鹅源大肠杆菌的分离鉴定及中药抑菌效果分析

发布时间：2023-04-21 18:06

　　为了从发病鹅分离致病性大肠杆菌并筛选对鹅源大肠杆菌抑菌效果良好的中药,试验采集黑龙江省大庆市林甸某农户狮白鹅发病幼鹅新鲜粪便,分离致病菌,经PCR进行初步鉴定;随后将黄芩、诃子、车前子等二十几种传统中药利用酒浸、超声波破碎、水浴浓缩进行提纯,利用二倍稀释法测定各类中药的最小抑菌浓度(MIC),然后利用牛津杯法进一步测定MIC中抑菌浓度小于或等于12.5 mg/mL中药的抑菌效果,从而找到抑菌效果显著的中药。结果表明:分离培养初步分离得到了3株菌,随机选取1株进行后续试验,PCR产物测序鉴定为大肠杆菌,测定的诃子、黄连、五倍子、车前子、艾叶、甘草、连翘等中药对分离的大肠杆菌均具有抑菌作用,其中诃子、黄连、五倍子、乌梅的MIC为0.39～3.12 mg/mL,分离的鹅源大肠杆菌对其极度敏感。说明本试验分离得到鹅源大肠杆菌,且部分中药在抑制鹅源大肠杆菌方面具有一定效果。

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【文章目录】：
1 材料
    1.1 病料
    1.2 药品
    1.3 主要试剂
    1.4 主要仪器
2 方法
    2.1 大肠杆菌的分离培养及鉴定
    2.2 溶血性的测定
    2.3 中药药液的制备
    2.4 分离菌的PCR鉴定及测序
        2.4.1 引物的设计与合成
        2.4.2 细菌DNA的提取及PCR扩增
    2.5 最小抑菌浓度(MIC)的测定
    2.6 体外抑菌效果的测定
3 结果与分析
    3.1 细菌的分离培养及镜检
    3.2 分离菌的PCR鉴定
    3.3 中药MIC的测定
    3.4 体外抑菌效果的测定
4 讨论



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