪酸的合成、去饱和
4.2.3 不同发育时期奶牛乳腺甘油三酯和乳脂滴合成
4.2.4 转录调节相关基因及核受体基因
4.2.5 PRLR、AKT1对乳脂代谢的调节
4.3 不同发育时期奶牛乳腺糖代谢
4.3.1 不同发育时期奶牛乳腺GLUT1的表达与定位
4.3.2 不同发育时期奶牛乳腺己糖激酶基因表达
4.3.3 不同发育时期奶牛乳腺乳糖合成酶基因表达
4.3.4 PRLR、AKT1对乳腺糖代谢的调节
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
本文编号：3727664
【文章页数】：94 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 乳腺物质代谢特点
1.1.1 乳蛋白的合成
1.1.2 乳脂的合成
1.1.3 乳糖的合成
1.1.4 乳腺葡萄糖的吸收
1.2 乳腺发育研究进展
1.2.1 乳腺发育概述
1.2.2 乳腺组织学发育
1.3 催乳素对乳腺发育及泌乳调控
1.3.1 PRL及其受体结构
1.3.2 PRL在乳腺发育及泌乳中的作用
1.4 催乳素主要的信号传导通路对乳腺发育及物质代谢调节
1.4.1 JAK-STAT信号途径
1.4.2 AKT信号途径
1.5 研究的目的和意义
2 材料与方法
2.1 奶牛乳腺蛋白质代谢研究
2.1.1 编码乳蛋白的基因表达
2.1.2 调控乳蛋白合成的部分基因表达
2.1.3 高效液相色谱法检测乳腺及乳中的酪蛋白
2.2 奶牛乳腺脂代谢研究
2.2.1 血清甘油三酯和总胆固醇的测定
2.2.2 乳腺脂代谢主要酶及调节因子mRNA的表达
2.2.3 乳中游离脂肪酸的检测
2.3 奶牛乳腺糖代谢研究
2.3.1 血清葡萄糖浓度测定
2.3.2 糖代谢相关基因的mRNA检测
2.3.3 Western blotting检测GLUT1蛋白在乳腺中的表达
2.3.4 免疫荧光方法检测GLUT1蛋白在乳腺中的表达定位
2.3.5 高效液相色谱法检测乳腺及乳中的乳糖
2.4 数据处理与统计分析
3 结果
3.1 不同发育时期奶牛乳腺蛋白质代谢
3.1.1 编码乳蛋白质基因的表达
3.1.2 调控乳蛋白合成的部分基因表达
3.1.3 HPLC检测乳腺及乳中的酪蛋白
3.2 不同发育时期奶牛乳腺脂代谢
3.2.1 血清甘油三酯和总胆固醇的测定
3.2.2 奶牛乳腺脂肪酸的吸收、活化及运输
3.2.3 脂肪酸合成及去饱和
3.2.4 甘油三酯和乳脂滴合成
3.2.5 转录调节相关基因及核受体基因
3.2.6 气相色谱法检测甲酯化的脂肪酸
3.3 不同发育时期奶牛乳腺糖代谢
3.3.1 血清葡萄糖浓度
3.3.2 不同发育时期奶牛乳腺乳糖合成相关基因mRNA表达
3.3.3 不同发育时期奶牛乳腺GLUT1蛋白表达
3.3.4 不同发育时期奶牛乳腺GLUT1蛋白的表达定位
3.3.5 HPLC方法检测奶牛乳腺及乳中的乳糖
4 讨论
4.1 不同发育时期奶牛乳腺蛋白质代谢
4.1.1 不同发育时期奶牛乳腺乳蛋白基因表达
4.1.2 PRLR、AKT1基因对乳蛋白转录和翻译相关基因表达的调控
4.2 不同发育时期奶牛乳腺脂代谢
4.2.1 不同发育时期奶牛乳腺脂肪酸吸收、活化和运输
4.2.2 不同发育时期奶牛乳腺脂肪酸的合成、去饱和
4.2.3 不同发育时期奶牛乳腺甘油三酯和乳脂滴合成
4.2.4 转录调节相关基因及核受体基因
4.2.5 PRLR、AKT1对乳脂代谢的调节
4.3 不同发育时期奶牛乳腺糖代谢
4.3.1 不同发育时期奶牛乳腺GLUT1的表达与定位
4.3.2 不同发育时期奶牛乳腺己糖激酶基因表达
4.3.3 不同发育时期奶牛乳腺乳糖合成酶基因表达
4.3.4 PRLR、AKT1对乳腺糖代谢的调节
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
本文编号：3727664
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3727664.html
