猪高效精液稀释液研究与应用效果评价
发布时间：2023-04-26 17:42
我国是世界第一养猪大国,2011年猪平均存栏量4.78亿头,总出栏量6.92亿头,占世界生猪总出栏量的51%,猪肉消费量占我国肉类消费总量的60%以上,养猪产业的发展直接关系到国民生活水平提高与肉类食品安全。目前我国实施猪人工授精比率为60%,且以年均5%的速度递增,猪人工授精技术的推广与应用成为新世纪以来我国养猪业发展最为关键的生物技术。但随着养猪业向规模化和现代化生产方式的迅速发展,猪繁殖障碍类疾病的病毒感染率已经占养猪业疾病的60%以上,病毒性疾病的持续爆发严重滞后了我国养猪产业现代化进程,养猪产业在不断遭受重大挫折的同时,整个产业链由于疾病造成的经济损失十分巨大而沉重。严峻的防疫形势使我国养猪业疾病的高危性风险已经连续多年位居世界前列,对我国养猪产业可持续发展发展与肉食品安全构成了严重威胁。 病源性病毒可以经精液携带通过人工授精的途径在养猪业广泛扩散传播。研究配制符合母猪生理特征的基础精液稀释液、筛选适应精液常温保存条件的精液稀释液抗菌剂、研制养猪产业升级与质量转型所急需的高效猪高效精液稀释液,形成对我国养猪产业具有强力支持人工授精的关键核心技术,对控制生猪病毒性疾病传播、提高...
【文章页数】：122 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 总论
1.1 精液稀释液与猪人工授精技术
1.1.1 养猪产业在国民经济中占有重要的地位
1.1.2 疾病严重威胁猪业生物安全
1.1.3 人工授精是促进猪业发展的核心生物技术
1.1.4 精液是病原微生物扩繁基质与传播介质
1.1.5 精液稀释液是猪人工授精技术提高的关键因素
1.1.6 海南国家无疫区与高效精液稀释液研究
1.2 猪精液稀释液研究进展
1.2.1 我国猪人工授精技术发展概况
1.2.2 前期的研究及成果
1.2.3 近期的研究与进展
1.2.4 精液是微生物扩繁的基质和疾病传播的介质
1.2.5 猪精液传播的病毒性疾病
1.2.6 主要的抗病毒药物及药理
1.2.7 中草药体外抗病毒研究进展
1.2.8 精液稀释液抗微生物研究进展
1.2.9 需进一步研究解决的问题
1.3 高效精液稀释液研究技术路径
1.3.1 研究目的
1.3.2 技术路径
1.4 研究内容
1.4.1 高效精液稀释液技术构型
1.4.2 高效精液稀释液研究内容
2 材料与方法
2.1 海南公猪精液中病毒分布的PCR检测
2.1.1 公猪精液采集
2.1.2 主要试剂
2.1.3 病毒总RNA和DNA的抽提
2.1.4 引物
2.1.5 目的基因片段的扩增
2.2 基础精液稀释液配方优化
2.2.1 稀释液配制组分
2.2.2 公猪精液的采集及品质检查
2.2.3 精液稀释液配制
2.2.4 精液测试样品
2.2.5 精子活率检查
2.2.6 精子顶体染色检查
2.2.7 试验数据统计分析
2.3 精液稀释液中抗菌药物筛选
2.3.1 试验材料
2.3.2 设备与方法
2.4 抗菌药物对精液保存时间影响
2.4.1 试验材料
2.4.2 仪器设备
2.4.3 试验方法
2.5 抗病毒药物对精子活率的影响
2.5.1 试验材料
2.5.2 试验方法
2.6 抗病毒药物对精液中抗氧化酶的影响
2.6.1 试验材料
2.6.2 试验方法
2.7 高效精液稀释液抗PRRSV、PRV病毒试验
2.7.1 试验材料
2.7.2 试验仪器
2.7.3 病毒滴度测定
2.7.4 抗病毒药物样品对Marc145细胞毒性测定
2.7.5 抗病毒药物样品对PK15细胞毒性测定
2.7.6 抗病毒药物样品对PRRSV的杀灭作用试验
2.7.7 抗病毒药物样品对PRV的杀灭作用试验
2.8 高效精液稀释液应用效果评价
2.8.1 试验方法
2.8.2 饲养管理
2.8.3 稀释液配方
2.9 高效精液稀释液推广应用体系建立
3 结果与分析
3.1 海南种公猪精液中病毒分布的PCR检测
3.2 基础精液稀释液配方优化
3.2.1 基础稀释液配方优化
3.2.2 不同稀释液对精子保存时间影响
3.2.3 不同稀释液对精子顶体完整率的影响
3.3 精液稀释液中抗菌药物筛选
3.4 抗菌药物对精液保存时间影响
3.5 抗病毒药物对精子活率的影响
3.5.1 抗病毒药物浓度梯度筛选
3.5.2 抗病毒药物对大白猪精液保存影响
3.5.3 抗病毒药物对长白猪精液保存影响
3.5.4 抗病毒药物对杜洛克猪精液保存影响
3.6 抗病毒药物对精液中抗氧化酶的影响
3.6.1 高效稀释液对精液CAT含量影响
3.6.2 高效稀释液对精液T-AOC影响
3.6.3 高效稀释液对精液中MDA影响
3.7 高效精液稀释液抗PRRSV、PRV病毒试验
3.7.1 病毒滴度测定结果
3.7.2 抗病毒药物样品对细胞的毒性
3.7.3 抗病毒药物样品对病毒杀灭作用
3.7.4 筛选高效精液稀释液配方组成
3.8 高效精液稀释液应用效果评价
3.8.1 高效稀释液对杜洛克母猪繁殖力影响
3.8.2 高效精液稀释液对长白猪繁殖力影响
3.8.3 高效精液稀释液对大白猪繁殖力影响
3.9 高效精液稀释液的推广应用体系建立
3.9.1 建立种猪精子资源保障体系
3.9.2 高效精液稀释液应用技术指标
3.9.3 精液热带地区精液恒温保存及精液配送体系
3.9.4 建立优质猪人工授精站
3.9.5 制定人工授精技术企业标准
3.9.6 热带地区优质猪人工授精推广应用体系
3.9.7 项目实施的经济、社会与生态效益
4 讨论
4.1 海南公猪精液中病毒分布的PCR检测
4.1.1 PCR应用于动物疫病的快速诊断与流行病学调查
4.1.2 病毒与精液品质
4.1.3 种公猪疾病防疫
4.1.4 猪群疾病监测
4.2 基础精液稀释液配方优化
4.2.1 适合海南热带种公猪基础稀释液
4.2.2 筛选的基础稀释液特点
4.2.3 精子顶体完好率
4.2.4 稀释液中葡萄糖含量
4.2.5 精液稀释液中的抗菌药物
4.3 精液稀释液中抗菌药物筛选
4.4 抗菌药物对精子保存时间的影响
4.5 抗病毒药物对精子活率的影响
4.6 抗病毒药物对精液中抗氧化酶的影响
4.6.1 精液中的抗氧化酶
4.6.2 稀释液抗病毒组分优化
4.7 高效精液稀释液抗PRRSV、PRV病毒试验
4.8 高效精液稀释液应用效果评价
4.9 高效精液稀释液推广应用体系建立
5 结论与展望
5.1 主要结论
5.1.1 海南种公猪精液中主要病毒感染率
5.1.2 基础精液稀释液配方优化
5.1.3 稀释液中抗菌药物
5.1.4 抗病毒药物对精子保存活率影响
5.1.5 高效稀释液对精液中抗氧化酶影响
5.1.6 稀释液抗PRRSV和PRV试验
5.1.7 抗病毒药物浓度
5.1.8 猪高效精液稀释液
5.1.9 猪精液稀释液应用效果评价
5.1.10 高效精液稀释液推广应用体系建立
5.2 研究创新点
5.2.1 研制成功具有抗病毒效果的猪高效精液稀释液
5.2.2 建立了高效精液推广应用体系
5.2.3 制定了猪人工授精技术企业标准
5.3 展望
5.3.1 面向全国推广应用
5.3.2 进一步的研究工作
参考文献
缩略语表
致谢
附录一 优质猪人工授精企业技术标准
附录二 博士期间发表的论文和编写的教材
附录三 博士期间主持完成的课题
附录四 博士期间的研究成果与荣誉
附录五 海南省科技厅项目验收意见
附录六 推广应用效果报告
本文编号：3801919
【文章页数】：122 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 总论
1.1 精液稀释液与猪人工授精技术
1.1.1 养猪产业在国民经济中占有重要的地位
1.1.2 疾病严重威胁猪业生物安全
1.1.3 人工授精是促进猪业发展的核心生物技术
1.1.4 精液是病原微生物扩繁基质与传播介质
1.1.5 精液稀释液是猪人工授精技术提高的关键因素
1.1.6 海南国家无疫区与高效精液稀释液研究
1.2 猪精液稀释液研究进展
1.2.1 我国猪人工授精技术发展概况
1.2.2 前期的研究及成果
1.2.3 近期的研究与进展
1.2.4 精液是微生物扩繁的基质和疾病传播的介质
1.2.5 猪精液传播的病毒性疾病
1.2.6 主要的抗病毒药物及药理
1.2.7 中草药体外抗病毒研究进展
1.2.8 精液稀释液抗微生物研究进展
1.2.9 需进一步研究解决的问题
1.3 高效精液稀释液研究技术路径
1.3.1 研究目的
1.3.2 技术路径
1.4 研究内容
1.4.1 高效精液稀释液技术构型
1.4.2 高效精液稀释液研究内容
2 材料与方法
2.1 海南公猪精液中病毒分布的PCR检测
2.1.1 公猪精液采集
2.1.2 主要试剂
2.1.3 病毒总RNA和DNA的抽提
2.1.4 引物
2.1.5 目的基因片段的扩增
2.2 基础精液稀释液配方优化
2.2.1 稀释液配制组分
2.2.2 公猪精液的采集及品质检查
2.2.3 精液稀释液配制
2.2.4 精液测试样品
2.2.5 精子活率检查
2.2.6 精子顶体染色检查
2.2.7 试验数据统计分析
2.3 精液稀释液中抗菌药物筛选
2.3.1 试验材料
2.3.2 设备与方法
2.4 抗菌药物对精液保存时间影响
2.4.1 试验材料
2.4.2 仪器设备
2.4.3 试验方法
2.5 抗病毒药物对精子活率的影响
2.5.1 试验材料
2.5.2 试验方法
2.6 抗病毒药物对精液中抗氧化酶的影响
2.6.1 试验材料
2.6.2 试验方法
2.7 高效精液稀释液抗PRRSV、PRV病毒试验
2.7.1 试验材料
2.7.2 试验仪器
2.7.3 病毒滴度测定
2.7.4 抗病毒药物样品对Marc145细胞毒性测定
2.7.5 抗病毒药物样品对PK15细胞毒性测定
2.7.6 抗病毒药物样品对PRRSV的杀灭作用试验
2.7.7 抗病毒药物样品对PRV的杀灭作用试验
2.8 高效精液稀释液应用效果评价
2.8.1 试验方法
2.8.2 饲养管理
2.8.3 稀释液配方
2.9 高效精液稀释液推广应用体系建立
3 结果与分析
3.1 海南种公猪精液中病毒分布的PCR检测
3.2 基础精液稀释液配方优化
3.2.1 基础稀释液配方优化
3.2.2 不同稀释液对精子保存时间影响
3.2.3 不同稀释液对精子顶体完整率的影响
3.3 精液稀释液中抗菌药物筛选
3.4 抗菌药物对精液保存时间影响
3.5 抗病毒药物对精子活率的影响
3.5.1 抗病毒药物浓度梯度筛选
3.5.2 抗病毒药物对大白猪精液保存影响
3.5.3 抗病毒药物对长白猪精液保存影响
3.5.4 抗病毒药物对杜洛克猪精液保存影响
3.6 抗病毒药物对精液中抗氧化酶的影响
3.6.1 高效稀释液对精液CAT含量影响
3.6.2 高效稀释液对精液T-AOC影响
3.6.3 高效稀释液对精液中MDA影响
3.7 高效精液稀释液抗PRRSV、PRV病毒试验
3.7.1 病毒滴度测定结果
3.7.2 抗病毒药物样品对细胞的毒性
3.7.3 抗病毒药物样品对病毒杀灭作用
3.7.4 筛选高效精液稀释液配方组成
3.8 高效精液稀释液应用效果评价
3.8.1 高效稀释液对杜洛克母猪繁殖力影响
3.8.2 高效精液稀释液对长白猪繁殖力影响
3.8.3 高效精液稀释液对大白猪繁殖力影响
3.9 高效精液稀释液的推广应用体系建立
3.9.1 建立种猪精子资源保障体系
3.9.2 高效精液稀释液应用技术指标
3.9.3 精液热带地区精液恒温保存及精液配送体系
3.9.4 建立优质猪人工授精站
3.9.5 制定人工授精技术企业标准
3.9.6 热带地区优质猪人工授精推广应用体系
3.9.7 项目实施的经济、社会与生态效益
4 讨论
4.1 海南公猪精液中病毒分布的PCR检测
4.1.1 PCR应用于动物疫病的快速诊断与流行病学调查
4.1.2 病毒与精液品质
4.1.3 种公猪疾病防疫
4.1.4 猪群疾病监测
4.2 基础精液稀释液配方优化
4.2.1 适合海南热带种公猪基础稀释液
4.2.2 筛选的基础稀释液特点
4.2.3 精子顶体完好率
4.2.4 稀释液中葡萄糖含量
4.2.5 精液稀释液中的抗菌药物
4.3 精液稀释液中抗菌药物筛选
4.4 抗菌药物对精子保存时间的影响
4.5 抗病毒药物对精子活率的影响
4.6 抗病毒药物对精液中抗氧化酶的影响
4.6.1 精液中的抗氧化酶
4.6.2 稀释液抗病毒组分优化
4.7 高效精液稀释液抗PRRSV、PRV病毒试验
4.8 高效精液稀释液应用效果评价
4.9 高效精液稀释液推广应用体系建立
5 结论与展望
5.1 主要结论
5.1.1 海南种公猪精液中主要病毒感染率
5.1.2 基础精液稀释液配方优化
5.1.3 稀释液中抗菌药物
5.1.4 抗病毒药物对精子保存活率影响
5.1.5 高效稀释液对精液中抗氧化酶影响
5.1.6 稀释液抗PRRSV和PRV试验
5.1.7 抗病毒药物浓度
5.1.8 猪高效精液稀释液
5.1.9 猪精液稀释液应用效果评价
5.1.10 高效精液稀释液推广应用体系建立
5.2 研究创新点
5.2.1 研制成功具有抗病毒效果的猪高效精液稀释液
5.2.2 建立了高效精液推广应用体系
5.2.3 制定了猪人工授精技术企业标准
5.3 展望
5.3.1 面向全国推广应用
5.3.2 进一步的研究工作
参考文献
缩略语表
致谢
附录一 优质猪人工授精企业技术标准
附录二 博士期间发表的论文和编写的教材
附录三 博士期间主持完成的课题
附录四 博士期间的研究成果与荣誉
附录五 海南省科技厅项目验收意见
附录六 推广应用效果报告
本文编号：3801919
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