猪精液冷冻保存技术方法的研究

发布时间：2023-05-03 22:13

　　本研究的目的是通过对冷冻保护剂、冷冻程序以及评价方法的研究来改进猪精液冷冻保存效果。 手握式采集猪精液,对精液进行预处理,之后利用两步法离心稀释,对精液进行降温和平衡,分装冷冻。对冻后猪精子的活力、顶体完整率、质膜完整率、质膜完整率及核DNA完整率的检测,从而反馈冷冻保存效果。 单细胞凝胶电泳试验法和吖啶橙染色法对猪精子DNA完整性结果进行对比及相关性分析,显示两者存在良好的相关性,相关系数为R=0.992,结果极显著(P<0.01)。在不同冷冻速率A.B.C.D.E(61.9℃/min.45.5℃/min.32.2℃/min.24.9℃/min.14.1℃/min)对猪精液冷冻保存效果的研究中,D组冷冻速率,精子平均活力达到了44.63%,但随着冷冻速率的降低,D组精子冻后活力虽高于E组,但两者之间差异不显著(P>0.05)；D组冷冻速率下的猪精子冻后平均质膜完整性显著高于其他四组(P<0.05),达到了55.45%；随着冷冻速率的降低,顶体完整性逐渐升高,D组显著高于A、B、C组(P<0.05),但低于E组水平,两者之间差异不显著(P>0.05)；D组...

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 猪精液冷冻保存技术的概述
    2 猪精液冷冻保存效果的影响因素
        2.1 冷冻保护剂
            2.1.1 渗透性冷冻保护剂
            2.1.2 非渗透性冷冻保护剂
        2.2 冷冻方法
            2.2.1 冷冻降温
            2.2.2 冷冻复温
        2.3 冻精解冻后质量评价方法
            2.3.1 精子功能检查
            2.3.2 精子顶体的检查方法
            2.3.3 精子膜的完整性的检查
            2.3.4 精子DNA完整性的检查方法
    3 展望
第二章 冷冻保护剂、冷冻方法及精子DNA检测方法改进效果观察
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 材料
            2.1.1 主要材料
            2.1.2 主要试剂
            2.1.3 仪器与设备
            2.1.4 溶液配制
        2.2 方法
        2.3 试验设计
        2.4 统计分析
    3 试验结果
        3.1 不同DNA完整性检测方法的相关性研究
        3.2 不同冷冻速率对于猪精子冷冻保存效果的影响
            3.2.1 不同冷冻速率对甘油为冷冻保护剂时猪冻后精子质量的影响
            3.2.2 不同冷冻速率对乙二醇为冷冻保护剂时猪冻后精子质量的影响
            3.2.3 不同冷冻速率对DMA为冷冻保护剂时猪冻后精子质量的影响
        3.3 不同浓度的乙二醇对猪精液冷冻保存的影响
        3.4 不同渗透性冷冻保护剂对猪精子冻后质量的影响
        3.5 不同禽类卵黄对猪精液冷冻保存效果的影响
        3.6 不同浓度海藻糖对猪精子冷冻保存的影响
    4 分析与讨论
        4.1 单细胞凝胶电泳法与n丫卩定橙染色法检测猪精子DNA完整性的比较分析
        4.2 不同冷冻速率对猪精子冷冻保存的影响
        4.3 不同浓度乙二醇对猪精液冷冻保存的影响
        4.4 不同渗透性冷冻保护剂对猪精液冷冻保存的影响
        4.5 不同禽类卵黄对猪精子冷冻保存的影响
        4.6 不同浓度海藻糖对猪精子冷冻保存的影响
    5 结论
参考文献
附录
致谢
个人简介



本文编号：3807381