雄激素受体基因在绵羊不同组织中的表达特性及睾丸、附睾中的定位

发布时间：2023-02-11 15:22

　　本文主要研究雄激素受体(AR)基因在绵羊各组织中的表达特性及在睾丸、附睾中的定位。以4月龄杜寒杂种公羊(杜泊×小尾寒羊)为研究对象,研究AR在不同组织中的表达特性及在睾丸、附睾中的定位；以2月龄、4月龄、6月龄、12月龄杜寒杂种公羊为试验对象,研究AR在睾丸及附睾中的表达特性。应用RT-PCR法检测心脏、肝脏、脾脏、大脑、睾丸、附睾等17个组织中AR mRNA表达特性,采用免疫组织化学技术对4月龄公羔睾丸和附睾中的AR进行定位,Western Blotting技术对AR蛋白进行分析。主要研究结果如下： 1.克隆了AR的部分序列,使用NCBI GenBank对测序结果进行BLAST分析,结果显示试验所得序列与已登陆的绵羊AR基因序列(NC019484)比对,相似性达100%,表明该序列即为杜寒杂种羊AR基因的部分序列,可进行下一步的Real-time PCR分析。 2.AR在4月龄的绵羊各组织中广泛表达,AR mRNA在杂种绵羊不同组织中表达量由高到低依次为：睾丸>心>腹肌>附睾体>大脑>小肠>后躯>背最长肌>脾>附睾头>肾&g...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
第一章 文献综述
    1 雄激素及其受体概述
        1.1 雄激素概述
        1.2 雄激素受体(AR)概述
    2 雄激素受体的研究进展
        2.1 AR的作用机制
        2.2 不同动物组织中AR的表达
    3 论文的选题意义
第二章 4月龄绵羊不同组织中AR mRNA及AR蛋白的表达
    1 试验与方法
        1.1 试验动物及组织
        1.2 主要仪器与试剂
    2 试验方法
        2.1 不同组织中总RNA的提取与检测
        2.2 cDNA合成
        2.3 引物设计合成与检测
        2.4 克隆与测序
        2.5 相对定量标准曲线的绘制
        2.6 Western-blotting检测
    3 结果与分析
        3.1 AR测序结果
        3.2 常规RT-PCR检测
        3.3 总RNA提取及定量标准曲线的建立
        3.4 不同组织中AR mRNA的表达
        3.5 不同组织中AR蛋白的表达
    4 讨论
    5 结论
第三章 不同月龄绵羊睾丸及附睾中AR的表达及定位
    1 试验材料与方法
        1.1 试验动物及其组织
        1.2 主要仪器与试剂
    2 试验方法
        2.1 总RNA的提取及cDNA第一链的合成
        2.2 引物的设计与合成
        2.3 标准曲线的绘制
        2.4 AR Real-time PCR反应
        2.5 睾丸及附睾免疫组织化学法
        2.6 图像分析与数据处理
    3 结果与分析
        3.1 绵羊睾丸及附睾中AR的表达
        3.2 4 月龄绵羊睾丸及附睾中AR的表达定位
    4 讨论
        4.1 不同月龄绵羊睾丸及附睾的表达
        4.2 4 月龄绵羊睾丸及附睾中AR定位分析
    5 结论
全文结论
参考文献
硕士在读期间发表论文
Abstract
致谢



本文编号：3740638