猪气道上皮细胞形态学及其干细胞特异性抗原筛选的研究
发布时间:2023-04-05 02:35
肺脏是人体与外界进行气体交换的唯一器官,而肺脏气道粘膜上皮经常暴露于微生物、过敏原及污染源之中,易被侵蚀而造成损伤,同时肺脏上皮本身也在不断进行着自我修复来维持肺脏功能的正常。在这一损伤修复过程中,气道上皮干/先祖细胞(Airway epithelial stem/progenitor cell, EpiSPC)起着至关重要的作用。由此可见,分离鉴定EpiSPC的特性对了解气道EpiSPC功能以及肺脏疾病的治疗有着非常重要的意义。然而,由于临床人肺脏组织来源困难,这极大地限制了其肺脏组织形态学与干细胞生物学特性等相关研究;而在常用的动物模型中,猪不但来源广泛,而且它的肺脏无论在大小、解剖结构、生理特性、还是在细胞生物学特征上都与人类肺脏极为相近,是人类肺脏的最佳研究模型之一。因此,我们对猪气道上皮细胞形态组成学及干细胞特异性抗原标记的筛选进行了初步的研究,这对分离鉴定猪肺脏气道上皮干细胞/先祖细胞亚群及其生物学特性研究有重要的意义,并为进一步研究人类肺脏干细胞生物学特性及其在维持肺脏动态平衡、肺脏疾病发生机制和肺脏组织工程等方面的研究奠定了一定的理论基础。 通过试验获得以下结果: 1....
【文章页数】:53 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 猪作为动物模型及其异种组织器官的替代来源的研究现状
1.2 猪肺脏形态学研究
1.2.1 猪肺脏的形态学特征
1.2.2 猪肺脏上皮细胞的组成
1.3 干细胞
1.3.1 肺脏干细胞
1.4 肺脏干细胞内EpiSPC聚集的微环境
1.4.1 微环境对干细胞的影响
1.4.2 肺脏干细胞巢穴
1.4.3 气道上皮中多潜能的EpiSPC
1.5 干细胞与肺疾病
1.6 本课题研究的意义
第二章 猪气道上皮细胞的形态学研究
引言
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 主要试剂与仪器
2.2 实验方法与步骤
2.2.1 猪气道组织切片制作
2.2.2 猪气道的HE染色
2.2.3 猪气道组织PAS染色
2.2.4 IHC鉴定猪气道主要上皮细胞类型
2.2.5 统计分析猪气道不同区段主要上皮细胞的组成比例
2.3 实验结果
2.3.1 猪肺脏组织的HE染色
2.3.2 猪气道组织PAS染色
2.3.3 猪气道主要上皮细胞的IHC染色
2.3.4 猪气道主要上皮细胞组成比例的统计分析
2.4 讨论与小结
2.4.1 讨论
2.4.2 小结
第三章 猪气道上皮细胞中其干细胞特异性抗原筛选的研究
引言
3.1 实验材料
3.1.1 主要仪器设备
3.1.2 主要试剂
3.2 实验方法
3.2.1 猪气道组织处理与冰冻切片制作
3.2.2 猪气道上皮细胞爬片的制作
3.2.3 猪气道上皮的IF或ICC单染
3.2.4 猪气道上皮的细胞爬片免疫荧光双染
3.3 实验结果
3.3.1 猪气道上皮细胞类型与特异性EpiSPC抗原的表达
3.3.2 猪气管上皮细胞的免疫细胞荧光染色
3.3.3 猪肺脏EpiSPC候选细胞亚群的免疫细胞荧染色鉴定
3.4 讨论与小结
3.4.1 讨论
3.4.2 小结
结论
参考文献
致谢
个人简介
本文编号:3782557
【文章页数】:53 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 猪作为动物模型及其异种组织器官的替代来源的研究现状
1.2 猪肺脏形态学研究
1.2.1 猪肺脏的形态学特征
1.2.2 猪肺脏上皮细胞的组成
1.3 干细胞
1.3.1 肺脏干细胞
1.4 肺脏干细胞内EpiSPC聚集的微环境
1.4.1 微环境对干细胞的影响
1.4.2 肺脏干细胞巢穴
1.4.3 气道上皮中多潜能的EpiSPC
1.5 干细胞与肺疾病
1.6 本课题研究的意义
第二章 猪气道上皮细胞的形态学研究
引言
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 主要试剂与仪器
2.2 实验方法与步骤
2.2.1 猪气道组织切片制作
2.2.2 猪气道的HE染色
2.2.3 猪气道组织PAS染色
2.2.4 IHC鉴定猪气道主要上皮细胞类型
2.2.5 统计分析猪气道不同区段主要上皮细胞的组成比例
2.3 实验结果
2.3.1 猪肺脏组织的HE染色
2.3.2 猪气道组织PAS染色
2.3.3 猪气道主要上皮细胞的IHC染色
2.3.4 猪气道主要上皮细胞组成比例的统计分析
2.4 讨论与小结
2.4.1 讨论
2.4.2 小结
第三章 猪气道上皮细胞中其干细胞特异性抗原筛选的研究
引言
3.1 实验材料
3.1.1 主要仪器设备
3.1.2 主要试剂
3.2 实验方法
3.2.1 猪气道组织处理与冰冻切片制作
3.2.2 猪气道上皮细胞爬片的制作
3.2.3 猪气道上皮的IF或ICC单染
3.2.4 猪气道上皮的细胞爬片免疫荧光双染
3.3 实验结果
3.3.1 猪气道上皮细胞类型与特异性EpiSPC抗原的表达
3.3.2 猪气管上皮细胞的免疫细胞荧光染色
3.3.3 猪肺脏EpiSPC候选细胞亚群的免疫细胞荧染色鉴定
3.4 讨论与小结
3.4.1 讨论
3.4.2 小结
结论
参考文献
致谢
个人简介
本文编号:3782557
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