巨型艾美耳球虫重组配子体蛋白的免疫保护效果研究

发布时间：2023-06-01 00:21

　　根据巨型艾美耳球虫Emgam56基因去除信号肽后的ORF序列和质粒pET-28a(+)的酶切位点设计一对特异性引物,以本室保存的重组质粒pGEM-T-Emgam56为模板,PCR扩增出目的片段,插入质粒pET-28a(+)载体中,构建重组表达质粒pET-28-Emgam56。测序正确后转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,融合蛋白在大肠杆菌中成功表达。表达产物主要以可溶性蛋白的形式存在,大小约为56 KDa。分别以鼠抗重组蛋白rEmGam56多克隆抗体和E maxima鸡康复血清为一抗进行Western-blot检测,结果显示重组蛋白具有良好的免疫原性。为研究重组蛋白rEmGam56对鸡的免疫保护效果,以死亡率、相对增重率、病变记分减少率、卵囊减少率等作为评价指标,并与重组蛋白rEmGam82-Y和卵囊免疫相比较。结果显示,重组蛋白rEmGam56高剂量组(300μg)的平均增重和相对增重率高于中剂量组(200μg)和低剂量组(100μg),与重组蛋白rEmGam82-Y高剂量组(300μg)的相近,但低于卵囊免疫组,差异显著(P<0.05);重组蛋白rEmGam56高剂量组的平...

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