低氧/低硒对肉鸡肺脏内皮素-1和其受体基因表达的影响

发布时间：2023-02-13 20:06

　　肺动脉高压(Pulmonary hypertension, PH)及伴随而来的肺血管重构(Pulmonary vascular remolding, PVR)和腹水(Ascites, As)是商品化肉鸡生产中常见的营养代谢病。目前认为缺氧性PH是肉鸡As病理机制的中心环节。各种导致机体缺氧的因素使机体处于氧饥饿状态,促使心脏输出量上升,心脏和肺脏功能随之增强,肺动脉压升高。肺动脉压升高首先引起右心功能出现机能性代偿,持续的PH引起心肺系统机能代偿和结构代偿并存,进一步发展导致两种代偿相继失调,出现右心肥大衰竭和以肺小动脉平滑肌中膜增厚、管腔变窄及非肌型动脉肌化为特征的PVR,致使肺动脉痉挛、肺循环压力升高、肺血管的顺应性降低,最终导致As的发生。 内皮素-1(Endothelin-1, ET-1)是一种具有多种生物活性的多肽,为目前已知的动物机体内生物学活性最强、作用时间最长的血管收缩物质,其拥有强大的收缩血管及诱导血管平滑肌细胞分裂增殖的活性,在心血管和呼呼系统疾病的发生发展进程中起到重要作用。ET-1生物学功能的发挥是通过与其受体A (ETA)和受体B (ETB)结合来实现的。在肺...

【文章页数】：155 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
目录
摘要
Abstract
縮略词表（Abbreviation)
第一部分 文献综述
    第一章 内皮素-1和其受体概述
        引言
        1 ET化学结构及其生物学分类
            1.1 ET化学组成及分类
            1.2 ET晶体结构特征
            1.3 ET在机体内的分布
            1.4 ET的生物合成及释放
                1.4.1 ET生物合成
                1.4.2 ET生物合成后的释放
                1.4.3 影响ET生物合成及释放的因素
            1.5 ET在机体内的代谢
            1.6 ET的生理学作用
                1.6.1 ET对心血管系统的调节
                1.6.2 ET对肾脏功能的影响
                1.6.3 ET对细胞有丝分裂的作用
                1.6.4 ET对神经调节和内分泌的影响
            1.7 ET的病理学意义
                1.7.1 ET与心血管疾病的联系
                1.7.2 ET与高血压的联系
                1.7.3 ET与高血糖、高血脂的联系
                1.7.4 ET与肿瘤的联系
            1.8 ET转换酶和其抑制剂
        2 ET受体和其生物学作用
            2.1 ET受体(ETR)分布
            2.2 ETR类别
            2.3 ETR生物学功能
            2.4 ETR与ET结合后生物学作用机理
            2.5 影响ETR表达变化的因素
            2.6 ETR在机体内的生物调控和反馈机制
            2.7 ETR拮抗剂及其治疗作用
    第二章 肉鸡肺动脉高压病理学综述
        引言
        1 低氧性PH病因学
            1.1 PVR
            1.2 心输出量增加
            1.3 心脏、肺脏器质性或功能性缺损
            1.4 低氧性外周阻力血管舒张
        2 ET-1与肉鸡低氧性PH、右心肥大衰竭的病理联系
            2.1 ET-1与肉鸡低氧性PH的病理联系
            2.2 ET与肉鸡右心肥大衰竭的病理联系
第二部分 试验研究
    第三章 高原低氧对肉鸡PH及其肺脏ET-1、ETA和ETB表达的影响
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料与方法
            2.1 试验动物与分组处理
            2.2 主要试剂与仪器设备
                2.2.1 试剂
                2.2.2 仪器设备
            2.3 试验方法
                2.3.1 肉鸡生长性能的观察
                2.3.2 肉鸡心脏指数的测定及As的判定
                2.3.3 肉鸡肺脏的取材与保存
                2.3.4 肺组织总RNA提取及cDNA合成
                2.3.5 肺脏ET-1、ETA和ETB基因表达水平实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析
                2.3.6 肺脏ET-1、ETA和ETB蛋白表达水平Western Blot分析
            2.4 试验数据统计与分析
        3 试验结果
            3.1 高原低氧对肉鸡生长性能及As发病率的影响
            3.2 肉鸡As病理观察
            3.3 肉鸡As肺脏病理切片观察
            3.4 高原低氧对肉鸡肺脏ET-1、ETA和ETB mRNA表达水平的影响
                3.4.1 高原低氧对肉鸡肺脏ET-1 mRNA表达水平的影响
                3.4.2 高原低氧对肉鸡肺脏ETA mRNA表达水平的影响
                3.4.3 高原低氧对肉鸡肺脏ETB mRNA表达水平的影响
            3.5 高原低氧对肉鸡肺脏ET-1、ETA和ETB蛋白表达水平的影响
                3.5.1 高原低氧对肉鸡肺脏ET-1蛋白表达水平的影响
                3.5.2 高原低氧对肉鸡肺脏ETA蛋白表达水平的影响
                3.5.3 高原低氧对肉鸡肺脏ETB蛋白表达水平的影响
        4 讨论
            4.1 高原低氧环境下肉鸡生长性能及As发病率观察
            4.2 高原低氧对肉鸡肺脏ET-1、ETA和ETB基因表达水平的影响
    第四章 肉鸡肺动脉平滑肌细胞的培养与鉴定
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料与方法
            2.1 生物材料
            2.2 试剂药品
            2.3 主要仪器与设备
            2.4 PASMCs原代细胞分离培养
            2.5 α-SMA免疫组化鉴定
        3 试验结果
            3.1 培养细胞生长及形态学观察
            3.2 培养细胞α-SMA免疫组化鉴定
        4 讨论
    第五章 肉鸡肺脏微血管内皮细胞的培养与鉴定
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料与方法
            2.1 生物材料
            2.2 试剂药品
            2.3 主要仪器与设备
            2.4 PMVECs原代细胞分离培养
                2.4.1 培养板的准备
                2.4.2 内皮细胞分离培养
                2.4.3 培养细胞的鉴定
        3 试验结果
            3.1 培养细胞生长及形态学观察
            3.2 培养细胞HE染色观察
            3.3 FITC-BSI反应
            3.4 CD31免疫荧光染色
            3.5 Ⅷ因子相关抗原反应结果
        4 讨论
    第六章 低氧处理对肉鸡PASMCs ET-1、ETA和ETB基因表达的影响
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料与方法
            2.1 生物材料
            2.2 试剂药品
            2.3 主要仪器与设备
            2.4 试验方法
                2.4.1 PASMCs原代细胞分离培养及低氧处理
                2.4.2 低氧处理PASMCs总RNA的提取及cDNA的合成
                2.4.3 低氧处理PASMCs ET-1、ETA和ETB mRNA表达水平qRT-PCR分析
                2.4.4 低氧处理PASMCs ET-1、ETA和ETB蛋白表达水平Western Blot分析
            2.5 试验数据统计与分析
        3 试验结果
            3.1 低氧处理对肉鸡PASMCs ET-1基因表达的影响
            3.2 低氧处理对肉鸡PASMCs ETA基因表达的影响
            3.3 低氧处理对肉鸡PASMCs ETB基因表达的影响
        4 讨论
    第七章 红景天苷对低氧处理的肉鸡PASMCs ET-1、ETA和ETB基因表达的影响
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料与方法
            2.1 生物材料
            2.2 试剂药品
            2.3 主要仪器与设备
            2.4 试验方法
                2.4.1 PASMCs原代细胞分离培养及低氧和(或)SDS处理
                2.4.2 肉鸡PASMCs总RNA的提取及cDNA的合成
                2.4.3 SDS对低氧处理PASMCs ET-1、ETA和ETB mRNA表达水平的影响
                2.4.4 SDS对低氧处理PASMCs ET-1、ETA和ETB蛋白表达水平的影响
            2.5 试验数据统计与分析
        3 试验结果
            3.1 SDS对低氧处理的肉鸡PASMCs ET-1基因表达的影响
            3.2 SDS对低氧处理的肉鸡PASMCs ETA基因表达的影响
            3.3 SDS对低氧处理的肉鸡PASMCs ETB基因表达的影响
        4 讨论
        小结
    第八章 硒处理对肉鸡PMVECs ET-1、ETA和ETB基因表达的影响
        摘要
        Abstract
        1 研究背景
        2 材料与方法
            2.1 生物材料
            2.2 试剂药品
            2.3 主要仪器与设备
            2.4 试验方法
                2.4.1 硒添加和硒缺乏PMVECs模型的准备
                2.4.2 硒处理PMVECs总RNA的提取及cDNA的合成
                2.4.3 硒处理PMVECs ET-1、ETA和ETB mRNA表达水平qRT-PCR分析
            2.5 试验数据统计与分析
        3 试验结果
            3.1 硒处理对肉鸡PMVECs ET-1 mRNA表达的影响
            3.2 硒处理对肉鸡PMVECs ETA mRNA表达的影响
            3.3 硒处理对肉鸡PMVECs ETB mRNA表达的影响
        4 讨论
        小结
    第九章 结论
参考文献
致谢
附录



本文编号：3742222