山东省泰安市不同来源的鸡产气荚膜梭菌分离鉴定、耐药性及基因分型研究

发布时间：2023-02-10 07:11

　　产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是动物和人类重要的细菌病原体。可以通过产生各种外毒素引起人类食物中毒,也能使鸡致病形成坏死性肠炎(NE)。为了调查泰安市部分养鸡场及零售鸡产品中产气荚膜梭菌的流行特征,本研究从泰安市6个不同养鸡场采集疑似坏死性肠炎样品以及两批淘汰蛋鸡样品,同时在泰安市禽产品交易市场采集零售鸡产品样品。通过选择性培养基进行产气荚膜梭菌的分离,利用PCR方法鉴定分离菌株的主要毒素基因。药物敏感纸片扩散法(Kirby-Bauer氏法)用于分离菌株的耐药性研究。使用多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)的方法,对部分分离菌株进行分型分析。在采集的420份样品中,共分离出209株产气荚膜梭菌,阳性率30.7%。其中包括零售鸡产品分离得到153株;疑似坏死性肠炎样品25株;淘汰鸡31株。PCR结果显示:所有的分离株均为A型产气荚膜梭菌,并且β₂毒素基因检出率为11.5%,比相关报道的检出率低。药敏试验结果显示:菌株对庆大霉素的耐药率最高,达到87%;其次是杆菌肽,达到73%;林可霉素耐药率...

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【学位级别】：硕士

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1 前言
    1.1 产气荚膜梭菌简述
    1.2 产气荚膜梭菌病流行情况
    1.3 产气荚膜梭菌病的致病机制
    1.4 多位点序列分型
    1.5 研究目的及意义
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 样品采集
        2.1.3 主要培养基
        2.1.4 主要试剂及溶液配制
        2.1.5 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 样品采集
        2.2.2 细菌的分离及纯化
        2.2.3 菌种保存
        2.2.4 细菌的形态及生化鉴定
        2.2.5 细菌的DNA模板提取
        2.2.6 血清型鉴定
        2.2.7 毒素基因检测
        2.2.8 药敏试验
        2.2.9 耐药基因检测
        2.2.10 多位点序列分型(MLST)
3 结果
    3.1 菌株分离结果
    3.2 零售鸡产品阳性率
    3.3 选择培养基细菌菌落形态
    3.4 镜检结果
    3.5 PCR鉴定结果
        3.5.1 血清型鉴定
        3.5.2 β2 毒素基因的检测
    3.6 药敏试验结果
        3.6.1 耐药性结果
        3.6.2 耐药基因检测结果
        3.6.3 多重耐药性结果
    3.7 多位点序列分型(MLST)
        3.7.1 管家基因扩增
        3.7.2 MLST分析
        3.7.3 MLST与耐药性
4 分析与讨论
    4.1 产气荚膜梭菌分离状况分析
    4.2 毒素基因检测及耐药性
    4.3 多位点序列分型(MLST)
5 结论
6 创新点
参考文献
附录
致谢



本文编号：3739242