捻转血矛线虫六种酶蛋白体外对山羊外周血单个核细胞功能的影响

发布时间：2023-05-31 02:24

　　捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)是毛圆科(Trichostrongylidae)血矛属(Haemonchus)线虫,是严重危害牛羊等反刍动物的一种重要寄生虫,虫体主要寄生于宿主第四胃,偶见于小肠,以吸食宿主血液为营养来源。目前,捻转血矛线虫病虽然在免疫学研究上有了重要的进展,但至今仍无商品化的疫苗出现,所以发掘新的抗原、进一步研究虫体抗原的特性对于疫苗的开发尤为重要。本文对捻转血矛线虫的谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,HC29)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)、烯醇化酶(enolase,ENO)、磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase, TPI)及醛缩酶(aldolase, ALD)进行了重组表达,进而研究这六种重组酶蛋白体外与山羊外周血单个核细胞的结合情况；对外周血单个核细胞细胞因子表达和增殖的影响以及对巨噬细胞吞噬功能和分泌NO的影响。1捻...

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
上篇 文献综述
    第一章 捻转血矛线虫及捻转血矛线虫病
        1 病原学
            1.1 虫体形态特征
            1.2 生活史
        2 捻转血矛线虫病
            2.1 症状及病理变化
            2.2 流行病学
            2.3 防治措施
        参考文献
    第二章 捻转血矛线虫的免疫机理及其主要抗原的研究进展
        1 捻转血矛线虫的免疫机理
            1.1 排斥反应机制
            1.2 细胞免疫
                1.2.1 肥大细胞和嗜酸性粒细胞
                1.2.2 细胞因子
            1.3 体液免疫
            1.4 免疫逃避机制
        2 捻转血矛线虫抗原的研究进展
            2.1 隐蔽抗原
                2.1.1 H11
                2.1.2 H45(P1)
                2.1.3 H-gal-GP
                2.1.4 P 52/46
                2.1.5 胱氨酸蛋白酶
            2.2 天然抗原
                2.2.1 三期幼虫的表面抗原(Hc-sL3)
                2.2.2 成虫ES15/24
                2.2.3 55kDa secretory glycoprotein(gp55),66 kDa excretory/secretory antigen
        参考文献
    第三章 捻转血矛线虫重要酶的研究进展
        1 谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,HC29)
        2 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)
        3 烯醇化酶(Enolase)
        4 磷酸丙糖异构酶(Triosephosphate isomerase,TPI)
        5 谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)
        6 醛缩酶(Aldolase,ALD)
        参考文献
下篇试验研究
    第四章 捻转血矛线虫重组蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH的表达及其与山羊外周血单个核细胞的结合试验
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
                1.1.1 试验动物
                1.1.2 重组质粒和菌种
                1.1.3 工具酶与试剂
                1.1.4 本试验所配制溶液试剂
                1.1.5 主要仪器设备
            1.2 方法
                1.2.1 重组蛋白的表达
                1.2.2 重组蛋白与外周血单个核细胞的结合试验
                    1.2.2.1 抗血清的制备
                    1.2.2.2 山羊外周血单个核细胞的分离和结合试验
        2 结果
            2.1 重组蛋白的表达纯化
            2.2 重组蛋白与外周血单个核细胞的结合试验
        3 讨论
        参考文献
        ABSTRACT
    第五章 捻转血矛线虫重组蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH体外对山羊外周血单个核细胞细因子表达的影响
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
                1.1.1 试验动物
                1.1.2 重组蛋白
                1.1.3 主要试剂和仪器设备
                1.1.4 本实验所配制溶液试剂
            1.2 方法
                1.2.1 重组蛋白刺激山羊外周血单个核细胞细胞因子的表达情况
                    1.2.1.1 山羊外周血单个核细胞的分离
                    1.2.1.2 细胞RNA的提取
                    1.2.1.3 cDNA第一链的合成
                    1.2.1.4 引物的设计
                    1.2.1.5 荧光定量PCR的反应体系
        2 结果
            2.1 不同重组蛋白刺激后细胞因子的表达情况
        3 讨论
        参考文献
        ABSTRACT
    第六章 捻转血矛线虫重组蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH对山羊外周血单个核细胞的增殖作用
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
                1.1.1 试验动物
                1.1.2 重组蛋白
                1.1.3 主要试剂与仪器设备
                1.1.4 本实验所配溶液试剂
            1.2 方法
                1.2.1 重组蛋白对山羊外周血单个核细胞的增殖效应
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
        ABSTRACT
    第七章 捻转血矛线虫重组蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH对山羊巨噬细胞吞噬和分泌NO功能的影响
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
                1.1.1 试验动物
                1.1.2 重组蛋白
                1.1.3 主要试剂和仪器设备
                1.1.4 本实验所配制溶液试剂
            1.2 方法
                1.2.1 山羊巨噬细胞的分离
                1.2.2 巨噬细胞吞噬功能的测定
                1.2.3 巨噬细胞分泌NO的测定
        2 结果
            2.1 巨噬细胞吞噬功能的测定
            2.2 巨噬细胞分泌NO的测定
        3 讨论
        参考文献
        ABSTRACT
全文总结
致谢



本文编号：3825501