小鹅瘟病毒PCR检测方法的建立及江淮地区小鹅瘟病毒分子流行病学调查
发布时间:2023-01-15 12:16
1.PCR检测小鹅瘟病毒方-法的建立 小鹅瘟是由鹅细小病毒(Goose Parvovirus, GPV)引起的雏鹅或雏番鸭的可传播的败血性疾病。随着水禽养殖业的发展,小鹅瘟对养鹅业造成了严重威胁和损失。本研究根据GeneBank上发布的鹅细小病毒(GPV)标准株B株的全基因组序列,针对GPV的保守基因片段VP3设计了一对引物,建立一种用于检测小鹅瘟病毒的PCR方法。研究结果表明,该方法能够特异地扩增出预期大小约为776bp的片段。通过特异性实验进一步证明,该方法仅能从鹅细小病毒(GPV)中扩增出特异性片段,不能扩增禽白血病病毒(ALV)、禽流感病毒(AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、产蛋下降综合症病毒(EDS76)、鹅致病性大肠杆菌、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)、马立克氏病毒(MDV)等病毒核酸。灵敏性实验证明,该方法最小核酸检出量为4.7ng (50μL体系)。应用所建立的特异性PCR方法于临床病料检测,结果显示41份疑似样品检出率100%,而病毒常规分离法分离到GPV32份,阳性率为78.0%。同时应用双夹心ELISA方法检测其中的13份样品,阳性率为100%。本研...
【文章页数】:62 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
符号说明
文献综述
参考文献
研究内容一 PCR检测小鹅瘟病毒方法的建立
1. 材料
2. 方法
3. 结果
4 讨论
参考文献
研究内容二 江淮地区小鹅瘟病毒的分子遗传进化分析
1. 材料
2. 方法
3. 结果
4. 讨论
参考文献
研究内容三 小鹅瘟病毒全基因序列的测定及遗传进化分析
1. 材料
2. 方法
3. 结果
4. 讨论
参考文献
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]抗鹅细小病毒单克隆抗体的制备及其免疫荧光检测方法的建立[J]. 郭卉,涂飞,吕亚楠,史荣华,金文杰,邵红霞,钱琨,秦爱建. 中国动物传染病学报. 2013(04)
[2]2株鹅细小病毒全基因组特征分析[J]. 王浩,田先举,张烁,周秀红,刘红梅,潘玲,祁克宗. 畜牧兽医学报. 2013(04)
[3]番鸭源小鹅瘟病毒PT株VP基因的克隆与序列分析[J]. 王劭,朱小丽,林锋强,程晓霞,陈仕龙,李兆龙,陈少莺. 农业生物技术学报. 2012(01)
[4]鹅细小病毒PCR检测方法的建立及应用[J]. 邵洪泽,李琳,毛文智,辛英,姚新华. 吉林畜牧兽医. 2009(05)
[5]雏番鸭细小病毒病的研究进展[J]. 阮二垒,陈芳艳,陈瑞爱,王林川. 中国动物检疫. 2009(05)
[6]小鹅瘟病毒常州株的鉴定及其致弱研究[J]. 金文杰,李清,刘岳龙,秦爱建,刘学贤,王建,邵红霞,施祖灏,蒋小刚,周卫东. 中国家禽. 2008(23)
[7]鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测[J]. 于天飞,马波,邢明伟,靳淼,刘海暇,李俚,王君伟. 中国家禽. 2007(07)
[8]应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究[J]. 布日额,李宝臣,马波,王君伟,Ulrich Neumann. 畜牧兽医学报. 2006(02)
[9]一例鹅病毒病的病原鉴定初步报告[J]. 何月英,符芳,曾德年,宁玲忠,崔尚金. 中国预防兽医学报. 2005(04)
[10]鹅细小病毒分离株HG5/82的分子特征分析[J]. 孔宪刚,李桂霞,刘胜旺,冉多良. 中国病毒学. 2005(01)
博士论文
[1]串联不同分子佐剂的小鹅瘟病毒VP3基因疫苗的构建及其免疫原性研究[D]. 韩新锋.四川农业大学 2008
[2]GPV VP及NS基因克隆及其原核表达产物的研究和应用[D]. 布日额.东北农业大学 2005
[3]奶牛γ-干扰素基因的表达及其在乳房炎防治中的初步应用[D]. 许金俊.扬州大学 2004
硕士论文
[1]小鹅瘟病毒VP3基因的克隆表达及抗小鹅瘟病毒单克隆抗体的研制[D]. 鹿钟文.扬州大学 2012
[2]小鹅瘟细胞适应毒的培育及其特性的研究[D]. 刘兵.扬州大学 2012
[3]鹅细小病毒常州株NS1和VP1基因序列分析及NS1基因的表达[D]. 陈希.扬州大学 2007
[4]小鹅瘟病毒强毒株细胞适应毒的培育及其VP3基因的表达[D]. 李清.扬州大学 2007
[5]鹅细小病毒VP3基因克隆及真核表达载体的构建[D]. 张鑫.吉林农业大学 2006
[6]传染性法氏囊病毒VP2基因的表达及其特异性单克隆抗体的研制[D]. 李迎晓.扬州大学 2005
[7]鹅细小病毒非结构蛋白NS2基因的克隆及原核表达[D]. 邢明伟.东北农业大学 2002
本文编号:3731040
【文章页数】:62 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
符号说明
文献综述
参考文献
研究内容一 PCR检测小鹅瘟病毒方法的建立
1. 材料
2. 方法
3. 结果
4 讨论
参考文献
研究内容二 江淮地区小鹅瘟病毒的分子遗传进化分析
1. 材料
2. 方法
3. 结果
4. 讨论
参考文献
研究内容三 小鹅瘟病毒全基因序列的测定及遗传进化分析
1. 材料
2. 方法
3. 结果
4. 讨论
参考文献
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]抗鹅细小病毒单克隆抗体的制备及其免疫荧光检测方法的建立[J]. 郭卉,涂飞,吕亚楠,史荣华,金文杰,邵红霞,钱琨,秦爱建. 中国动物传染病学报. 2013(04)
[2]2株鹅细小病毒全基因组特征分析[J]. 王浩,田先举,张烁,周秀红,刘红梅,潘玲,祁克宗. 畜牧兽医学报. 2013(04)
[3]番鸭源小鹅瘟病毒PT株VP基因的克隆与序列分析[J]. 王劭,朱小丽,林锋强,程晓霞,陈仕龙,李兆龙,陈少莺. 农业生物技术学报. 2012(01)
[4]鹅细小病毒PCR检测方法的建立及应用[J]. 邵洪泽,李琳,毛文智,辛英,姚新华. 吉林畜牧兽医. 2009(05)
[5]雏番鸭细小病毒病的研究进展[J]. 阮二垒,陈芳艳,陈瑞爱,王林川. 中国动物检疫. 2009(05)
[6]小鹅瘟病毒常州株的鉴定及其致弱研究[J]. 金文杰,李清,刘岳龙,秦爱建,刘学贤,王建,邵红霞,施祖灏,蒋小刚,周卫东. 中国家禽. 2008(23)
[7]鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测[J]. 于天飞,马波,邢明伟,靳淼,刘海暇,李俚,王君伟. 中国家禽. 2007(07)
[8]应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究[J]. 布日额,李宝臣,马波,王君伟,Ulrich Neumann. 畜牧兽医学报. 2006(02)
[9]一例鹅病毒病的病原鉴定初步报告[J]. 何月英,符芳,曾德年,宁玲忠,崔尚金. 中国预防兽医学报. 2005(04)
[10]鹅细小病毒分离株HG5/82的分子特征分析[J]. 孔宪刚,李桂霞,刘胜旺,冉多良. 中国病毒学. 2005(01)
博士论文
[1]串联不同分子佐剂的小鹅瘟病毒VP3基因疫苗的构建及其免疫原性研究[D]. 韩新锋.四川农业大学 2008
[2]GPV VP及NS基因克隆及其原核表达产物的研究和应用[D]. 布日额.东北农业大学 2005
[3]奶牛γ-干扰素基因的表达及其在乳房炎防治中的初步应用[D]. 许金俊.扬州大学 2004
硕士论文
[1]小鹅瘟病毒VP3基因的克隆表达及抗小鹅瘟病毒单克隆抗体的研制[D]. 鹿钟文.扬州大学 2012
[2]小鹅瘟细胞适应毒的培育及其特性的研究[D]. 刘兵.扬州大学 2012
[3]鹅细小病毒常州株NS1和VP1基因序列分析及NS1基因的表达[D]. 陈希.扬州大学 2007
[4]小鹅瘟病毒强毒株细胞适应毒的培育及其VP3基因的表达[D]. 李清.扬州大学 2007
[5]鹅细小病毒VP3基因克隆及真核表达载体的构建[D]. 张鑫.吉林农业大学 2006
[6]传染性法氏囊病毒VP2基因的表达及其特异性单克隆抗体的研制[D]. 李迎晓.扬州大学 2005
[7]鹅细小病毒非结构蛋白NS2基因的克隆及原核表达[D]. 邢明伟.东北农业大学 2002
本文编号:3731040
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