基于天蚕素A和胡蜂毒素的杂合肽设计及活性鉴定

发布时间：2023-03-12 06:20

　　为了进一步改善胡蜂毒素(mastoparan,MP)的抗菌、抗肿瘤活性并减少细胞毒性,本研究通过分子杂合方法对其进行改造,并初步鉴定设计的杂合多肽的生物活性。以天蚕素A的N-端1-8序列片段和胡蜂毒素的保守序列为模板进行杂合设计,获得一条新型杂合肽KL-21。以胡蜂毒素MP-L作为参照,采用生物信息学方法、微量倍比稀释法、杀菌动力学方法、溶血试验、CCK-8法分别对KL-21和MP-L进行理化参数分析、结构预测、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)测定、杀菌动力学研究、溶血活性测定及肿瘤细胞毒性试验。结果表明,KL-21可以在短时间内迅速杀灭细菌,对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)和阴性菌(大肠杆菌)的MIC均为4～8μg/mL,MBC均为8～16μg/mL;KL-21对真菌(白色念珠菌)的最小MIC为32μg/mL,MBC为64μg/mL。兔红细胞溶血试验表明,KL-21在128μg/mL时溶血活性仅为20%,较MP-L的溶血活性明显降低。细胞毒性试验表明,KL-21对肺癌细胞A549具有良好的抑制作用,16μg/mL的体外抑制率达86%。研究表明,新型杂合肽KL-21较MP...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌种和细胞
        1.1.2 主要试剂及仪器
    1.2 方法
        1.2.1 杂合肽KL-21的设计和合成
        1.2.2 最小抑菌浓度检测
        1.2.3 最小杀菌浓度检测
        1.2.4 杀菌动力学测定
        1.2.5 溶血试验
        1.2.6 细胞培养及CCK8法检测KL-21和MP-L对A549细胞增殖的影响
        1.2.7 统计分析方法
2 结 果
    2.1 多肽的设计
    2.2 两种多肽的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度
    2.3 杀菌动力学曲线
    2.4 溶血活性
    2.5 KL-21和MP-L对A549细胞增殖的影响
3 讨 论
4 结 论



本文编号：3761121