不同月龄乌珠穆沁羊骨骼肌中Myostatin表达量变化规律分析

发布时间：2023-04-02 09:43

　　肌肉生长抑制素（Myostatin，简称MSTN）是动物肌肉生长发育的主要负调控因子，在脊椎动物中有较高的同源性。MSTN是通过抑制成肌细胞生长分化周期而影响肌肉生长，它的功能缺失因加速成肌细胞的生长和分化而导致骨骼肌异常发达。MSTN在同一个体不同部位骨骼肌中的表达量不完全相同，是一种差异表达基因。 本研究以自然放牧条件下饲养的不同月龄乌珠穆沁羊为研究对象，分别采用实时荧光定量PCR技术和酶联免疫分析技术测定1、3、6、9、12和18月龄乌珠穆沁羊股二头肌和背最长肌MSTN基因相对表达水平和蛋白表达量。 股二头肌MSTN基因相对表达水平为6月龄>3月龄>9月龄>1月龄>12月龄>18月龄，6月龄的基因表达量最高，与其他月龄之间相比有显著差异（P<0.05）。1、3、9和12月龄之间基因表达量无显著差异（P>0.05）。背最长肌MSTN基因相对表达水平为6月龄>1月龄>12月龄>3月龄>18月龄>9月龄，6月龄时最高，9月龄时最低。6月龄与1和12月龄之间差异显著（P<0.05），1月龄和12月龄与9月龄之间...

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摘要
Abstract
1 引言
    1.1 肌肉生长抑制素的概述
    1.2 MSTN 研究进展
    1.3 MSTN 的结构特点及同源性
        1.3.1 基因结构特点
        1.3.2 MSTN 同源性
    1.4 MSTN 信号通路
    1.5 MSTN 作用机制
    1.6 MSTN 的表达及调控
        1.6.1 组织表达
        1.6.2 表达量变化
        1.6.3 MSTN 正向调控
        1.6.4 MSTN 负向调控
    1.7 MSTN 对其它组织的影响
        1.7.1 MSTN 对骨骼生长的影响
        1.7.2 MSTN 对肌腱的影响
        1.7.3 MSTN 对脂肪组织的影响
        1.7.4 MSTN 对糖代谢的影响
    1.8 外界条件对 MSTN 表达量的影响
    1.9 对 MSTN 的抑制
    1.10 乌珠穆沁羊简介
    1.11 MSTN 的研究意义
    1.12 研究内容和立题的意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验动物
        2.1.2 主要试剂与仪器
        2.1.3 主要溶液
        2.1.4 器皿处理
    2.2 MSTN 基因表达量测定方法
        2.2.1 乌珠穆沁羊骨骼肌总 RNA 提取及第一链 CDNA 合成
        2.2.2 引物设计及合成
        2.2.3 PCR 条件优化
        2.2.4 内参基因的验证
        2.2.5 数据分析
    2.3 MSTN 蛋白表达量测定方法
        2.3.1 样品预处理
        2.3.2 标准曲线的绘制
3 结果与分析
    3.1 MSTN 基因 MRNA 表达水平试验结果与分析
        3.1.1 总 RNA 浓度和纯度及质量检测
        3.1.2 RNA 的质量评定
        3.1.3 验证 PCR 产物
        3.1.4 实时荧光定量 PCR
        3.1.5 不同月龄骨骼肌中 MSTN 基因 MRNA 表达水平
    3.2 MSTN 蛋白表达量差异分析结果
        3.2.1 用酶标仪检测各组样品吸光值
        3.2.2 标准曲线分析
        3.2.3 不同月龄骨骼肌中 MSTN 蛋白表达量检测结果与分析
4 讨论
    4.1 随着月龄的增长 MSTN 基因表达水平变化规律分析
    4.2 随着月龄的增长 MSTN 蛋白表达量变化规律分析
    4.3 MSTN 蛋白表达量与运动
5 结论
    5.1 总体结论
        5.1.1 不同月龄乌珠穆沁羊骨骼肌中 MSTN 基因 MRNA 表达水平变化规律
        5.1.2 不同月龄乌珠穆沁羊骨骼肌中 MSTN 蛋白表达量变化规律
        5.1.3 相同月龄乌珠穆沁羊的不同部位骨骼肌中 MSTN 蛋白含量比较
    5.2 本论文创新之处
6 展望
致谢
参考文献
作者简介



本文编号：3779001