葡萄糖对奶牛乳腺上皮细胞能量代谢和酪蛋白合成的影响

发布时间：2023-05-12 19:18

　　本论文研究添加不同浓度葡萄糖对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs))葡萄糖摄取和酪蛋白合成的影响,通过对BMECs活力、葡萄糖摄取相关基因mRNA表达量、葡萄糖代谢相关酶活性、酪蛋白合成相关基因mRNA表达量和蛋白表达量的研究,旨在探寻BMECs葡萄糖的适宜供给模式,初步揭示葡萄糖调控酪蛋白合成的分子机制,为调控奶牛乳成分的合成提供理论依据。论文一共包含三部分试验,试验一在二维培养模式下,研究不同浓度的葡萄糖(0、7、10.5、14、17.5 和 21 mmol/L)对 BMECs 葡萄糖摄取量、ATP 含量、葡萄糖转运相关基因mRNA表达量及葡萄糖代谢相关酶活性的影响,筛选葡萄糖的适宜添加量。试验采用单因素完全随机试验设计,将中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞纯化培养后,选取第2代细胞,待细胞生长到80%汇合度时饥饿处理12h,再向培养基中添加不同浓度的葡萄糖。葡萄糖处理12 h以后,使用试剂盒检测细胞培养液中葡萄糖的含量、ATP的合成量以及己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的酶活力;用实时荧光定量PCR检测BMECs葡萄糖转运载体1(GLUT1)、葡萄糖转运...

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略语表
1 引言
    1.1 乳成分概述
        1.1.1 乳糖合成及其调控
        1.1.2 乳蛋白的合成及调控
        1.1.3 乳脂肪的合成及调控
    1.2 葡萄糖对乳合成的调控
        1.2.1 葡萄糖的摄取
        1.2.2 葡萄糖的代谢
        1.2.3 葡萄糖对乳糖合成的调控
        1.2.4 葡萄糖对酪蛋白合成的调控
        1.2.5 葡萄糖对乳脂肪合成的调控
    1.3 奶牛乳腺上皮细胞的培养
        1.3.1 奶牛乳腺上皮细胞的二维培养
        1.3.2 细胞的三维培养
    1.4 研究目的及意义
    1.5 技术路线图
2 试验研究
    2.1 奶牛乳腺上皮细胞对葡萄糖摄取和代谢的研究
        2.1.1 材料与方法
        2.1.2 结果
        2.1.3 讨论
        2.1.4 小结
    2.2 二维培养模式下添加葡萄糖对BMECs酪蛋白合成相关基因表达的影响
        2.2.1 材料与方法
        2.2.2 结果
        2.2.3 讨论
        2.2.4 小结
    2.3 三维培养模式下添加葡萄糖对BMECs酪蛋白合成的影响
        2.3.1 材料与方法
        2.3.2 结果
        2.3.3 讨论
        2.3.4 小结
3 总体讨论与总体结论
    3.1 总体讨论
        3.1.1 BMECs对葡萄糖的摄取与代谢
        3.1.2 葡萄糖对BMECs酪蛋白合成的影响
        3.1.3 BMECs不同培养模式的比较
    3.2 总体结论
    3.3 本论文创新
    3.4 需要进一步研究的问题
致谢
参考文献
作者简介



本文编号：3814476