妊娠期能量限饲对子代成年大鼠胰岛β细胞的影响

发布时间：2023-01-08 19:17

　　在农业生产上,由于母畜在妊娠期间饲料供给不足或者饲料短缺,容易造成母畜能量摄入不足,从而导致胎儿宫内生长发育迟缓（Intrauterine growthretardation,IUGR）。IUGR仔畜的出生体重降低,胰腺重量降低,并在后天的生长发育过程中,容易造成家畜瘦肉品质下降并产生相关代谢性疾病。目前,多种IUGR动物模型表明母体妊娠期能量摄入不足能够导致IUGR子代胰岛β细胞的生长发育受损和胰岛素分泌功能紊乱,主要表现为β细胞面积减小、β细胞质量和数量降低、胰岛素分泌降低以及PDX-1（胰腺十二指肠同源框因子-1）的表达量降低。然而,大多数IUGR限饲模型的研究主要在母体妊娠期和哺乳期,并且集中在胎儿和新生儿的胰岛β细胞。所以,胎儿先天能量限饲所造成的胰岛损伤是否能通过后天正常饮食的弥补而有一定程度的恢复还不清楚,也就是说,IUGR子代在哺乳期和后天恢复正常能量摄入对胰岛β细胞是否有持续性的影响以及相关调控机制还有待研究。因此,本试验采用Sprague Dawley（SD）大鼠为试验材料,探究IUGR子代出生后恢复正常能量摄入对其成年胰岛β细胞形态和胰岛素分泌功能的影响。本试验旨... 

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第1章 文献综述
    1.1 宫内发育迟缓(IUGR)概述
        1.1.1 IUGR产生原因
        1.1.2 IUGR动物模型
    1.2 IUGR对后代健康及组织器官的影响
    1.3 胰岛β细胞生长发育相关调控因子
        1.3.1 胰腺十二指肠同源框因子-1(PDX-1)
        1.3.2 胰岛素样生长因子(IGF)
        1.3.3 成纤维细胞生长因子(FGF)
        1.3.4 表皮生长因子(EGF)
        1.3.5 血管内皮生长因子A(VEGFa)
    1.4 胰岛素分泌相关调控因子
        1.4.1 葡萄糖转运
        1.4.2 ATP/ADP比值
        1.4.3 KATP通道
        1.4.4 Ca~(2+)通道
        1.4.5 胰岛素基因
    1.5 研究现状
第2章 引言
第3章 宫内发育迟缓子代大鼠模型建立
    3.1 试验材料
        3.1.1 试验动物
        3.1.2 主要仪器
    3.2 试验方法
    3.3 数据处理与分析
    3.4 结果
        3.4.1 0~12周的每周大鼠体重
        3.4.2 12周龄大鼠的组织重量
    3.5 讨论
    3.6 小结
第4章 IUGR对成年子代大鼠胰岛素分泌的影响及相关调控机制
    4.1 试验材料
        4.1.1 试验动物
        4.1.2 主要试剂及耗材
        4.1.3 主要仪器
        4.1.4 溶液配制
    4.2 试验方法
        4.2.1 腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)
        4.2.2 大鼠血浆胰岛素酶联免疫分析(ELISA)
        4.2.3 大鼠原代胰岛细胞的分离和纯化
        4.2.4 提取胰岛细胞总RNA
        4.2.5 引物序列及合成
        4.2.6 逆转录合成cDNA
        4.2.7 PCR扩增反应
        4.2.8 琼脂糖凝胶电泳
        4.2.9 实时荧光定量PCR反应(RT-qPCR)
    4.3 数据处理与分析
    4.4 结果
        4.4.1 12周龄大鼠血糖和血浆胰岛素浓度变化
        4.4.2 胰岛素分泌相关调控因子的表达变化
    4.5 讨论
    4.6 小结
第5章 IUGR对成年子代大鼠胰岛β细胞形态的影响及相关调控机制
    5.1 试验材料
        5.1.1 试验动物
        5.1.2 主要试剂
        5.1.3 主要仪器
        5.1.4 溶液配制
    5.2 试验方法
        5.2.1 胰腺组织的冷冻切片制作
        5.2.2 胰岛β细胞的免疫荧光染色
        5.2.3 大鼠原代胰岛细胞的分离和纯化
        5.2.4 提取胰岛细胞总RNA
        5.2.5 引物序列及合成
        5.2.6 逆转录合成cDNA
        5.2.7 PCR扩增反应
        5.2.8 琼脂糖凝胶电泳
        5.2.9 实时荧光定量PCR反应
    5.3 数据处理与分析
    5.4 结果
        5.4.1 β细胞形态学观察
        5.4.2 胰岛β细胞面积比例变化
        5.4.3 胰岛生长发育相关调控因子的表达变化
    5.5 讨论
    5.6 小结
第6章 结论
参考文献
致谢



本文编号：3729030